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BACTERIOLOGIA Prof. Ezequiel de Deus Macapá, 18 de Agosto de 2016 1 Introdução Bacteriologia - ramo da microbiologia que se dedica ao estudo das bactérias. Bactérias? São organismos unicelulares procarionte. Bactérias Pertencentes ao Reino Monera: dois grandes grupos: Arqueobactérias ou Archaea cerca de 20 espécies atuais; Gênero Halobacterium (tolerantes ao sal) Eubactérias ou Bacteria: bactérias cianobactérias. 3 Fímbrias Cápsula Parede celular Plasmídeos DNA associado ao mesossomo Nucleóide Flagelo Enzimas relacionadas com a respiração, ligadas à face interna da membrana plasmática Mesossomo Citoplasma Ribossomos Membrana plasmática Estrutura 4 Estruturas (quase) sempre presentes Membrana plasmática: natureza lipoprotéica; permeabilidade seletiva. Parede celular: composição básica: peptideoglicano: algumas também possuem membrana externa lipídica; ausente em micoplasmas e riquétsias Nucleoide (cromossomo): DNA circular não associado a histonas: Citoplasma: matriz composta por cerca de 70% de água, além dos demais compostos celulares; apresenta um grande concentração de ribossomos e proteínas. Ribossomos: síntese de proteínas. 5 Estruturas sempre presentes Mesossomo: invaginação da membrana plasmática: participação na segregação dos cromossomos durante a divisão, papel respiratório apresenta enzimas respiratórias associadas à sua face interna, papel na esporulação. Inclusões: polímeros de reserva insolúveis: orgânicos: Glicogênio e amido. inorgânicos: polifosfatos e enxofre. 6 Estruturas que podem ou não estar presentes Flagelos: formados por subunidades da proteína flagelina; locomoção De acordo com o número e distribuição dos flagelos, as bactérias podem ser classificadas como: atríquias (sem flagelos), monotríquias (um único flagelo) - A, lofotríquias (um tufo de flagelos em uma ou ambas as extremidades) - B, anfitríquias (um flagelo em cada extremidade) - C, peritríquias (apresentando flagelos ao longo de todo o corpo bacteriano) - D. 7 Fímbrias ou pêlos: formadas por subunidades repetitivas da proteína pilina; proteína adesina na extremidade: adesão a superfícies favorece a colonização; receptores para bacteriófagos, capacidade de conjugação (fímbrias sexuais ou pilus F). Pilus F Estruturas que podem ou não estar presentes 8 Plasmídeos: DNA circular extra-cromossômico, de replicação autônoma: plasmídeos R resistência a antibióticos; plasmídeos F capacidade de transferir material genético por conjugação (reprodução sexuada); Estruturas que podem ou não estar presentes 9 Cápsula: material viscoso externo à parede celular: geralmente polissacarídeos, raramente polipeptídeos; natureza heteropolimérica em alguns: adesão a superfícies; proteção contra dessecação; proteção contra a fixação de bacteriófagos; proteção contra a fagocitose pelas células de defesa do corpo: aumento do poder de infecção. Estruturas que podem ou não estar presentes 10 Endósporos Bacterianos Os endósporos são estruturas formadas por algumas espécies de bactérias Gram-positivas: Clostridium, Bacillus. Resposta a uma situação desfavorável do meio ambiente. Alguns membros do gênero Clostridium causam doenças como, o tétano. Estruturas que podem ou não estar presentes Parede celular Espessa, rígida e permeável: envolve e dá forma à célula; permite troca de substâncias entre a célula e o meio. proteção contra determinados agentes físicos e químicos externos: resistência contra choques mecânicos; determinante de especificidade antigênica; responsável pela divisão das bactérias em Gram + e Gram . 12 Protoplastos: bactérias que, mesmo perdendo a parede celular, mantêm suas funções; Esferoplastos: bactérias que, na perda, mantém um pouco da sua PC e, em momento oportuno, reconstituem-na. Parede celular Método de gram para coloração Hans Christian Gram (1884) desenvolveu método de coloração de bactérias que permitia sua separação em dois grupos distintos: Gram positivas (Gram +) coloração roxa; Gram negativas (Gram ) coloração vermelha. 13 Parede Celular Composição básica: peptideoglicano polímero exclusivamente encontrado no domínio Bacteria: N-acetilglicosamina (NAG), ácido N-acetilmurâmico (NAM), Tetrapeptídeo (L-alanina, ácido glutâmico, L-lisina e D-alanina ) Organização: esqueleto de NAG e NAM ligações entre os tetrapeptídeos de cadeias adjacentes enorme rigidez. 14 Parede celular - GRAM + Parede celular - GRAM Apenas cerca de 10% da parede corresponde ao peptideoglicano: uma ou duas camadas; restante: membrana externa. 16 Parede celular - GRAM Membrana Externa: acima do peptideoglicano, contém fosfolipídeos, lipoproteínas, proteínas e lipopolissacarídeos, corresponde a uma segunda bicamada lipídica semelhante à membrana plasmática 17 Bactérias álcool-ácido resistente (BAAR) Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae. possuem paredes celulares com alto teor de lipídeos (cerca de 60%), que quando tratadas pelo corante Fucsina fenicada (solúvel em lipídeos), coram-se de vermelho e persistem ao descoramento subsequente por uma solução de Álcool-ácido Bactérias - Formas Básicas Esféricas cocos Cilíndricas (forma de bastão) bacilos Espiraladas ou helicoidais: bastão curvo, em forma de vírgula vibrião; espiral longa, espessa e rígida espirilo; espiral longa, fina e flexível espiroqueta. 20 Bactérias - formas coloniais Colônias de cocos: diplococos: células se dividem em um único plano e permanecem acopladas, predominantemente aos pares. estreptococos: células se dividem em um único plano e permanecem acopladas, formando uma fileira. estafilococos: células se dividem em três planos, em um padrão irregular, formando cachos de cocos. sarcinas: células se dividem em três planos, em um padrão regular, formando um arranjo cúbico de cocos. 21 Bactérias - formas coloniais Colônias de bacilos: diplobacilos: ocorrem aos pares; estreptobacilos: arranjo em fileiras. 22 Reprodução Bipartição ou Cissiparidade: um indivíduo divide-se dando origem a outros dois geneticamente idênticos: duplicação do cromossomo: cada novo cromossomo fica associado a um mesossomo e entre eles verifica-se o crescimento da célula; citocinese. 23 Duplicação do DNA Separação das células Parede celular Membrana plasmática Molécula de DNA Bipartição ou Cissiparidade 24 Esporulação: formação de endósporos: formas de resistência dos gêneros Bacillus (aeróbia) e Clostridium (anaeróbia): permitem que a célula sobreviva em condições desfavoráveis; resistentes ao calor e ao ressecamento. capazes de permanecer em estado latente por longos períodos e de germinar dando início a nova célula vegetativa. Reprodução 25 Conjugação: passagem de material genético de uma bactéria doadora para uma receptora através de uma ponte citoplasmática formada por fímbrias sexuais (pilus F): reconhecimento e contato entre as células, transferência de DNA plasmidial. associada à presença de plasmídeos F: célula portadora de plasmídeo F F+, doadora, ou macho; célula desprovida de plasmídeo F F, receptora, ou fêmea. Genética Bacteriana 26 Genética Bacteriana Transdução: mediada por vírus (bacteriófagos ou fagos) pode ser generalizada (qualquer fragmento de DNA) ou especializada (determinados genes, passados por fagos temperados). 27 Transformação: incorporação de DNA na forma livre, geralmente decorrente da lise celular: ocorre quando uma bactéria incorpora moléculas de DNA existentes em seu meio e esta passa a ter novas características. Genética Bacteriana 28 Fisiologia Bacteriana Sobreviver e reproduzir Bactérias – construção do protoplasma, divisão celular etransporte de substâncias pela membrana citoplasmática. Condições ideais de nutrientes essenciais Física, inorgânica e orgânica Fisiologia Bacteriana Natureza Física e Inorgânica Temperatura Psicrófilas: desenvolvem-se em faixas de temperatura de 0 a 30 ◦C (ótimo 15 ◦C). Ex: Bacillus globisporus Mesófilas: crescem na faixa de temperatura de 5 até 45 ◦C (ótimo 37 ◦C). Ex: microbiota normal, patogênicas. Termófilas: crescem de 25 a 75 ◦C (ótimo 75 ◦C) pH Microbiota normal humana e as patogênicas – pH 4-8 (ótimo 7). CO2 Fonte de carbono – essencial para a síntese de componentes celulares. Natureza Física e Inorgânica Oxigênio - pode ser indispensável, letal ou inócuo para as bactérias, o que permite classificá-las em: Aeróbias estritas: exigem a presença de oxigênio, como as do gênero Acinetobacter. Microaerófilas: necessitam de baixos teores de oxigênio, como o Campylobacter jejuni. Facultativas: apresentam mecanismos que as capacitam a utilizar o oxigênio quando disponível, mas desenvolver-se também em sua ausência. Escherichia coli e vária bactérias entéricas tem esta característica. Anaeróbias estritas: não toleram o oxigênio. Ex.: Clostridium tetani, bactéria produtora de potente toxina que só se desenvolve em tecidos necrosados carentes de oxigênio. Natureza Física e Inorgânica Íons orgânicos Ferro (Fe+), Potássio (K+), Magnésio (Mg+), enxofre (S+), etc. Compostos orgânicos – Fontes de carbono Autotróficas: utilizam o CO2 atmosférico como única fonte de carbono ( fotossintéticas ou quimiossintéticas). Natureza orgânica Heterotróficas: requerem, além do CO2, outra forma orgânica de carbono para obtenção de energia. Fontes: carboidratos (glicose, frutose, sacarose) e aminoácidos. Natureza orgânica Metabolismo Bacteriano Metabolismo - todas as reações químicas dentro de um organismo vivo. Como as reações químicas tanto liberam quanto requerem energia, o metabolismo pode ser visto como um ato de balanceamento de energia. Catabolismo - Nas células vivas, as reações químicas reguladas por enzimas que liberam energia geralmente são aquelas envolvidas no, a quebra de compostos orgânicos complexos em compostos mais simples (reações catabólicas ou degradativas). São reações hidrolíticas (reações que utilizam água e nas quais ligações químicas são quebradas) e são exergônicas (produzem mais energia do que consomem). Metabolismo Bacteriano Anabolismo - As reações reguladas por enzimas que requerem energia estão envolvidas principalmente na construção de moléculas orgânicas complexas a partir de moléculas mais simples (reações anabólicas ou biossintéticas). Os processos anabólicos muitas vezes envolvem reações de síntese por desidratação (reações que liberam água) e são endergônicos (consomem mais energia do que produzem). Metabolismo Bacteriano Metabolismo Bacteriano Glicólise - “quebra de açúcar” A glicólise é um processo com baixa eficiência na obtenção de energia. Trata-se de uma estratégia extremamente “bem sucedida” e importante para a manutenção da vida. Respiração (ciclo de Krebs) e Fermentação Metabolismo Bacteriano Cocos Gram-positivos Staphylococcus aureus Isolado de mucosa nasofaringeana, pele, trato gastrointestinal e genital de animais de sangue quente. Doenças de pele incluindo acne, furúnculos, meningite, a síndrome do choque tóxico, sépsis. Streptococcus pneumoniae Habitam o trato respiratório de seres humanos Pneumonia, sinusite, bronquite, meningite, ... Cocos Gram-positivos Neisseria gonorrhoeae Gonorreia conjuntivite gonocócica - geno-oftálmico Gonorreia ano-rectal Faringite Cocos Gram-negativos Neisseria meningitidis Inicia o seu processo infeccioso através da colonização da nasofaringe Meningite cérebro-espinhal Cocos Gram-negativos Bacillus anthracis Carbúnculo Bacilos Gram-positivos Escherichia coli Bacilos Gram-negativos
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