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Microbiologia e Imunologia Acadêmicos: Aline Adriani R. Souza RA: 5465880996 Maria Regina Romeiro RA: 4884785948 Mariana Miranda RA: 4884771500 Matheus Costa Souza RA: 5913410985 Otávio Casotti RA: 1887761662 Rodrigo Komukai RA: 5944512467 Sarah Palma RA: 5465302147 Vinicius Assis Lima RA: 5465948290 MEDICINA VETERINÁRIA Faculdade Anhanguera de Dourados Professor Walderson Zuza RIFI Reação de IMUNOFLUORESCÊNCIA INDIRETA A técnica de imunofluorescência indireta visa reconhecer auto anticorpos e/ou anticorpos contra agentes infecciosos em amostras de soro de pacientes suspeitos. Utilização de anticorpos para identificar a distribuição anatômica de um antígeno dentro de um tecido ou em compartimentos de uma célula. Os anticorpos são marcados com FLUOROCROMOS. O que é? O que é ? Os Fluorocromos: Moléculas reveladoras; Absorvem luz ultravioleta e emitem luz visível (fluorescente); Tornam a localização dos antígenos visível ao microscópio de fluorescência; Isotionato de fluoresceína e compostos de rodamina. É usado na Medicina Veterinária para diagnosticar? Neosporose Bovina; Erliquiose Canina; Leishmaniose Visceral Canina. É usado na Medicina Veterinária para diagnosticar? Mais usado na LVC; É feito em conjunto com o exame ELISA. Composição: - Lâmina com antígeno fixado (formol 2%); - Soro controle positivo; - Soro controle negativo; - Conjugado (anti-imunoglobulina G) marcado com isotiocianato de fluoresceína; - Solução salina tamponada com fosfato (PBS) 0,1M pH 7,2; - Solução de glicerina tamponada com carbonato-bicarbonato 0,05M; - Solução corante azul de Evans 2%. Como é feito? É realizada por antígenos fixados em uma lâmina, onde se aplica primeiro um anticorpo específico não fluorescente. E por último coloca-se um anticorpo fluorescente com especificidade marcada contra determinantes antigênicos do primeiro anticorpo utilizado para reagir com o antígeno. Interpretação do Resultado Reação positiva: os parasitas apresentarão fluorescência esverdeada distribuída por toda a sua superfície. Reação negativa: não haverá fluorescência e o campo aparecerá escuro. Fonte: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-736X2014000300010 Fonte: http://www.nano-macro.com/2015/09/a-magica-do-diagnostico-post-2.html Vantagens X Desvantagens da rIFI Vantagens: - Sensibilidade; - Especificidade; - Reprodutibilidade; - Simples; - Conjugado reutilizado; - Utilização de anticorpos específicos. Desvantagens - Microscópio de fluorescência; - Subjetividade; - Não-automação. Vantagens X Desvantagens da rIFI Referências bibliográficas Oliveira, T. M. F. S. Detecção de anticorpos anti-Leishmania chagasi em soros de cães de área não endêmica para a doença. Dissertação de Mestrado apresentada à FCAV-UNESP, Jaboticabal, SP, 2004. Imunologia celular & molecular - 6. ed. / 2008 - Acervo BU267557 ABBAS, Abul K.; LICHTMAN, Andrew H; PILLAI, Shiv. 6. ed. Rio de Janeiro (RJ): ELSEVIER, 2008. x,564p. MARTINS, Ricardo. Imunologia Clínica. Portal Educação e Sites Associados. Disponível em:<http://www.portalfarmacia.com.br/farmacia/cursos/cursos_detalhes.asp?id=75>. Obrigado!!! Dourados – MS 2017
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