Técnica de Coloração de Gram em Bactérias

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Relatório N°02
	Curso: Biomedicina
	Disciplina: Microbiologia
	Data:11/09/2017
	Professor: Ernane Gerre Bastos
	Nota: 
	Acadêmico: Fabricio Martins Da Silva 
	
	Método de coloração gram.
	
Objetivo
Realizar técnica de coloração de gram para diferenciar as espécies bacterianas em dois grupos: gram-positiva e gram-negativas os fatores que iram diferenciar são a coloração, a composição e propriedades químicas e físicas das paredes celulares. As bactérias que apresentarem coloração azul violeta serão classificas com gram-positivas e as gram-negativas serão vermelhar. As bactérias usadas foram da aula anterior que por fim serão monitorada nos microscópio para fazer sua diferenciação e classificadas quantos seu arranjo e forma. 
Materiais e Vidrarias
Lâminas para microscopia; óleo de imersão; lamínulas; microscópio; alça de platina; bico de Bunsen; tubo contendo solução com água esterilizada e corante: cristal de violeta.
Bactérias gram-positiva: lugol
Estafilococcus aureus - Safranina
Staphylococcus saprophyticus - Álcool 95%
Bactéria gram-negativa: gaze
Escherichia coli - Pisseta água destilada
Procedimento Operacional
Em uma lâmina, contendo esfregaço seco, cubra-o pingando gotas de violeta-de-metila e deixe agir por 15 segundos;
Adicione água ao esfregaço, em cima do violeta-de-metila, cobrindo toda a lâmina. Deixe agir por mais 45 segundos;
Após o tempo corrido, escorra o corante e lave o esfregaço em um filete de água corrente.  Cubra a lâmina com lugol ou Iodo de Gram e deixe por 60 segundos;
Escorra todo o lugol e lave em um filete de água corrente;
Aplique álcool etílico a 95%, ou acetona, para descorar a lâmina por 10 a 20 segundos;
Lave em um filete de água corrente;
Cubra toda a lâmina com safarina e deixe corar por aproximadamente 30 segundos;
Lave a lâmina em um filete de água;
Seque a lâmina com auxílio de um papel de filtro limpo ou deixe-a secar ao ar livre;
Aplique uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço e observe no microscópico com objetiva de imersão (100 X).
Resultados
Observando nas laminas foi encontrado coco e bacilos. A diferenciação de gram-positiva e gram-negativa ficou evidente após o processo coloração classificamos quantos suas forma e arranjos 
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Missão: “Proporcionar crescimento pessoal e desenvolvimento profissional, conforme os princípios da fé cristã”.