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1 MORFOLOGIA E ULTRAESTRUTURA DE BACTÉRIAS Profa. Patrícia Gomes Cardoso Procariotos X Eucariotos Características das bactérias - Procarioto - Unicelular - Reprodução assexuada - Nutrição por absorção - Metabolismo diversificado (heterotróficas e autotróficas) - Número de cromossomos: a maioria 1 cromossomo, circular DNA fita dupla. Tamanho - 2 à 8 micrometros (µm) - 0,2 à 0,5 µm Epulopiscium fishelsoni- simbionte do peixe-cirurgiao (600µm de comprimento). O Pequeno tamanho dos procariotos comparado ao dos eucariotos contribui para muitas características desses organismos como interação mais intensa com o ambiente e maior velocidade de absorção de nutrientes. Isso resulta em um crescimento mais rápido Os nutrientes e escorias são transportados para dentro e fora da célula via membrana citoplasmática e a velocidade desse transporte determina a velocidade metabólica e, portanto, a velocidade de crescimento das células. Quanto menor o tamanho, maior é a relação entre a área superficial da membrana em relação ao volume e, portanto, maior é o potencial de crescimento. Tamanho dos procariotos Morfologia celular Formas mais comuns de bactérias Arranjos Arranjo de cocos Arranjo de bacilos Bacilos ≠ Bacillus Bacillus sp. Bactérias espirais Flagelos Filamentos p/ locomoção Pleomórficas – espécies que apresentam uma variedade de tipos celulares. Ex: Rhizobium e Corynebacterium. Pedunculada Estrutura celular de bactérias Flagelos Monotríqueo Lofotríqueo Peritríqueo Anfitríquio Função e importância Motilidade Ambientes: favoráveis vs adversos Depende de energia Proteína - flagelina Estrutura de flagelos bacterianos Etapas da biossíntese dos flagelos Flagelo bacteriano Fotomicrografia Estrutura filamento + CAP Flagelos Taxia- movimento direcionado Quimiotaxia Fototaxia Aerotaxia Osmotaxia Flagelos de eucariotos Filamentos axiais Ex: Treponema pallidum – agente causador da sífilis Fímbrias Flagelos ≠ Fímbrias • curtos, finos e retos Aderência Pilina Pólos ou toda sup. da célula Ex: Neisseria gonorrhoeae Pili - Conjugação Pili Transferência do plasmídeo F entre bactérias pelo processo de conjugação bacteriana Glicocálice Função • Aderência • Reserva nutriente • Proteção- agentes químicos, fagocitose e dessecação Composição química • Polissacarídeo (Streptococcus, Klebsiela, Haemophilus, Neisseria) • Proteíca • Ácido poli D- glutâmico Cápsula- rígido Camada limosa- flexíveis organização B. anthracis Streptococcus sp. (cárie) Pseudomonas Escherichia coli enteropatogênica Praga na Indústria- lodo Parede Celular Estrutura do Peptideoglicano Unidades de peptídeos e glicanos originando a camada de peptideoglicano Parede de bactérias Gram-positivas Acido teicóico polímero de unidades repetidas de ribitol Carga negativa Parede Celular Gram Positiva Parede Celular Gram negativa ENDOTOXINA Fosfolipídeos Proteínas Polissacarídeos Específicas Inespecíficas Ação da penicilina sobre a parede celular bacteriana Ação da lisozima • Quebra as ligações glicosídicas • Antimicrobiano natural: lágrima, saliva, ovo • Inibe a síntese da parede celular bacteriana Protoplastos A lisozima cliva as ligações β-1,4 do peptideoglicano. a) em soluções diluídas, a ruptura da parede é imediatamente seguida pela lise celular, devido a fragilidade estrutural da membrana citoplasmática. b) em solução isotônica, a água não penetra no protoplasto e ele permanece estável Paredes Celulares Atípicas • Mycoplasma – não possuem parede celular. Contem esteróis na membrana plasmática. São menores que as bactérias (0,3µm) e podem causar doenças em humanos. • Arqueobactérias – estrutura variada: Pseudopeptideoglicano e Polissacarídeos Coloração de Gram- coloração diferencial Gram positivas Gram negativas Coloração de Gram Etapa organismos Gram + organismos Gram - 1. Incolor 2. Cristal Violeta 3. lugol 5. Safranina 4. Alcool Colorações especiais Membrana Citoplasmática Pontes de hidrogênio Ca2+, Mg2+ (-) fosfolipídeos Estabilidade da estrutura Estrutura da membrana citoplasmática A membrana é constituída de lipídeos e proteínas. Eucariotos apresentam esteróis (moléculas planas e rígidas). Archea apresentam lipídeos com ligações éter entre o glicerol e suas cadeias laterais hidrofóbicas (não possuem ácidos graxos). Estrutura da membrana citoplasmática da bactéria - Dupla camada de fosfolipídeos • região hidrofílica X região hidrofóbica - Proteínas: periféricas e integrais - Modelo: Mosaico fluido - Ausência de esteróis - menor rigidez - Presença de hopanoides em algumas espécies (≅ esteróis, resistência) (a) Estrutura geral de um esterol. (b) Estrutura do colesterol (c) Estrutura de um hopanóide: diplopteno • Permeabilidade seletiva • Sitio de ligação de varias proteínas • Transporte de nutrientes • Processos de geração de energia: fotossíntese e respiração • Alvo da ação de agentes antimicrobianos Membrana citoplasmática procariótica Permeabilidade da membrana plasmática Substancia Grau de permeabilidade Potencial de difusão para o interior da célula Água 100 Excelente Glicerol 0,1 Bom Triptofano 0,001 Moderado/fraco Glicose 0,001 Moderado/fraco Íon cloretp 0,000001 Muito fraco Íon potássio 0,0000001 Extremamente fraco Íon sódio 0,00000001 Extremamente fraco Fonte: Microbiologia de Brock, 2010. Processos de transporte passivo Difusão simples Difusão facilitada Osmose Transportes Difusão e Osmose Osmose Proteínas transportadoras - Permite acúmulo de soluto contra gradiente de concentração - Permite maior velocidade no transporte de solutos - Permite a entrada dos solutos (ou seja não somente aqueles defendíveis pela membrana) Transporte ativo Utiliza energia do ATP ou força próton motora ou compostos de alta energia para o transporte de substancias contra um gradiente de concentração Estruturas dos transportadores transmembrânicos e os tipos de eventos de transporte As três classes de sistemas transportadores de membrana (proteínas transportadoras) Atividade do sistema Lac permease (um simportador) de E. coli e vários outros transportadores simples Translocação de grupo fosfotransferase de E. coli Proteínas citoplasmáticas Face interna da membrana Proteína integral da membrana Mecanismos transportados do tipo ABC Mais de 200 sistemas de transporte ABC foram identificados em procariotos Cromossomo e Plasmídeos Plasmídeos- vantagens para célula Cromossomo da Escherichia coli Formado por uma molécula de DNA de fita dupla circular fechada. Aproximadamente 4,6 milhões de pares de bases (4,2 x 103 kb) ~4.300 genes Mycoplasma–750 kb Exceção: Streptomyces lividans, Rhodococcus faciens e espiroquetas do gênero Borrélia, apresentam cromossomos lineares e algumas espécies de bactérias do gênero Brucella que apresentam dois cromossomos. DNA de uma célula rompida Mapa genético Maioria moléculas de DNA circular, dupla fita; Replicam independentemente do DNA cromossômico;Contém de 5 a 100 genes não essenciais para sobrevivência da bactéria em condições normais de crescimento; Caso a célula perca a molécula ela não perde sua viabilidade; Relacionados a resistência aos antibióticos, tolerância aos metais tóxicos, produção de toxinas e síntese de enzimas para degradação de compostos complexos. São manipulados e usados na engenharia genética Plasmídeos • Dispersos no citosol • Ribossomos 70S: Constituídos de duas subunidades 50S e 30S • Síntese protéica • Alvo de vários antimicrobianos Ribossomos procarióticos Corpúsculos de Inclusão Grânulos de armazenamento utilizados como fonte de material de reserva ou energia. -glicogênio e amido- presença demonstrada pela reação com o iodo -poliidroxibutirato- material plástico biodegradável para industria. ex: Rhodospirillum -polifosfatos (volutina ou metacromáticos) -usados na síntese de ATP- ex: Corynebacterium diphtheriae –importância diagnóstica. -enxofre- ex: Thiobacillus -Magnetossomos- inclusões de oxido de ferro. Ex: Aquaspirillum PHB = polihidroxibutirato PP = polifosfato ou grânulo de Voutina Magnetossomo Cromatóforos Dobras da membrana plasmática onde acumulam-se pigmentos e enzimas responsáveis pela fotossíntese Vesículas de Gás Procariotos aquáticos: Cianobactérias, bactérias fototróficas verdes e púrpuras, Archaea. Importância - flutuação Esporos bacterianos - Endosporos • Estrutura de resistência (calor, radiação, dessecação, etc.) • Altamente desidratado • Formado em algumas Gram positivas (Bacillus e Clostridium) • Apresenta acido dipicolínico, íons de cálcio Esporulação somente ocorre quando há interrupção do crescimento, devido a exaustão de um nutriente essencial ou condição física extrema. Em Bacillus o processo completo dura ~8 horas e mais de 200 genes estão envolvidos. Tipos de Endosporos Terminais Centrais Germinação: Podem permanecer dormentes por muitos anos. Em condições adequadas (condições químicas e físicas) podem voltar a forma vegetativa rapidamente. Importância na industria de alimentos!
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