Fisiologia e Metabolismo bacteriano- Resumo

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Fisiologia e Metabolismo
Fisiologia e Metabolismo
Introdução:
Algumas bactérias são fotossintéticas (clorofila ou bacterioclorofila), outras são litotróficas (compostos inorgânicos) ou organotróficas (doadores orgânicos de elétrons).
As bactérias de interesse médico têm metabolismo quimio-organotrófico, necessitando de uma fonte de carbono, com a qual vão sintetizar suas estruturas (ex. glicose) e uma fonte de energia (ex: respiração ou fermentação).
As bactérias podem fazer:
1) só fermentação;
2) só respiração (O2 como aceptor final de elétrons);
3) só respiração (outros aceptores finais de elétrons);
4) fermentação + respiração (O2) + respiração (outros aceptores);
Relação com o O2
-Aeróbias – exigem a presença de O2 livre.
-Microaerófilas – exigem pequenas quantidades de O2 e não o toleram em pressões normais atmosféricas.
-Anaeróbias estritas – não toleram a presença de O2 livre.
-Anaeróbias não-estritas – não utilizam O2 atmosférico, mas ele não é tóxico.
-Facultativas – podem crescer na presença ou ausência de O2.
Crescimento bacteriano
Os fatores de crescimento são compostos orgânicos fundamentais, que as bactérias não conseguem sintetizar sozinhas. Esse crescimento pode ser influenciado pela temperatura, pH, O2 e salinidade.
É possível distinguir, numa curva de crescimento em sistema fechado, as seguintes fases:
1-Fase de Lag: Adaptação da cultura (ligeiro ou nenhum crescimento).
2-Fase Log: Divisão das células e atividade metabólica máxima (grande crescimento).
3-Fase estacionária: Falta de nutrientes, acúmulo de metabólitos tóxicos e de fatores que sinalizam a presença de grande quantidade de indivíduos na cultura (redução do crescimento, platô).
4-Fase de declínio: Morte relacionada à natureza ou concentração dos fatores limitantes (há outras causas ainda desconhecidas).
Microrganismos necessitam para o seu crescimento de:
–Vias para obtenção de Energia;
–Nutrientes;
–Condições Ambientais Favoráveis
Os microrganismos necessitam de uma variedade de substâncias nutritivas capazes de promover o seu crescimento. Esses elementos são necessários para a síntese e para as funções normais dos componentes celulares. No ambiente, os microrganismos encontram os nutrientes nas formas de compostos orgânicos e/ou inorgânicos. Desta forma, podem desenvolver-se em meios inteiramente inorgânicos, outros em meios orgânicos ou mistos.
Os microrganismos necessitam de fontes de energia, fontes de carbono, fontes de nitrogênio, sais minerais, água, fatores de crescimento (vitaminas e outras substâncias). Estas substâncias são fornecidas a partir de fontes orgânicas e/ou inorgânicas. Como principio básico, o meio de cultura deve ser o mais próximo das condições reais onde habita o microrganismo, para que este cresça satisfatoriamente. Existem microrganismos que crescem em diversos meio de cultura, outros crescem apenas em meios especiais. Sendo assim, não existe um meio de cultura universal, de forma que cada microrganismo tem suas exigências nutricionais.
Isolamento em Ágar MacConkey Características de crescimento:
Ágar MacConkey MBiolog é um meio seletivo para enterobactérias destinado à detecção, isolamento, contagem de coliformes e patógenos intestinais da água, laticínios e materiais biológicos.
Princípio de ação
Organismos que fermentam lactose, produzem pH localizado, o qual, seguido pela absorção do vermelho neutro contido no meio, confere uma coloração vermelha ou rósea à colônia, enquanto que colônias não fermentadoras de lactose permanecem incolores ou transparentes.
Amostra
Amostras biológicas, águas de esgotos e alimentos, suspeitos de conterem enterobactérias. As amostras devem ser colhidas seguindo cuidados específicos de forma a se obter representatividade do processo infeccioso, assepsia na coleta da amostra e sem interações medicamentosas. Não é aconselhado o armazenamento da amostra. Em casos extremos, em que não se pode realizar o inóculo imediato, a amostra deve ser conservada sob refrigeração.
Procedimento
Inocular a amostra por estrias através de esgotamento da alça de platina. Obedecer os critérios internos do laboratório acerca das condições de assepsia e esterilidade do local de trabalho. Incubar a placa inoculada à 35 ± 2ºC por 24 horas. Após incubação, observar as placas.
Interpretação
Não havendo crescimento bacteriano, constata-se amostra isenta de bactérias. As bactérias fermentadoras de lactose produzem colônias vermelhas ou rosadas. Outros bastonetes Gram-negativos, como Pseudomonas sp. e Aeromonas sp. também apresentam crescimento, formando colônias cuja coloração varia de incolor até verde café. Bastonetes Gram-positivos têm seu crescimento inibido pelos sais biliares e pelo cristal violeta.
Aparência do meio
O meio se apresenta na cor rosa translúcido.
Apresentação
Meio de cultura pronto para uso em placa de petri.
Caldo VM/ VP (Vermelho de metila/ Vogel Proskauer)
Indicação
Meio utilizado para a diferenciação de enterobactérias baseado nas reações de Vermelho de Metila e Vogel Proskauer.