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Engenharia Genética - Apresentação

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ENGENHARIA GENÉTICA
Júlia de azevedo nº5 turma 3001
 Transgenia
 clonagem
 TÉCNICA DE PCR 
 Epigenética
 Professor: rodrigo soares
2016 – angra dos reis 
Estrutura do DNA
Código Genético
Engenharia genética e suas aplicações
Manipulação dos Genomas. 
Utilização do DNA recombinante. 
Aplicações
Testes de Paternidade e Identificação de Criminosos.
Localização de Genes relacionados a doenças (genéticas)
Identificação de Genes relacionados com aparecimento do Câncer.
Terapia Gênica.
Produção de vacinas sintéticas.
Obtenção de organismos transgênicos.
História da Engenharia Genética
1930 - Dois pesquisadores norte-americanos demonstraram a regulação pelos genes da produção de proteínas e enzimas e a consequente intervenção nas reações dos organismos dos animais. A partir destas pesquisas, teve início o progresso de descoberta da estrutura genética humana. 
1944 - pesquisando a cadeia molecular do ácido desoxirribonucleico (DNA), ou (RNA), descobriu que este é o componente cromossômico que transmite informações genéticas. 
1953- conseguiram mapear boa parte da estrutura da molécula do DNA.
1961- Descobriram que o principal responsável pela síntese é o DNA, que passou então a ser o elemento central das pesquisas de engenharia genética. 
História da Engenharia Genética
1972 - Ligou duas cadeias de DNA. Uma era de origem animal, a outra bacteriana. Esta foi a primeira experiência bem sucedida onde foram ligadas duas cadeias genéticas diferentes, e que é considerada por muitos autores o início da criação sintética de produtos de engenharia genética.
1978 - o suíço Werner Arber e os norte americanos Daniel Nathans e Hamilton O. Smith foram laureados com o Prêmio Nobel de medicina ou fisiologia por terem isolado as enzimas de restrição.
1983 - Desenvolvimento da técnica de PCR por Kary Mullis.
gENOMA
Totalidade do Sequenciamento Genético de um organismo/espécie.
Decifrar o genoma das diferentes espécies – Para entender o funcionamento mais básico do organismo, como que ocorre a síntese das diferentes proteínas e controle do metabolismo.
Projeto Genoma Humano
Projeto genoma humano 
Início: 1990
Término: 1995
Criação de testes para predisposição à doenças de início tardio como Parkinson e Câncer de pulmão.
Criação de teste de diagnóstico conclusivo como craniossinostoses e fibrose cística.
~ 25 MIL GENES =
 20% DO DNA
Enzimas de restrição ou endonucleases
Enzimas que cortam a molécula de DNA através do reconhecimento de sequências nucleotídicas que específicas.
G A A T T C
C T T A A G
PALÍNDROMOS
5’ 3’ 
3’ 5’ 
G
C T T A A
 A A T T C
 G
5’ 3’ 
3’ 5’ 
DNA ligase
Enzimas que permitem catalisar as reações em que as extremidades livres são ligadas a nova sequências de DNA (novo gene) por complementaridade de bases.
Banco genômico 
Banco de DNA – todas as moléculas de DNA geradas pela inserção do ácido nucléico da fonte de interesse num determinado vetor.
Existem vários tipos de banco.
Bancos de DNAc 
Identificação de um clone.
Amplificação de um fragmento de DNA milhares de vezes em apenas algumas horas. 
Aplicações práticas em geral
Setor Industrial 
GH
INTERFERON 
ALPHA 2B
Aplicações práticas em geral
Setor Alimentar
Leucina para sarcopenia
Glutamina no sistema imunológico
Glutamina no trato intestinal 
BCAA’s para suplementação esportiva
Setor Químico
Melhoria e ampliação nos processos de produção de matérias-primas
Utilização de microorganismos capazes de fermentar compostos de maior complexibilidade
Culturas mistas de microorganismos
Bactéria Álcaligenes eutropus = produção de polihidroxibutirato (PHB) 
Produção de vacinas NA ENGENHARIA GENÉTICA
► Identificação do gene que codifica para a proteína imunodominante;
► Amplificação do gene;
► Inserção do gene em uma bactéria ou fungo;
► Indução da produção da proteína pelo fungo ou bactéria;
► Purificação da proteína;
► Associação com adjuvante.
CLONAGEM
MOLECULAR
Plasmídeo
Cromossomo
Bactéria
Bactéria
Enzima de Restrição
Gene de Interesse
DNA ligase
Bactéria
Bactéria
Bactéria
Bactéria
Bactéria
Bactéria
Bactéria
Bactéria
TODAS AS BACTÉRIAS QUE ORIGINARAM DAQUELA QUE RECEBEU O GENE DE INTERESSE TAMBÉM CARREGAM O GENE QUE FOI
INSERIDO!!!!!!!
CLONAGEM
REPRODUTIVA
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Meio de Cultura com pouco nutrientes
Óvulo
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Meio de Cultura com pouco nutrientes
Óvulo
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Meio de Cultura com pouco nutrientes
Óvulo
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Meio de Cultura com pouco nutrientes
Óvulo
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Meio de Cultura com pouco nutrientes
Óvulo
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Meio de Cultura com pouco nutrientes
Óvulo
Meio de Cultura com bastante nutriente
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Meio de Cultura com pouco nutrientes
Óvulo
Meio de Cultura com bastante nutriente
Ovelha Scottish Blackface
Ovelha Finn Dorset
Células Somáticas Mamárias
Meio de Cultura com pouco nutrientes
Óvulo
 Outra Ovelha Scottish Blackface
DOLLY!!!
CLONAGEM
TERAPÊUTICA
Transgênicos
Gene marcador 
Gene repórter
Método Indireto
Transgênicos
Método Direto
ELETROPORAÇÃO DE PROTOPLASTOS
Biobalística
MicroiNJeção 
Produtos transgênicos comercializados
Produto
Nome Comercializado
Identificador Único
OrganismoDoador
Características
Proteína
Detentor da Tecnologia
Soja
RoundupReady
MON–Ø4032–6
Agrobacterium
Tumefaciens
Tolerante a Herbicida
CP4-EPSPS
MONSANTO
Cultivance
BPS–CV127–9
Arabidopsisthaliana
Tolerante aHerbicida
CSR 1-2
BASF E EMBRAPA
Milho
YieldGard
MON–ØØ81Ø–6
Bacillusthuringiensis
Resistente a Inseto (RI)
Cry1Ab
MONSANTO
LibertyLink
ACS–ZMØØ3–2
Streptomycesviridochromogenes
Tolerante a Herbicida (TH)
PAT
Bayer
Algodão
RoundupReady
MON–Ø1445–2
Agrobacteriumtumefaciens
Tolerante a Herbicida (TH)
CP4-EPSPS
MONSANTO
Feijão
Embrapa 5.1
EMB-PVØ51-1
BGMV -BeanGoldenMosaicVirus
Resistenteao vírus do dourado mosaico do feijoeiro
EMBRAPA
EPigenética

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