Aula 4.2

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3. Crescimento Bacteriano
3.1. Considerações gerais.
3.2. Métodos de medida.
3.3. Curva de crescimento
3.4. Crescimento contínuo.
  3. Crescimento Bacteriano
3.1. Considerações gerais.
3.2. Métodos de medida.
3.3. Curva de crescimento
3.4. Crescimento contínuo.
  3. Crescimento Bacteriano
3.1. Considerações gerais.
3.2. Métodos de medida.
3.3. Curva de crescimento
3.4. Crescimento contínuo.
MÉTODOS PARA QUANTIFICAR DIRETAMENTE
O CRESCIMENTO
 CONTAGEM EM PLACA
DILUIÇÃO SERIADA
MÉTODO DE ESPALHAMENTO EM PLACA E POUR PLATE
  3. Crescimento Bacteriano
3.1. Considerações gerais.
3.2. Métodos de medida.
3.3. Curva de crescimento
3.4. Crescimento contínuo.
  3. Crescimento Bacteriano
3.1...3.2...3.3. Curva de crescimento
  3. Crescimento Bacteriano
3.1...3.2...3.3. Curva de crescimento
  3. Crescimento Bacteriano
3.1. Considerações gerais.
3.2. Métodos de medida.
3.3. Curva de crescimento
3.4. Crescimento contínuo.
4. TESTES BIOQUÍMICOS E IDENTIFICAÇÃO BACTERIANA
Para verificarmos a produção de ácidos por fermentação, adiciona-se o indicador de pH vermelho de metila, que em meio ácido (pH  4,2) torna-se vermelho e em pH  4,2 adquire cor amarela.
A ação de triptofanases bacterianas sobre o aminoácido triptofano, presente em peptonas, gera um produto volátil denominado indol. A presença do indol pode ser detectada pela adição do reativo de Kovacs após o crescimento da cultura, resultando na formação de uma coloração vermelha na superfície do meio.
A assimilação do citrato indica a presença de citrato permease, que tranposta o citrato para o interior da célula. Do metabolismo do citrato é produzido piruvato e CO2. Este último, ao reagir com o sódio presente no meio, forma carbonato de sódio, elevando o pH. O meio Ágar Citrato de Simmons (pH 7,3 – verde) possui citrato de sódio como única fonte de carbono e azul de bromotimol como indicador de pH. Com o aumento do pH, o meio adquire a cor azul.
Durante a respiração aeróbica normal, as células produzem peróxido de hidrogênio, que é tóxico. A enzima catalase converte o peróxido de hidrogênio em água e oxigênio:
2H2O2 → 2H2O + O2
O teste VP (Voges-Proskauer) detecta a acetoína, produto da neutralização do ácido acético produzido pela fermentação da glicose.
A capacidade de produzir amilase pode ser detectada se o microrganismo for cultivado em meio contendo amido como única fonte de carbono e após o crescimento for adicionado lugol na placa. A presença do halo incolor indica a degradação do amido pela amilase secretada pelas células.
A produção de gás a partir da fermentação de açúcares pode ser avaliada pela presença de bolhas no interior de pequenos tubos (tubos de Durham) invertidos, dentro do meio de cultivo.
A capacidade de sintetizar gelatinase pode ser avaliada pela capacidade de crescimento e formação de halo de degradação da gelatina, formado ao redor das colônias.
4. TESTES BIOQUÍMICOS E IDENTIFICAÇÃO BACTERIANA