Relatório Microbiologia 2 (1)

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Disciplina: Bacteriologia e micologia Turma: Farmácia/ 4° Semestre Turno: Matutino
Professor: Daniel
Data do experimento: 22/08/2017
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA PREPARAÇÃO DE INÓCULO, DILUIÇÃO SERIADA E SEMEIO.
 Grupo 1: 
Alícia Mylena 
Caio Lustosa
Lidiane O.de Freitas
Sthefanne Medeiros 
Taguatinga-DF Agosto, 2017
INTRODUÇÃO
 Inóculo bacteriano é a parte do patógeno capaz de causar infecção, também chamado de pé de cuba ou pé de fermentador e em biotecnologia a denominação dada a suspensão de microrganismos de concentração adquirida, a ser usada na fermentação do mosto (Trabulsi, L. R.; Althernum, F, 2004).
 Uso do inoculo: Realização de uma cultura bacteriana, precisamos de um inóculo e de um meio de cultura.
 Diluição seriada é uma serie de diluições simples que amplificam o fator de diluição. Para fazer uma diluição simples é necessário combinar a amostra líquida de interesse com uma determinada quantidade de solvente para que possa chegar na concentração desejada. O objetivo desse tipo de diluição e ir diminuindo progressivamente a quantidade de soluto em relação ao diluente (CÂMARA, B, 2017).
 As diluições seriadas são muito utilizadas em analises clinicas e em pesquisa cientifica. 
 Semeio é o método pelo qual se transfere inóculos bacterianos de um meio de cultura ou material a ser analisado, para outro meio de cultura. São utilizadas as técnicas assépticas: Procedimentos que devem ser adotados visando a não contaminação dos materiais meio de cultura (Vicente, E. J, 2007). 
OBJETIVOS
Executar técnicas de semeadura em meios líquidos e sólidos em tubos e placas, preparar o inóculo e utilizar o espectrofotômetro para ajuste de absorvância.
MATERIAIS (PREPARAÇÃO DO INÓCULO)
Bactérias ATCCs.
Tubo com meio Mueller Hinton
Espectrofotômetro
Agitador (Vortex)
Cubetas 
Pipeta Semi automática 
Ponteiras
 3.1 MATERIAIS ( SEMEIO DO INÓCULO)
Bactérias na escala 0,5 de Mc Forland
Placas de petri com meio de cultura
Swab
3.2 MATERIAS (DILUIÇÃO SERIADA) 
 Tubos com caldo
Placas com meio Mueller Hintan agar
Alça bacteriológica calibrada 10 ml
Pipeta
Ponteiras
Agitador (Vortex) 
 
PROCEDIMENTOS
Preparação do inóculo
Transferiu-se 1ml do caldo com a bactéria para o tubo contendo 9 mL do meio Muller Hinton;
 Agitou-se no vortex e em seguida levou-se para o espectrofotômetro para ajuste;
 Transferiu-se 1 mL do caldo com a bactéria diluída para a cubeta, colocou-se no aparelho e fez-se a leitura a 625 mn;
Ajustou-se a absorvância em 0,085 conforme imagem 1. 
 Imagem 1: Ajuste de absorvância do inóculo. 
 4.2 Semeio do inóculo
Pegou-se o Swab, mergulhou-se no tubo ajustado na escala Mc Forland, semeou-se nas placas das mais nutritivas para as seletivas seguindo a ordem: AGAR SANGUE - MC - BME – SS (Imagem 2);
 Imagem 2: semeio do inóculo na placa de petri.
Em seguida guardaram-se as placas na estufa a 36°C por 24 horas (Imagem 3).
Imagem 3: Armazenamento das placas semeadas na estufa a 36°C por 24h. 
Diluição seriada
Transferiu-se 1 ml do inóculo ajustado para o primeiro tubo com 9 ml de caldo; Agitou-se o tubo e transferiu-se 1 ml para o próximo tubo (Imagem 4);
 Imagem 4: Transferência do inóculo ajustado para o tubo.
Agitou-se o tubo com o Votex, retirou-se 1 ml do líquido do e transferiu -o ao seguinte tubo de ensaio denominado 10-² ; 
Retirou-se 1ml do tubo de ensaio com a segunda diluição e transferiu-o ao próximo tubo de ensaio denominado 10-³ ;
Retirou-se 1ml do tubo de ensaio com a terceira diluição e transferiu-o ao seguinte tubo de ensaio denominado 10-4 ;
Em seguida pegou-se a alça bacteriológica calibrada em 10μL, inseriu-a no tubo de diluição 10-² e semeou-se na placa com meio Muller Hinton, o mesmo processo foi repetido com os tubos de diluição 10-³ e 10-4 ;
Nomearam-se as placas de Muller Hinton conforme diluição dos tubos 10-², 10-³ e 10-4; 
Guardaram-se as placas semeadas e devidamente identificadas, conforme diluição e grupo da sala na estufa.
CONCLUSÃO
 Pode-se concluir que, as técnicas de semeadura tem como finalidade a transferência de bactérias ou de cultura bacteriana de algum material ou local para o meio de cultura preparado, para que sejam semeados. 
 A forma com que é feito o meio de cultura é importante para a qualidade da pesquisa e desenvolvimento da colônia, podendo acarretar na ineficácia do meio de cultura e dessa forma, não semear a colônia..
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 CÂMARA, B.	fazer diluições seriadas. Biomedicinapradrão .	 Disponível	em: <http://www.biomedicinapadrao.com.br/2016/04/como-fazer-diluicoes-seriadas.html?m=1> Acesso em: 28 agosto. 2017.
Trabulsi, L. R.; Althernum, F. Microbiologia. 4ª edição. Editora Atheneu. 2004
Vicente, E. J.; Apostila de Aulas Práticas de Microbiologia. USP – ICM – Disciplina Microbiologia Básica. 2007