Tecnicas de Parasitologico de Fezes

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Tecnicas de Exame Parasitológico de Fezes
  
 
Exame Parasitológico de Fezes (EPF)
Grande importância para o diagnóstico de parasitoses intestinais, causadas por helmintos e protozoários
EPF é um pedido para a investigação de parasitos nas fezes.
Grande desafio do diagnóstico na parasitologia é a baixa sensibilidade das técnicas quando não realizadas corretamente
Falta de conhecimento sobre a coleta da amostra, os fundamentos de conservação e da execução do método, levam a resultados falso-negativos.
Coleta da amostra
Deve ser colhida sem contato com o vaso sanitário
Utilizar recipientes limpos, isentos de água (pode conter microorganismos de vida livre), urina (destrói a mobilidade e os trofozoitas) ou outro material que possa contaminar  pinico
Jornais e outros tipos de papéis também devem ser evitados a fim de não contaminar
Transferir a amostra para o frasco coletor cedido pelo laboratório
Conservantes 
MIF (mercúrio, iodo e formol) – mais popular
Formol 10% - proibição do mercúrio
Formol tamponado
SAF (acetado de sódio, ácido acético glacial, formol e água destilada) – bom para trofozoítos em fezes diarreicas
Semanas 
A amostra pode ser conservada também em geladeira;
Embrulhar em papel e armazenar na geladeira (5-10ºC) ou isopor com gelo – até 48hs
Escolha do método
Não existe um método capaz de diagnosticar ao mesmo tempo todas as formas parasitárias.
Alguns métodos são mais gerais, permitindo o diagnóstico de vários parasitos intestinais, outros são métodos específicos, indicados para um parasito em especial.
Métodos 
Exame de fezes direto a fresco
Técnicas de concentração - Muitas vezes o número de formas parasitárias eliminadas com as fezes é pequeno, havendo necessidade de recorrer a processos de enriquecimento para concentrá-las.
Espontânea ou por centrifugação
Flutuação ou sedimentação
Técnicas para buscas de larvas
Exame parasitológico de fezes (EPF)
O EXAME MACROSCÓPICO permite a verificação da consistência das fezes, do odor, da presença de elementos anormais, como muco ou sangue, e de vermes adultos ou partes deles.
O EXAME MICROSCÓPICO permite a visualização dos ovos ou larvas de helmintos, cistos, trofozoítos ou oocistos de protozoários. Pode ser quantitativo ou qualitativo.
Exame parasitológico de fezes (EPF)
A grande maioria dos métodos é apenas QUALITATIVO = apenas indica a presença do parasita ou não
Existem métodos QUANTITATIVOS (Kato-Katz) = se faz a contagem dos ovos nas fezes, permitindo, assim, avaliar a intensidade do parasitismo. 
Técnicas Parasitológicas
 Hoffman, Pons e Janer- Lutz
Indicado: qualquer parasitose intestinal. Não é específico. Pesquisa ovos e larvas de helmintos e cistos de protozoários
Fundamentação: sedimentação espontânea dos parasitos após diluição e filtração, após 2 horas. Coloração com lugol.
Faust
Indicado: Pesquisa cistos de ameba e giardia
Fundamentação: flutuação com sulfato de Zn a 33%. Utiliza o sobrenadante para observação na lâmina, cora com lugol
Técnicas Parasitológicas
Baermann-Moraes (funil) ou Rugai (cálice)
Indicação : pesquisar larvas de Strongyloides stercoralis (único helminto que libera larvas nas fezes)
Fundamentação: Método específico. Hidro e termotropismo das larvas. Agua aquecida a 45 º C
Kato-Katz (quantitativo)
Indicação: pesquisa de S. mansoni
Fundamentação: quantificar o número de ovos
Fita gomada ou método de Graham ou swab anal
Indicação: pesquisa de Enterobius
Fundamentação: fita durex direto na região perianal.
Técnicas parasitológicas - Método de Faust
1. Diluir fezes em água e homogeneizar
2. Filtrar o material com auxílio de gaze e tamis
3. Transferir o material para um tubo cônico e centrifugar 
4. Descartar o sobrenadante, adicionar água e centrifugar (2X)
5. Descartar o sobrenadante.
6. Adicionar sulfato de zinco e centrifugar novamente
7. Coletar uma gota da película superficial da solução com auxílio de uma alça de platina.
7. Colocar uma gota de lugol, cobrir com lamínula e examinar a lâmina ao microscópio (objetiva 40x)
OBJETIVO: Diagnosticar cistos de protozoários e pesquisar ovos leves de helmintos 
Método de MIFC/RITCHIE
1. Homogeneizar as fezes conservadas em formol ou MIF
2. Filtrar o material com auxílio de gaze e tamis
3. Transferir o material para um tubo cônico
5. Centrifugar
4. Adicionar éter sulfúrico e agitar vigorosamente
6. Formação de 4 camadas:
Camada de éter
Tampão de detritos
Formol
Sedimento com parasitos
8. Examinar a lâmina ao microscópio (objetiva 40x)
7. Descartar sobrenadante e descolar a camada de detritos da parede do tubo com auxílio de um bastão de vidro com algodão.
8. Acrescentar solução salina ou lugol ao sedimento e preparar a lâmina
OBJETIVO: Pesquisa de formas evolutivas de parasitos intestinais
1. Transferir 1 ou 2 g de várias partes do bolo fecal para outro recipiente
2. Colocar solução de NaCl e homogeneizar
3. Colocar uma lâmina sobre a borda do recipiente, de modo que fique em contato com a solução.
Técnicas parasitológicas - Método de Willis
4. Examinar a lâmina ao microscópio (objetiva 40x)
OBJETIVO: Evidenciar ovos com densidade baixa, como de ancilostomídeos. Não recomendado para cistos de protozoários.
Técnicas parasitológicas - Método de Kato-Katz
1. Homogeneizar a amostra fecal
2. Colocar sobre papel absorvente a porção da amostra que será analisada.
3. Comprimir a parte superior com tela metáica, fazendo com que parte das fezes passe pela malha
4. Retirar as fezes que passaram pela tela e colocá-las no orifício do cartão regular colocado sobre a lâmina de vidro. 
5. Retirar o cartão, deixando as fezes sobre a lâmina. 
6. Cobrir as fezes com lamínula de papel celofane, inverter a lâmina e pressionar para uniformizar o material
7. Aguardar 1 ou 2 horas e examinar ao microscópio. 
OBJETIVO: Detectar e quantificar ovos de helmintos, principalmente Schistosoma mansoni, Ascaris lumbricoides e Trichuris trichiuria. 
Método de Graham ou Fita gomada/adesiva
OBJETIVO: Pesquisar ovos de Enterobius vermicularis e, eventualmente, de Taenia sp.
Método de Baermann-moraes
1. Colocar o funil encaixado ao tubo (mangueira) de látex, obliterado, em um suporte. 
2. Ajustar um tamis com gaze sobre o funil
3. Adicionar as fezes.
3. Adicionar água aquecida até tocar a base do tamis. 
5. Desobliterar o tubo de látex (mangueira), deixar escorrer 5 a 7 mL do líquido em vidro de relógio.
6. Analisar em microscópio
OBJETIVO: Diagnosticar larvas de Stongyloides stercoralis e outros nematódeos em fezes humanas, secreção brônquica e lavado gástrico. Isolar e detectar larvas no solo. 
Método de Rugai, Mattos e Brisola
3. Deixar em repouso por uma hora, coletar o sedimento do fundo do cálice com auxílio de canudo e analisar em microscópio
1. Homogeneizar a amostra fecal
2. Envolver o coletor em gaze, fazendo uma trouxa, e colocar com a abertura voltada para baixo em um cálice com água a 45ºC.
OBJETIVO: Diagnosticar larvas de nematódeo, principalmente Stongyloides stercoralis.
Método de Lutz, Hoffman, Pons e Janer
1. Diluir fezes em água e homogeneizar
2. Filtrar o material com auxílio de gaze e tamis
7. Colocar amostra, uma gota de lugol, cobrir com lamínula e examinar a lâmina ao microscópio (objetiva 40x)
3. Colocar água até completar ¾ do volume do recipiente. 
4. Tirar o tamis e deixar em repouso por 2 horas. Coletar o sedimento com auxílio de um canudo.
OBJETIVO: Pesquisar cistos de protozoários, ovos e larvas de helmintos..
Atividades
1. Descreva os objetivos de cada técnica parasitológica estudada , discorrendo sobre a capacidade de detecção de protozoários ou helmintos. 
2. Aponte quais técnicas parasitológicas utilizam os princípios abaixo:
Termotropismo:
Hidrotropismo:
Centrífugo-flutuação:
Sedimentação espontânea:
3. Qual o método utilizado em inquéritos
coproparasitológicos para detectar e quantificar ovos de helmintos?
4. A pesquisa de “OXIÚROS OU CASEIRA” ser realizada por qual técnica?
5. Qual a importância do exame macroscópico durante o parasitológico de fezes?