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Replicação do DNA Disciplina: Genética Humana Professora: Isadora Machado Teixeira Lima O que é replicação de DNA? • A replicação corresponde à produção de cópias idênticas de DNA. • Ocorre na fase S do ciclo celular para que as células em multiplicação repassem cópias idênticas de DNA às células-filhas. Padrão geral de replicação • Rompimento das pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas duas fitas de DNA com bases não-pareadas • Duas fitas = moldes (originarão fitas complementares) • Quando a replicação se completa moléculas de DNA idênticas à original Padrão geral de replicação SEMICONSERVATIVA Mecanismo de replicação • A separação das bases para iniciar a replicação começa em vários pontos denominados origens de replicação. • Essa separação das bases progride ao longo do DNA síntese de novas fitas. Bolha de replicação Mecanismo de replicação Novas fitas de DNA Bolha de replicação Forquilha de replicação DNA polimerase • A síntese de novas fitas de DNA durante a replicação é realizada por enzimas denominadas DNA polimerases (I, II e III). • As DNA polimerases atuam adicionando nucleotídeos livres à ponta 3´ do novo filamento que está sendo formado Sentido único da replicação: 5´ 3´ DNA polimerase DNA polimerase REPLICAÇÃO DO DNA 5´ 3´ 5´ 3´ DNA polimerase • As DNA polimerases I, II e III possuem duas funções importantes: - Polimerização (formação de polímeros de nucleotídeos) no sentido 5’ 3’ - Reparo do DNA correção de pequenos equívocos que ocorrem durante a polimerização (evita MUTAÇÕES) Atividade exonucleásica: 3´ 5´ DNA polimerase • DNA polimerase I – função particular: - Remoção de blocos de nucleotídeos ( ~ 10 nucleotídeos) da fita de DNA - Sentido oposto ao do reparo do DNA Atividade exonucleásica: 5´ 3´ DNA polimerase • As DNA polimerases I, II e III obedecem as seguintes propriedades: - Sempre requerem um molde de DNA - Realizam pareamento complementar (A- T; C-G) - Polimerização: 5´ 3´ - Iniciam polimerização apenas se houver um oligonucleotídeo iniciador (Primer) DNA polimerase Eventos na forquilha de replicação Separação da dupla-hélice parental - Quebra dos pareamentos de bases (Helicase) - Desenrolamento do DNA DNA topoisomerases (Ex: DNA girase) - Proteínas de ligação unifilamentar (SSBs) - Formação das bolhas e forquilhas Eventos na forquilha de replicação Separação da dupla-hélice parental Forquilha 2Forquilha 1 Eventos na forquilha de replicação Fitas de replicação contínua e descontínua - Duas fitas de DNA têm sentidos opostos - Polimerização: 5´ 3´ - Fitas moldes devem ser lidas no sentido 3´ 5´ -Fitas de replicação contínua e descontínua (Fragmentos de Okazaki) Eventos na forquilha de replicação Eventos na forquilha de replicação Iniciação e união dos fragmentos de Okazaki - DNA polimerase requer um primer para iniciar a polimerização - Primer: ribonucleotídeos (RNA polimera- rase = primase) -Um primer cada fragmento de Okazaki Eventos na forquilha de replicação Iniciação e união dos fragmentos de Okazaki - DNA polimerase I síntese de DNA e remoção dos primers (substituição) nos fragmentos de Okazaki - União dos fragmentos de Okazaki: DNA ligase. Eventos na forquilha de replicação Helicase Proteínas SSBs Topoisomerase Contínua Descontínua Procariotos X Eucariotos • Replicação de DNA semelhante • Diferenças - Procariotos: DNA polimerases I, II, III - Eucariotos: DNA polimerases α, β, γ, δ, ε - Velocidade da forquilha: 25x maior em procariotos -Mais bolhas de replicação em eucariotos (Ex: humanos = 60.000)
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