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Relatório de Bioquímica Identificação de Proteínas – Método de Biureto Introdução As proteínas são componentes essenciais de todos os seres vivos e desempenham funções muito diversas. São macromoléculas (moléculas muito grandes) constituídas por longas cadeias de aminoácidos. Por serem formadas por aminoácido e considerando-se que os aminoácidos aromáticos absorvem a luz na região ultravioleta, as proteínas, em geral, podem ser detectadas. No entanto, a detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações específicas com determinados reativos, os quais originam substâncias coloridas que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação. Dentro outros métodos utilizados situam-se o método do Biureto, que é baseado na reação do sulfato de cobre em meio alcalino (reativo do Biureto) com proteínas e peptídeos. Uma ligação peptídica é uma ligação química que ocorre entre duas moléculas quando o grupo carboxila de uma molécula reage com o grupo amina de outra molécula, liberando uma molécula de água (H2O). Isto é, uma reação de síntese por desidratação que ocorre entre moléculas de aminoácidos. A ligação peptídica é o que prende os aminoácidos que são os componentes das proteínas. Existem numerosos métodos na literatura que se presta para a dosagem de proteínas em materiais biológicos, sendo que a conveniência de utilização de cada um deles deve ser avaliada para cada amostra em questão. Citaremos aqui apenas o método de biureto o qual é simples e bastante utilizados nas dosagens de rotina. Objetivo O objetivo do Método de Biureto é a identificação da proteína. Materiais - Pipetador automático - 3 tubos de ensaio - Reagente de Biureto - 1 ml de solução de clara de ovo - 1 ml de Alanina - 1 ml de soro fisiológico Metodologia - Enumerar 3 tubos de ensaio - Adicionar 1 ml de Biureto nos tubos - Adicionar 1 ml de amostras no tubo, respectivamente: Tubo 1: 1ml de solução da clara do ovo Tubo 2: 1 ml de Alanina Tubo 3: 1 ml de soro fisiológico Resultado - O tubo 1 resultou em coloração de cor violeta. - O tubo 2 não houve coloração. - O tubo 3 não houve coloração. Conclusão - O tubo 1 resultou em uma coloração violeta, determinando que há proteína na clara do ovo. - O tubo 2 não houve coloração, devido os aminoácidos estarem soltos, não havendo ligação. - O tubo 3 não houve coloração, pois é uma solução sem presença de aminoácido. Grupo: Helen Assis Lucas Vasconcelos Melyna Gomes Otávio Paes
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