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Alberts et al. (2006) Cap. 05: 171-187; Cap. 06: 197-210 Cap. 15: 502-504 Estrutura do núcleo e replicação UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA GERAL BIO 111 – BIOLOGIA CELULAR Ao final desta aula você deverá ser capaz de compreender: A organização nuclear e dos cromossomos Composição e função do nucléolo As principais características do processo de replicação do DNA Os elementos envolvidos com a forquilha de replicação e suas funções 1 2 3 1 2 3 4 Núcleo interfásico Esquema de um núcleo interfásico e estruturas associadas Núcleo Envelope nuclear Núcleo em uma célula de mamífero Envelope nuclear e complexo de poros Envelope nuclear Complexo de poros Transporte através dos poros nucleares Cromatina: • composição: DNA, proteínas histonas e proteínas não histonas • classificação: cromatina condensada: heterocromatina cromatina descondensada: eucromatina Organização dos cromossomos interfásicos Nucléolo Cromatina condensada Envelope nuclear Cromatina descondensada Linfócito de gato evidenciando o núcleo e suas estruturas Célula em divisão Célula em interfase Cromossomos eucarióticos Elementos essenciais do cromossomo Composição: DNA + proteínas Distribuição: grupos de diferentes cromossomos Genoma Humano: 22 cromossomos autossomais e 2 sexuais (X e Y) Intérfase (cromossomos com diferentes níveis de condensação) Cariótipo (cromossomos metafásicos, altamente condensandos) Cromossomos eucarióticos Função: portar os genes Formas: Cromossomo interfásico: forma relaxada Cromossomo mitótico: forma compacta Cromossomos eucarióticos nucleofilamento nucleossomos fibra de 30 nm alças de 300 nm compactação de 700 nm cromossomo mitótico Níveis de compactação da cromatina descompactação Nucleossomos vistos ao microscópio eletrônico Componentes do nucleossomo 1. Constituição química: DNA, RNA e proteínas 2. Função: biogênese de ribossomos 3. Tamanho nucléolo X síntese proteica Nucléolo Nucléolo: a fábrica de ribossomos Replicação do DNA Ciclo celular e replicação do DNA Composição e estrutura do DNA Desoxirribonucleotídeo 5` 4` 3` 2` 1` Adenosina Bidirecional Semiconservativa Sentido 5’ 3’ Semidescontínua 1 2 3 4 Características da replicação bidirecional origem unidirecional origem A B Ponto de crescimentoPonto de crescimento Ponto de crescimento A replicação é bidirecional Origem e forquilhas de replicação em procarioto Origem e forquilhas de replicação em eucarioto Bidirecional Semiconservativa Sentido 5’ 3’ Semidescontínua 1 2 3 4 Características da replicação Replicação semicoservativa Em cada dupla fita nova uma das fitas simples é original A cada replicação, cada uma das fitas é utilizada como molde para a síntese de uma fita complementar nova Bidirecional Semiconservativa Sentido 5’ 3’ Semidescontínua 1 2 3 4 Características da replicação O sentido da replicação é 5’ 3’ Bidirecional Semiconservativa Sentido 5’ 3’ Semidescontínua 1 2 3 4 Características da replicação A replicação é semidescontínua o o DNA molde DNA polimerase Extremidade 3’ OH livre RNA iniciador Nucleosídeos trifosfatados 1 2 3 4 5 Requisitos para a replicação do DNA Replicação do DNA Sentido 5’ 3’ 3’ a q q b b b b t t e e d y g c d' a Polimeriza fita contínua Polimeriza fita descontínua Centro catalítico Grampo Estrutura da DNA polimerase III de E. coli Polimerização Edição “polegar” “palma” fita molde Primer 5’ 5’ reparo durante a polimerização DNA Polimerases Sítios para síntese e edição A DNA polimerase apresenta atividade de correção de erros 3’ 5’ Proteínas que atuam na forquilha de replicação DNA polimerase III DNA polimerase I Helicase Fita molde Fita recém-sintetizada Fita recém-sintetizada Fita molde www.stanford.edu/.../causes/mutation/q5.html DNA girase Proteina SSB Proteínas que atuam na forquilha de replicação Remoção do primer, polimerização e ligação dos fragmentos de Okasaki A DNA pol “costura pra trás” durante a síntese da fita descontínua. Modelo de forquilha de replicação Modelo da Síntese Simultânea das duas fitas Helicase Primase SSB core pol III β (grampo deslizante Carregador do grampo Ψ χ a q q b b b b t t e e dyg c d' a Vídeo - replicação
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