Relatório de Microbiologia

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UNIVERSIDADE ESTÁCIO DE SÁ DE SANTA CATARINA
CAMILA THESSING
JANAINA BASTOS LIMA DA SILVA
MARIANA PEREIRA DOS SANTOS
PAULA ODY TORQUATO DE OLIVEIRA
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS
Disciplina de Microbiologia 
Professora Ana Paula Dores Ramos
Curso de Enfermagem
Curso de Farmácia
Curso de Nutrição
Turma matutino E
São José
2017
MICROBIOLOGIA DO AMBIENTE
1 – Introdução
	A microbiologia ambiental é um sub-ramo da microbiologia em si, se dedica ao estudo da composição e fisiologia das comunidades microbianas no ambiente, ou seja, no solo, água, ar ou em sedimentos. Com os avanços da biologia molecular aumentou-se a habilidade de detectar e identificar microrganismos e suas atividades no ambiente.
	A coloração de Gram recebeu este nome em homenagem a seu descobridor, Ham Cristian Joaquim Gram em 1884, ele observou que as bactérias obtinham colorações diferentes, quando tratadas com diferentes corantes. Isso veio a classifica-las em dois grupos: as que ficavam vermelhas e as que ficavam roxas, sendo chamadas de Gram-negativas e Gram-positivas.
	A parede celular de bactérias Gram-positivas difere das bactérias Gram-negativas pela presença de uma espessa camada de peptidoglicano e pela ausência de uma membrana externa. Esta diferença de constituição da parede celular é à base da coloração de Gram, uma técnica primordial no diagnóstico microbiológico, visto que através dela se definem características morfológicas e tintoriais da bactéria em pesquisas.
	A coloração de Gram consiste em tratar bactérias sucessivamente com cristal violeta, lugol, álcool/acetona e fucsina. O cristal violeta e o lugol formam um complexo denominado iodopararosanilina, o qual confere coloração roxa tanto nas bactérias Gram-positivas, quanto nas Gram-negativas. Com a adição de álcool/acetona, as bactérias Gram-negativas liberam o complexo formado, pois a camada de peptidoglicano é de pequena espessura, enquanto que as Gram-positivas retêm o complexo, permanecendo roxas. A adição de fucsina não altera a cor das Gram-positivas, mas confere à cor avermelhada as bactérias Gram-negativas, que foram descoloridas pelo álcool/acetona.
2 – Objetivos
	Isolar e caracterizar microrganismos do ambiente através de suas propriedades morfo-tintoriais.
 
3 – Material e métodos 
(ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS E OBTENÇÃO DE CULTURA MISTA A PARTIR DO AMBIENTE)
Material:
- 1 tubo de água destilada esterilizada;
- 1 tubo com caldo “Brain Heart Infusion” (BHI);
- 1 “Swab” esterilizado;
- Bico de Bunsen;
- Fósforo;
- 1 placa de Petri com ágar nutritivo;
- Alça bacteriológica para inoculação;
- Estufa bacteriológica a 37° C;
Métodos:
- Identificar a placa com a origem do material;
- O “Swab” deve ser aberto e umedecido na água estéril, perto da chama do Bico de Bunsen;
- Fazer a coleta da amostra com o “Swab” o mais rápido possível, para não haver contaminações. De volta à área asséptica de chama, descarregar o conteúdo do “Swab” no tubo com caldo BHI e inocular a 37° C por 18-24 hrs;
- Após a obtenção das colônias de microrganismos, deve-se efetuar a anotação das características morfológicas macroscópicas das colônias selecionadas, tais como: forma, tamanho, cor, elevação e bordas;
- Escolher uma das colônias e proceder a realização do esfregaço, coloração de Gram e observação ao microscópio.
(TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM)
Material:
- 1 tubo de água destilada esterilizada;
- Lâminas de microscopia;
- Alça bacteriológica;
- Estufa bacteriológica a 37° C;
- Bico de Bunsen;
- Fósforo;
- Bateria de coloração de Gram: - Gram I (cristal violeta);
 - Gram II (lugol);
 - Gram III (Álcool/acetona);
 - Gram IV (Fuscina);
4 – Resultados
Fig 1. Bactérias coradas pelo Gram e observadas ao microscópio sobre a objetiva de 100x com óleo de imersão.
Crescimento na cultura mista no caldo BHI;
Houve isolamento de colônia bacteriana no Ágar nutritivo;
Foram observados Cocos Gram-Negativos de coloração roxos.
5 – Conclusão
	Ao fim deste experimento podemos concluir que os resultados obtidos com o experimento foram suficientes para definir o assunto tratado, atendendo ao objetivo inicial do trabalho, que era isolar microrganismos de ambiente e caracteriza-los através de suas propriedades morfo-tintoriais. 
6 – Referências bibliográficas
DELL CISTIA, Camilo. Microbiologia Básica. Rio de Janeiro: Sess, 2015.
Sociedade Brasileira de Microbiologia, Microbiologia Ambiental. Disponível em: <http://sbmicrobiologia.org.br/areas/microbiologia-ambiental/> Acesso em 17 de setembro de 2017.
Kasvi, Coloração de Gram, O que é bactéria gram-positiva e gram-negativa? Disponível em <http://www.kasvi.com.br/bacteria-gram-positiva-gram-negativa/ > Acesso em 17 de setembro de 2017.