Relátorio Aula Prática - Carboidratos

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UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DA AMAZÔNIA-UFRA
INSTITUTO SOCIOAMBIENTAL E DE RECURSOS HÍDRICOS-ISARH
DISCIPLINA BIOQUÍMICA
PROFESSORA: JOANNE MORAES DE MELO SOUZA
ASSUNTO: CARACTERIZAÇÃO DE CARBOIDRATOS
1. INTRODUÇÃO:
Os carboidratos ou sacarídeos são a principal fonte de energia dos organismos vivos e abrange desde o açúcar comum (sacarose) até compostos muito complexos como, por exemplo, o amido. São compostos que contem átomos de C, H e O, um grupo aldeído ou cetona e grupos hidroxila. Eles podem ser classificados como monossacarídeos, oligossacarídeos e polissacarídeos. 
Os Monossacarídeos são os carboidratos mais simples e não hidrolisáveis. Os mais comuns são os açúcares de três (trioses), cinco (pentoses) e seis carbonos (hexoses). Os Oligossacarídeos são formados de 2 até 20 monossacarídeos unidos por ligação glicosídica que pode ser desfeita pela adição de água (reação de hidrólise) catalisada por um ácido ou enzima. Os mais comuns são os dissacarídeos constituídos de duas subunidades de monossacarídeos unidos por uma ligação glicosídica. A sacarose é um dissacarídeo presente na cana-de-açúcar formado por uma molécula de glicose e frutose. Os Polissacarídeos são longas cadeias (polímeros) de monossacarídeos (acima de 20) unidos por ligação glicosídica. Os polissacarídeos amido, glicogênio e celulose são os mais abundantes nos organismos vivos.
2. OBJETIVO GERAL:
 Ao final da prática, o aluno deverá ser capaz de executar testes para o reconhecimento de carboidratos.
3. MATERIAL:
3.1. Vidraria e outros utensílios:
Tubos de ensaio 
Pipetas graduadas
Pipetas Pasteur plástica
Béqueres
Lamparinas
Copos plásticos 
Bastão de vidro
Espátula
Proveta
3.2. Reagentes
Soluções de carboidratos a 1% (glicose, amido, sacarose e maltose).
Solução de Lugol (iodo a 5% em iodeto de potássio a 10%);
Reagente de Benedict (solução contendo citrato de sódio a 17,3%, carbonato de sódio anidro a 10% e sulfato cúprico pentaidratado a 1,73%).
Leite, mel, amido de milho, açúcar comum, adoçante.
4. TESTE DE BENEDICT
Os monossacarídeos podem ser oxidados por agente oxidantes suaves como íons férricos (Fe+3) e cúpricos (Cu+2). O grupo carbonila é oxidado a ácido carboxílico. Estes açúcares são chamados de açúcares redutores. Essa propriedade é útil na análise de monossacarídeos e dissacarídeos. O Reagente de Benedict é utilizado geralmente no lugar da solução de Fehling para detectar a presença de  açúcar redutor na urina e detectar uma possível diabete. A presença de açúcares redutores confere coloração castanha no Teste de Benedict devido à reação de redução do íon Cu+2.
Procedimento:
1. Para cada amostra desconhecida, pipete 1 mL da solução contendo carboidrato em um tubo de ensaio;
2. Prepare um tubo-controle (negativo) usando 1 mL de água;
3. Prepare um tubo-controle (positivo) usando 1 mL do açúcar redutor padrão (glicose);
4. Adicione a cada tubo 1,5 mL do reagente de Benedict;
5. Aqueça todos os tubos juntos em Banho Maria fervente por 5 min. Observe a formação do precipitado vermelho-tijolo;
6. Anote os resultados do teste na tabela ao final do roteiro. Anote (+) para açúcares redutores e (-) para não redutores, respectivamente.
Tabela 1. Resultados da identificação de açúcares redutores pelo Teste de Benedict:
	AMOSTRAS
	RESULTADOS
	IDENTIFICAÇÃO
	Controle negativo
	
	Água
	Controle Positivo
	
	Glicose
	1
	
	Maltose
	2
	
	Sacarose
	3
	
	Mel
	4
	
	Adoçante líquido
5. TESTE DE IODO PARA DETECÇÃO DE AMIDO
O amido é um polissacarídeo de reserva energética de plantas. Ele é formado por dois tipos de polímeros de glicose: amilose e amilopectina. A Amilose consiste de uma cadeia longa, não ramificada de resíduos de glicose (α 1→4) que interage com o iodo, formando um complexo de coloração azul escura violácea. 
Procedimento:
1. Para cada amostra desconhecida pipete 1,0 ml da solução de carboidrato em um tubo de ensaio;
2. Prepare um tubo controle (negativo) usando 1,0 ml de água;
3. Prepare um tubo controle (positivo) usando 1,0 ml do amido padrão;
4. Adicione a cada tubo uma gota de Lugol e observe o aparecimento da cor azul violácea;
5. Anote no roteiro os resultados positivos (+) ou negativos (-) para os tubos que contêm e que não contêm amido, respectivamente;
6. Tome apenas o tubo com a solução de amido/iodo aqueça-o e observe;
7. Resfrie o tubo observe novamente;
Tabela 2. Resultados do Teste de Iodo para detecção de amido:
	AMOSTRAS
	RESULTADOS
	IDENTIFICAÇÃO
	Controle negativo
	
	
	Controle Positivo
	
	
	1
	
	
	2
	
	
	3
	
	
6. DETECÇÃO DE AMIDO EM ALIMENTOS 
O amido é um polissacarídeo de reserva energética de plantas. Desta forma podemos detectar a presença do amido em diferentes alimentos de origem vegetal. 
Alguns produtores de leite costuma adulterar seus produtos adicionando água e para disfarçar a diluição o leite diluído é adulterado também com amido de milho. Assim, o consumidor pode identificar se o leite foi adulterado com amido adicionando algumas gotas de iodo ao produto. 
Procedimento:
1. Preparar um tubo controle (positivo) usando 1ml de Amido Padrão; 
2. Preparar um tubo controle (negativo) usando 1ml de água;
3. Colocar em uma placa de Petri ou béquer diferentes alimentos: batata crua, leite e leite com amido;
4. Pingar uma gota diretamente nas amostras e nos tubos-controles;
5. Comparar a coloração obtida nas amostras com a obtida nos controles;
Tabela 3. Resultados da detecção de amido em diferentes alimentos
	AMOSTRAS
	RESULTADOS
	IDENTIFICAÇÃO
	Controle negativo
	
	Água
	Controle Positivo
	
	Amido
	1
	
	Batata crua
	2
	
	Leite
	3
	
	Leite com amido
7. HIDRÓLISE ENZIMÁTICA DO AMIDO
Os oligossacarídeos e polissacarídeos são formados por unidades de monossacarídeos unidos por ligação O-glicosídica. Estas ligações podem ser hidrolisadas pela quebra da ligação O-glicosídica liberando os monossacarídeos que os compõem. 
Procedimento:
1. Coloque 1ml de solução de amido em dois copos plásticos;
2. Recolha um pouco de saliva em um dos copos;
3. Espere 30 minutos
4. Pingue uma gota de iodo em cada tubo
5. Observe e anote.
QUESTÕES DA PRÁTICA:
1. Em que princípio baseia-se o Teste de Benedict?
2. Qual a função do sulfato cúprico no Teste de Benedict?
3. Explique as diferenças nos resultados do Teste de Benedict para maltose e sacarose?
4. Explique como o amido interage com o iodo e como ocorrem as mudanças de coloração observadas na prática.
5. Após identificar os carboidratos de cada amostra no teste de iodo para detecção de amido, justifique os resultados obtidos.
6. Quais outros métodos podem ser utilizados para hidrolisar o amido?
OUTRAS QUESTÕES:
7. Qual é a classe, fonte/localização e função dos carboidratos listados a seguir:
	NOME
	CLASSE
	FONTE/LOCALIZAÇÃO
	FUNÇÃO
	Ribose
	
	
	
	Desoxirribose
	
	
	
	Lactose
	
	
	
	Sacarose
	
	
	
	Quitina
	
	
	
	Peptideoglicano
	
	
	
	Amido
	
	
	
	Celulose
	
	
	
	Glicogênio
	
	
	
8. Pesquise a composição nutricional dos seguintes produtos e compare os resultados:
	MATERIAL
	MAIZENA®
	FARINHA DE TRIGO
	AÇÚCAR
	MEL
	ARROZ
	Energia
	
	
	
	
	
	Carboidratos
	
	
	
	
	
	Proteínas
	
	
	
	
	
	Gorduras Totais
	
	
	
	
	
	Gorduras Saturadas
	
	
	
	
	
	Gorduras insaturadas
	
	
	
	
	
	Gorduras Trans
	
	
	
	
	
	Sódio
	
	
	
	
	
a) Qual produto possui maior quantidade de carboidratos?
b) Qual produto possui maior índice calórico?
9. Esta tabela mostra o teor de proteínas, carboidratos e lipídios em alguns alimentos, expresso em gramas por 100g de peso seco.
Com base nos dados da tabela acima, assinale a alternativa que contém a dieta mais adequada para um jogador de futebol antes de uma competição. Por quê?
a) Arroz com farinha de mandioca. 
b) Arroz com toucinho. 
c) Carne seca com farinhade mandioca. 
d) Carne seca com toucinho.
10. Explique a relação entre o teor de amido e amadurecimento de frutos.
11. Faça uma Revisão Bibliográfica em artigos científicos e livros sobre a celulose: definição, estrutura, posição do Brasil na produção mundial, Principais Estados e principais indústrias que produzem celulose, extração da celulose e fabricação de papel.
Profa. Joanne Moraes de Melo Souza – Bioquímica 2014.1