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CROMATOGRAFIA GASOSA E LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIA Componentes: Ariana Meneses Kênia Santana Mariana Almeida Professora: Janine França Sete Lagoas 2017 Definição Cromatografia é uma técnica na separação dos componentes de uma amostra (mistura), que são distribuídos entre uma fase estacionária e outra móvel. Tipos de Cromatografia Cromatografia em coluna Cromatografia Gasosa (CG) Rápida; Eficiente; Sensibilidade; Clareza no registro de dados; Pequenas amostras; Seguro e simples. Dificuldade no preparo da amostra; Preço elevado dos gases; Limitado a amostras voláteis. Vantagens Desvantagens Aplicações práticas Determinação de antioxidantes, nutrientes ou contaminantes em alimentos; Monitoria dos processos em uma indústria; Análise forense; Análise do sangue; Determinação de resíduos de pesticidas em produtos alimentares, águas ou esgotos. Fase Móvel Fase onde as substâncias que queremos isolar são “arrastadas” por um solvente fluido. O gás não interage com a amostra. No caso da cromatografia gasosa esta fase apresenta um gás inerte e puro. Os principais gases de arraste são: Hélio, Nitrogênio, Hidrogênio e Argônio. Fase estacionária Fase imóvel na qual a substância que está em análise (separada ou identificada) fixa-se na superfície de outro material. Tipos Cromatografia Gás-Sólido Sólidos (carvão grafitinizado, polímeros porosos, sílica). Cromatografia Gás-Líquido Líquido mantido imóvel em suporte inerte. Princípios de retenção: solubilidade e volatilidade. Cromatógrafo a Gás Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE ou HPCL) Fase móvel líquida; Fase estacionária sólida; Processo ocorre na fase líquida. Vantagens e Limitações da CLAE Menor tempo de análise; Alta resolução; Análises qualitativas e quantitativas; Automatização; FE utilizada várias vezes; Versatilidade; Detectibililidade. Alto custo do equipamento; Alto custo de manutenção; Alto custo de operação; Falta de detector universal; Necessidade de experiência no manuseio. Vantagens Limitações Aplicações Toxicologia; Cosméticos; Fármacos; Pesticidas; Alimentos; Proteínas; Aminoácidos; Corantes; Fase Móvel Deve ser um solvente que dissolva a amostra sem interação química entre ambos; Ter alto grau de pureza ou ser de fácil purificação; Compatibilidade com o detector empregado; Polaridade adequada. Solventes mais utilizados: água, metanol e acetonitrila. Fase Estacionária Utilizam-se sólidos semirrígidos cujas partículas apresentam diferentes diâmetros e suportam pressões até 350 bar. Tipos Cromatografia líquido-líquido (partição); Cromatografia líquido-sólido (Adsorção); Cromatografia de íons; Cromatografia por exclusão; Cromatografia por afinidade; Cromatografia Quiral. Cromatógrafo a Líquido Esquema de um HPCL: a)Reservatório da fase móvel; b)Desgaiseficador; c)Bomba; d)Injetor de amostra; e)Compartimento de colunas termostatizado; f)Coluna de separação; g)Detector; h)Processador de dados. Os principais componentes da cromatografia líquida são: a bomba, que movimenta a fase móvel e a amostra através da coluna; uma coluna, que contêm a fase estacionária, geralmente formada por partículas de sílica, porosas, esféricas e diâmetro em torno de 35 μm, e um detector que mostra os tempos de retenção das moléculas, sendo que o tempo de retenção varia de acordo com as interações da amostra com as fases estacionária e móvel. CLAE Comercial Referências Cromatografia: Fundamentos, Instrumentação e Aplicações. ADAIME, Martha. Disponível em: http://w3.ufsm.br/larp/media/introd_gc.pdf Cromatografia Gasosa. Disponível em: http://farmacognosiaws.no.comunidades.net/cromatografia-gasosa Métodos Cromatográficos. Disponível em: https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/255026/mod_resource/content/1/cromatografia.pdf Cromatografia: Um breve ensaio. DEGANI, Ana; CASS, Quezia; VIEIRA, Paulo. Disponível em: http://www.quimicasuprema.com/2013/12/o-que-e-cromatografia.html Cromatografia. OLIVEIRA, Ana Karine. Disponível em: https://pt.slideshare.net/KarineOliveiradaSilva/cromatografia-47843493 Cromatografia. CORREA, Weslei. Disponível em: https://pt.slideshare.net/wesleic/cromatografia-aula Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). SILVA, Julio. Disponível em: http://www.ufjf.br/baccan/files/2010/10/Aula_11-CL_08_07_14.pdf Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Disponível em: http://pfarma.com.br/farmaceutico-industrial/130-cromatografia-liquida-de-alta-eficiencia.html Cromatografia Líquida de Alta Resolução. Disponível em: http://www.ifrj.edu.br/webfm_send/546 Princípios e Aplicações da Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPCL). Disponível em: http://www.crq4.org.br/sms/files/file/hplc_araraquara_2012_site.pdf
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