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FACULDADE ESTÁCIO DE SÁ CAMPO GRANDE – MS BIOQUÍMICA Desnaturação Ácida das Proteínas Acadêmicos do curso de Farmácia Camila Sandri Gisele Alves da Silva Thiago da Silva Gonçalves Introdução A desnaturação protéica é a perda da funcionalidade em decorrência de uma alteração na estrutura da proteína, originada pela ruptura de algumas ligações de sua estrutura, sendo (estruturas quaternária, terciária e secundária). A desnaturação de uma proteína pode ser reversível ou irreversível. Uma dos tipos de desnaturação é com acido onde as proteínas são quebradas e perdem sua estrutura e forma. Materiais Utilizados Pipetas de 2 mL Pipeta pasteur Peras de borracha Tubos de ensaio Tubos de centrífuga, Estantes Banho Maria a 100°C Pinça de madeira Centrífuga Ovoalbumina Acido tricloacetico Biureto NaOH Solução fisiológica Procedimento Em um tubo de ensaio colocamos 2ml de ovoalbumina, acrescentamos a amostra 1ml de acido tricloacetico. Amostra foi para centrifuga por 3 minutos, para separação do líquido e solido. Após centrifugação utilizamos a pipeta de Pasteau e separamos o sobrenadante do precipitado. No tubo do sobrenadante adicionamos 1ml de Biureto. No tubo do precipitado foi adicionado 1ml de solução fisiológica, mais 1ml de Biureto e 1ml de NaOH. RESULTADO Ao colocar ácido e homogeneizar com a proteína foi observado que a amostra teve coloração branca ficou mais liquida. Após terminar a centrifugação era possível e de fácil visualização ver a separação do liquido e solido. No tubo onde colocamos o sobrenadante e adicionamos 1 ml de Biureto, mais NaOH para tornar meio alcalino, percebemos que a amostra não apresentou a coloração característica púrpura, apresentando que a proteína tinha sido desativada, perdido sua estrutura tridimensional. No tubo com precipitado foi adicionado a solução fisiológica mais 1ml de Biureto, mas a amostra também não apresentou coloração característica púrpura. Mas após ser adicionado a amostra 1ml de NaOH, ela confirmou a presença da proteína, deixando a amostra com cor característica púrpura. Campo Grande, 26 de agosto de 2015.
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