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GENÉTICA BACTERIANA MICROBIOLOGIA BÁSICA PROF.MARIANA CALDEIRA RODRIGUES As bactérias possuem material genético, o qual é transmitido aos descendentes no momento da divisão celular. Este material genético se encontra em contato direto com o citoplasma (ausência de carioteca). 2 GENÉTICA BACTERIANA GENOMA: material genético em um organismo Bactéria: • informações genéticas: um único DNA circular fita dupla. • outras informações: plasmídeos (moléculas de DNA extra cromossômicas, circulares) + transposons ou elementos transponíveis (são segmentos lineares de DNA que podem se integrar ao cromossoma ou ao plasmídeo) + DNA fágico. • E.coli: DNA ocupa aproximadamente 10% do volume celular. 3 GENÉTICA BACTERIANA PLASMÍDEOS 22 de setembro de 2016Tema da Apresentação 4 DNA extracromossomial também são encontradas nos procariotos na forma de plasmídio. Estrutura circular e com genes que conferem propriedades especiais às células: fator de resistência a antimicrobianos, fatores sexuais e produção de enzimas e toxina. Não são essenciais para a sobrevivência da bactéria, embora possa proporcionar vantagens seletivas. Podem ser transferidos de uma bactéria para outra por conjugação e a maioria carrega de um a mais tipos. São capazes de autoduplicação independente da replicação cromossômica. PLASMÍDEOS 22 de setembro de 2016Tema da Apresentação 5 TRANSPOSONS 22 de setembro de 2016Tema da Apresentação 6 Transposons (genes saltadores) : pequenos segmentos lineares de DNA que podem se mover de uma posição para outra (cromossomo-plasmídio e vice versa, mesmo cromossomo ou plasmídio-plasmídio). Podem causar mutações quando eles interrompem um gene, por ocasião de sua inserção no genoma, ou quando eles saem do local onde estavam inseridos. A inserção de um transposon em um gene pode impedir a expressão do gene. TRANSPOSONS 22 de setembro de 2016Tema da Apresentação 7 Um único plasmídeo R, por exemplo, pode ter diferentes transposons com genes de resistência, como o Tn3 (resistência à ampicilina), o Tn4 (resistência à estreptomicina, à sulfonamida e ao mercúrio, além de conter o Tn3), o Tn5 (resistência à caramicina) e o Tn10 (resistência à tetraciclina). BACTERIÓFAGOS 22 de setembro de 2016Tema da Apresentação 8 Bacteriófagos: vírus bacterianos basicamente constituídos de DNA envoltos por uma capa proteica. Injetam seu material genético na célula bacteriana, a qual pode passar a transcrever essa nova informação se ela for inserida no genoma. VARIAÇÕES GENÉTICAS Tema da Apresentação 9 Bactérias podem apresentar variações genéticas que resultam em clones com propriedades distintas da linhagem original. Variabilidade genética se dá através de mutação ou recombinação. MUTAÇÃO Mutações são alterações na sequência de bases do DNA (genoma) contidas em um organismo, produzindo uma linhagem mutante. Podem ser neutras, desvantajosas, letais ou benéficas. Tema da Apresentação 10 MUTAÇÃO 11 Elas podem ser detectadas por variações fenotípicas ou variações em processo bioquímico e biofísico. Algumas vezes as alterações da base de um gene pode causar mudança na proteína codificada, sendo uma forma de variabilidade genética. MUTAÇÃO Espontânea: erro durante replicação do DNA ou pela exposição do microrganismo a fatores ambientais extracelulares – radiações ou agentes químicos; Induzida: produto de uma ação deliberada na qual o organismo é exposto à ação de agente físico, químico ou biológico que produz efeitos tóxicos sob o material genético (luz UV, raios x e gama – ex: ácido nitroso remove o grupo amino das bases nitrogenadas). Tema da Apresentação 12 Exemplos de alterações fenotípicas causadas pela mutação: - resistência a drogas (diferenças na tolerância a drogas). - incapacidade de produzir flagelo, pili, cápsula, variações na forma. . RECOMBINAÇÃO Processo de variabilidade genética que envolve transferência de material genético entre duas células, formando novas combinações gênicas. Contribui para a diversidade genética da população. É um evento raro. Não é parte essencial do ciclo de vida dos organismos procariotos. Mecanismos evolutivos que permitem a recombinação nos procariotos: Transformação Transdução Conjugação Tema da Apresentação 13 RECOMBINAÇÃO Embora as mutações sejam responsáveis pela expressão de várias novas características de uma célula, muitos fenótipos procarióticos são decorrentes da aquisição de novos fragmentos de DNA, por meio de processos de recombinação. Tema da Apresentação 14 PROCESSOS DA RECOMBINAÇÃO Tema da Apresentação 15 TRANSFORMAÇÃO TRANSFORMAÇÃO Tema da Apresentação 16 Incorporação de DNA livre, geralmente decorrente da lise celular. Na natureza, o processo ocorre quando uma célula sofre lise, liberando seu DNA. Este, por ser de grande tamanho tende a sofrer fragmentação e outras células podem absorver alguns fragmentos. DIABETES Tema da Apresentação 17 Insulina é um Hormônio humano e a deficiência dele causa a Diabetes. A produção de insulina industrial é obtida através de bactérias que foram transformadas. Gene da insulina foi incorporada aos plasmídeos de algumas bactérias e estes plasmídeos foram colocados em um ambiente e bactérias saudáveis absorveram esses plasmídeos. Assim essas bactérias transformadas começam a produzir insulina. DIABETES Tema da Apresentação 18 Tema da Apresentação 19 TRANSDUÇÃO Tema da Apresentação 20 TRANSDUÇÃO Tema da Apresentação 21 TRANSDUÇÃO Transferência de material genético mediada por vírus (bacteriófagos). 1. Transdução generalizada: requer a ocorrência de um ciclo lítico, onde pode haver o empacotamento de fragmentos de DNA da célula hospedeira. A frequência com que um determinado gene é transferido é baixa, uma vez que cada partícula transdutora leva apenas um determinado fragmento de DNA. 1. Transdução especializada: raro. A etapa inicial corresponde à infecção e lisogenização do fago. Pela ação de algum indutor (ex: UV) há a separação do fago do genoma. Em alguns casos, essa separação é defeituosa, promovendo a remoção de genes bacterianos e deixando parte do genoma viral na célula. Tema da Apresentação 22 CONJUGAÇÃO Tema da Apresentação 23 CONJUGAÇÃO Processo de transferência de DNA de uma bactéria para outra, envolvendo o contato entre as duas células. Está associada à presença de plasmídeos F. Estes plasmídeos contêm genes que permitem a transferência do DNA plasmidial de uma célula para outra ou, em outras palavras, a capacidade conjugativa. Eventualmente, os plasmídeos podem ser integrados ao cromossoma. EXPRESSÃO GÊNICA O termo expressão gênica refere-se ao processo em que a informação codificada por um determinado gene é decodificada em uma proteína. Teoricamente, a regulação em qualquer uma das etapas desse processo pode levar a uma expressão gênica diferencial. Tema da Apresentação 24 POR QUÊ REGULAR A EXPRESSÃO GÊNICA? Tema da Apresentação A quantidade de genes em uma determinada célula, é muito maior do que o número de proteínas necessário para o funcionamento daquela célula. A expressão desnecessária de genes e a consequente produção de proteínas resultariam em um gasto energético muito grande. À partir de um DNA molde até a produção de uma proteína funcional, existem vários pontos que podem influenciar a expressão gênica.
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