CLEARANCE DE UREIA

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CLEARANCE OU DEPURAÇÃO PLASMÁTICA DE UREIA
INTRODUÇÃO
A ureia é o principal composto proveniente do catabolismo de proteínas e de aminoácidos. A concentração de ureia no plasma é afetada pela dieta e pelo estado de hidratação em que o indivíduo se encontra, assim o clearance de ureia é considerado em geral um parâmetro clínico impreciso para avaliar a função renal específica, pois depende de vários outros fatores intervenientes. Os valores elevados de ureia no plasma podem ter como causas os fatores pré-renal, renal ou pós-renal:
Causa pré-renal: defeitos na excreção observada na descompensação cardíaca, choque hemorrágico, desidratação aguda, catabolismo proteico elevado (queimaduras, febre).
Causa renal: doença renal aguda ou crônica (glomerulonefrite, pielonefrite, necrose tubular) com diminuição da taxa de filtração glomerular, podendo ser observado níveis plasmáticos de ureia acima de 300 mg/dL.
Causa pós-renal: obstrução do trato urinário, por exemplo nas litíases renais e nos tumores por compressão da bexiga urinária.
Os valores baixos de ureia no plasma ocorrem apenas em poucas situações, como na insuficiência hepática aguda, na inanição e no último trimestre da gravidez.
PRINCÍPIO DO MÉTODO
A urease hidrolisa a ureia formando íons amônio e CO2. Essa reação ocorrendo na presença de salicilato e hipoclorito de sódio, a amônia proveniente de íons amônio, em pH alcalino, origina um composto esverdeado, cuja intensidade de cor é proporcional à concentração de ureia no plasma coletado.
REAGENTES – EQUIPAMENTOS – AMOSTRAS SANGUÍNEAS
(1) Padrão: ureia 70 mg/dL.
(3 mL)
(2) Enzima: urease = 10000 UI, tampão fosfato 100 mmol/L (pH = 6,8), estabilizantes e conservantes.
(25 mL)
(3) Tampão-estoque: tampão fosfato 100 mmol/L (pH = 7,5), nitroprussiato de sódio 5 mmol/L, salicilato de sódio 300 mmol/L, estabilizantes e conservantes.
(100 mL)
(4) Oxidante-estoque: hidróxido de sódio 1,5 mol/L e hipoclorito de sódio 10 mmol/L.
(50 mL)
Espectrofotômetro, banho-maria, pipetas, tubos de ensaio, balão volumétrico e cronômetro.
Soro, plasma, colhido com EDTA ou heparina e urina. Não utilizar anticoagulantes contendo amônia. Ureia excretada na urina é decomposta por ação bacteriana, então coletar urina em frasco contendo 2 mL de HCl a 50% (V/V). Centrifugar amostra e rapidamente proceder a dosagem.
PREPARO DO TAMPÃO DE TRABALHO
Adicionar todo o conteúdo do reagente (3), tampão estoque – 100 mL em 400 mL de água destilada e homogeneizar. Armazenar em frasco âmbar bem fechado. Estável por 12 meses em geladeira.
PREPARO DO REAGENTE DE TRABALHO
Adicionar uma parte do reagente (2), enzima – 25 mL em 20 partes do tampão e homogeneizar. Exemplo: adicionar 1 mL do reagente (2) em 20 mL do tampão e armazenar em frasco âmbar bem fechado. Estável por 20 dias em geladeira.
PREPARO DO OXIDANTE DE TRABALHO
Diluir o reagente (4), oxidante-estoque – 50 mL em 450 mL de água destilada e homogeneizar. Armazenar em frasco plástico bem fechado. Estável por 12 meses em geladeira.
MÉTODO
Dosagem de ureia no plasma ou soro
Rotular 3 tubos de ensaio: B (Branco), A (Amostra) e P (Padrão) e proceder segundo a tabela:
	
	Tubo B
	Tubo P
	Tubo A
	Amostra
	---------
	---------
	 10 µL
	Reagente (1)
	---------
	 10 µL
	----------
	Reagente de trabalho 
	 1 mL
	 1 mL
	 1 mL
 
Homogeneizar e transferir os tubos para banho-maria 37 0C por 5 minutos.
	Oxidante de trabalho
	1 mL
	1 mL
	1 mL
 
Homogeneizar e transferir os tubos para banho-maria 37 0C por 5 minutos.
O tubo B será zerado em 600 nm. Ler as absorbâncias dos tubos A e P. Cor é estável por 1 hora.
Dosagem de ureia na urina
Idem a técnica acima, porém a amostra de urina será diluída de 1:50 (100 µL de urina + 4,9 mL de água destilada). Multiplicar o resultado obtido por 50.
CÁLCULOS
Soro ou plasma
O fator de calibração F segue a lei de Lambert-Beer: F = 70 mg/dL / absorbância de P 
Ureia (mg/dL) = (absorbância de A) x F
Urina
Ureia (g/24h) = (absorbância de A) x F x 50 x volume (L) / 100
Resultado para soro ou plasma será expresso em mg/dL e para urina em g/24 h.
VALORES DE REFERÊNCIA – POPULAÇÃO DE MULHERES E HOMENS SADIOS
SORO OU PLASMA
	1 dia a 12 meses
	2 a 34 mg/dL
	1 a 13 anos
	8 a 36 mg/dL
	Adultos
	15 a 40 mg/dL
URINA
	Todas as idades
	26 a 43 g/24 h
Caso deseje converter os valores de mg/dL em mmol/L, multiplicar por 0,166.