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A Arqu itetura Celular Profa. Dra. Thérèse Rachell Theodoro NÍVEIS DE ORGANIZAÇÃO DOS SERES VIVOS Diferenças entre Procariotos e Eucariotos Célula Procariótica Células Eucarióticas Célula Animal Célula Vegetal Diferenças entre Procariotos e Eucariotos O Citoplasma O Núcleo Os Componentes Celulares A Membrana Plasmática Componentes Carboidratos A Membrana Plasmática Funções Define os limites da célula; Separa o conteúdo intracelular do meio extracelular; Permeabilidade Seletiva; Flexibilidade; Proteínas que são capazes de transmitir sinais da superfície através de receptores moleculares Os principais componentes estruturais das membranas são: Lipídeos - fosfolipídios, totalizando 25% a 40% Proteínas - 60% a 75% são os compostos que participam diretamente na formação de membranas celulares. Glicídios e outras moléculas permanentes ou transitórias. Antígenos, Enzimas moléculas de proteínas apresentam certa liberdade de movimentação lateral. O mosaico da membrana é fluido por muitas interações entre os componentes não-covalente, deixando lipídeos individuais e moléculas proteicas livres para se moverem lateralmente no plano da membrana, possibilitando a permeabilidade seletiva. GLICOCÁLIX *açúcares ligados aos lipídeos e proteínas da membrana *GLICOLIPÍDEOS *GLICOPROTEÍNAS (oligossacarídeos+proteínas) * PROTEOGLICANAS (polissacarídeos+proteínas) *Funções: proteção da superfície celular contra lesões mecânicas e químicas, adsorção de água: superfície celular lisa, e reconhecimento célula-célula. barreira contra agentes físicos e químicos e atua no reconhecimento das células Colesterol (LIPÍDEO DE MEMBRANA CELULAR): *preenche os espaços entre moléculas de fosfolipídeos *enrijece a bicamada (limita a motilidade dos fosfolipídeos) e a torna menos fluida e permeável; TRANSPORTE ATRAVÉS DE MEMBRANA Transporte molecular: - Passagem do solvente: difusão osmótica (transporte passivo) – [-] → [+] - Passagem do soluto: Transportes ativo e passivo: TRANSPORTE ATRAVÉS DE MEMBRANA TRANSPORTE PASSIVO: é impulsionado por gradientes iônicos, não havendo gasto de energia a partir da hidrólise de ATP. Podem ocorrer: 1. Através da bicamada: membrana semi-permeável [+] → [-] TRANSPORTE ATRAVÉS DE MEMBRANA TRANSPORTE PASSIVO: é impulsionado por gradientes iônicos, não havendo gasto de energia a partir da hidrólise de ATP. Podem ocorrer: 2. Por difusão facilitada: proteínas transportadoras [+] → [-] TRANSPORTE ATRAVÉS DE MEMBRANA TRANSPORTE PASSIVO 3. Mediada por canais iônicos ou protéicos: o interior desses canais é polar, o que permite a passagem de íons, e raramente encontram-se sempre abertos, pois geralmente se abrem mediante a um estímulo químico [+] → [-] Transporte Ativo: Há hidrólise de ATP para produção de energia. BOMBAS IÔNICAS: Mecanismos que transportam íons de: -Na e K ATPase: mantém o potencial negativo no interior celular. -H : mantém o pH em mitocôndrias e lisossomos. -H e K ATPase: membranas parietais do estômago. Transporte Ativo – Bomba de NA+ e K+: íons como o sódio (Na+) e o potássio (K+), devem atravessar a membrana contra um gradiente de concentração. Sempre haverá oncentrações diferentes, dentro e fora da célula, para o sódio e o potássio. Transmissão do impulso nervoso. A Membrana Plasmática O Núcleo Os Componentes Celulares O Citoplasma organizar as milhares de enzimas existentes na célula A Compartimentalização Celular isolar as reações metabólicas fornecer um ambiente favorável para que ocorra a reação Serve para: Partículas Suspensas Podem ser: O sistema de endomembanas As organelas envolvidas por membranas O citoesqueleto O Citoplasma Componentes Citosol É uma solução aquosa altamente concentrada; Possui composição complexa (proteínas, enzimas, aminoácidos, RNAs, metabólitos, íons inorgânicos, etc.); Possui consistência de gel. O Sistema de Endomembranas O Citoplasma O Retículo Endoplasmático O Sistema de Endomembranas Sistema de canais citoplasmáticos circundados por membrana simples (ribossomos aderidos à superfície externa). Síntese de proteínas secretadas pela célula, inseridas nas membranas plasmática e nuclear, e de enzimas digestivas que serão sequestradas pelos lisossomos (RER). Síntese de lipídios, metabolismo do glicogênio, realiza metabolismo de fármacos impedindo intoxicações (REL). Reservatório de cálcio intracelular. O Sistema de Endomembranas O Citoplasma O Retículo Endoplasmático O Retículo Endoplasmático Rugoso O Sistema de Endomembranas O Complexo de Golgi O Sistema de Endomembranas Sistema citoplasmático de membranas simples formado por sáculos achatados. Modifica e transforma as proteínas e lipídeos sintetizados no RE adicionando sulfato, carboidratos (glicoproteínas ou glicolipídios) ou lipídios (lipoproteínas). Sistema central de distribuição na célula – centro de armazenamento, transformação, empacotamento e remessa de substâncias. O Sistema de Endomembranas O Citoplasma O Complexo de Golgi O sistema de endomembanas O citoesqueleto O Citoplasma As organelas envolvidas por membranas As Partículas Suspensas Os lisossomos Os peroxissomos As mitocôndrias As Organelas Envolvidas por Membrana O Citoplasma Os Lisossomos As Organelas Envolvidas por Membrana São sítios de reciclagem: quebram moléculas complexas trazidas pela endocitose celular e fragmentos de células vizinhas fagocitadas, além de degradarem organelas defeituosas da própria célula. Organela envolvida por membrana única. Contém enzimas capazes de realizar a digestão de proteínas, polissacarídios, ácidos nucléicos e lipídios. As Organelas Envolvidas por Membrana O Citoplasma Os Lisossomos Os lisossomos em ação As Organelas Envolvidas por Membrana Realizam reações oxidativas durante a degradação de aminoácidos e lipídios, protegendo as células do ataque de moléculas altamente reativas, como o peróxido de hidrogênio e outros radicais livres, produzidas durante estas reações. As Organelas Envolvidas por Membrana O Citoplasma Os Peroxissomos As Organelas Envolvidas por Membrana O Citoplasma As Mitocôndrias Oxidam (perda de e-) nutrientes orgânicos através do consumo de O2. Sintetizam ATP. O sistema de endomembanas O Citoplasma As organelas envolvidas por membranas As Partículas Suspensas O citoesqueleto Funções: - Estabilização da forma celular. - Estruturação e organização do citoplasma. - Locomoção. - Transporte intracelular. O Citoesqueleto O Citoplasma É uma complexa rede citoplasmática de túbulos e filamentos. O citoesqueleto organiza o citoplasma O Citoplasma O Citoesqueleto Tipos de moléculas citoesqueléticas O Citoesqueleto Microtúbulos Constituição dos centríolos, fuso mitótico, raios astrais de células em divisão, elementos longitudinais dos axônios, cílios e flagelos. Transporte de macromoléculas e organelas na célula. Morfogênese. Microfilamentos Suporte mecânico de estruturas celulares. Movimentação intracitoplasmática de organelas ou vesículas. Fagocitose. Locomoção celular (formação de pseudópodes). Filamentos Intermediários Não apresentam polaridade. Estabilidade mecânica das células e tecidos (organização multicelular tridimensional). Estabilidade estrutural (posicionamento do núcleo). A Membrana Plasmática O Citoplasma Os Componentes Celulares O Núcleo O Núcleo Os Componentes Celulares Funções: Síntese de DNA Síntese de RNA O Núcleo Contém o Genoma O Núcleo Os Poros Nucleares O Núcleo Elementos, Moléculas e Compostos 4 Elementos (95%): O (65%), C (18%), H (10%) e N (3%); Outros (5%): Ca, K, Na, P, Mg e S; Moléculas. Ex: molécula de H2O; Compostos orgânicos. Ex: proteínas, carboidratos, lipídeos e ác. nucleicos Compostos inorgânicos. Ex: H2O e eletrólitos Água Composto mais abundante; Solução aquosa; Solvente universal; Temperatura: absorve e libera lentamente; Transporte de solutos intra e intercelular; Desidratação Perda de líquidos ultrapassa a entrada; ⇓ dos vols líquidos intra e extracelular; Vômito, diarréia ou sudorese excessiva: Problemas médicos sérios; Prejuízo da função celular; Crianças + vulneráveis: Volume líquido pequeno; Morte por desidratação em poucas horas; Eletrólitos Compostos inorgânicos ; Os mais importantes são: Potássio, Magnésio, Fosfato, Sulfato e Bicarbonato; Participam das reações de controle celular; Decompõem-se em íons na água; Condução elétrica; Classificados de acordo com o íon; Ácidos (H+), bases(OH-) e sais; Desequilíbrio eletrolítico → Cãimbras, osteoporose, parada cardíaca; entre outros. Proteínas Compostos orgânicos nitrogenados; Formados por polímeros de aa unidos por ligações peptídicas, em que um dos carbonos tem como substituintes um grupo carboxila (COOH), um grupo amina (NH2) e um átomo de hidrogênio (H); Estruturais e funcionais (metabolismo celular); 20 tipos diferentes; 8-9 não essenciais (sintetiza: Gly, Ala, Arg, etc) e 11 essenciais (não sintetiza: Phe, Iso, Leu, etc); Compostos orgânicos + abundantes; 2 Construídas por 20 aminoácidos (9 essenciais/exógenos e 11 não essenciais/endógenos); Ligados covalentemente (compartilhamento de elétrons) em sequências lineares caracterizadas por uma ligação peptídica. Proteínas Liberando uma molécula de Entrada de uma molécula H2O → hidrólise (a molécula de água se quebra e se distribui entre os aa) Grupos Gerais das Proteínas PROTEÍNAS Estruturais Motoras Hormonais Enzimas Transporte Anticorpos Nucleoproteínas Reserva de Membrana Glicoproteínas, lipoproteínas Transmissão das características hereditárias Ferritina Hemoglobina Defesa de infecções (Imunoglobulinas) Catalisadores de reações (-ase) Insulina Atividades Musculares Componentes da pele e tecidos (melanina) estrutural transporte hormonal defesa Transmissão de informação Carboidratos Fonte de energia prontamente utilizável; Polihidroxialdeídos (H-C=O) ou polihidroxicetonas (-C=O) e seus derivados; Nutrição celular (supri as necessidades de energia da célula) Fórmula Geral: [CH2O]n, 3<n<6 Monossacarídeos: molécula orgânica constituída de pelo menos 3 átomos de carbono, sendo um deles uma carbonila (aldeído ou cetona), e o restante contendo substituições da hidroxila (OH); Excesso = Glicogênio e gordura; Jejum = hipoglicemia; Lipídeos Cadeias longas de CH, CH2, CH3, ...totalmente hidrofóbicas; ou pouco solúvel em água; Solúvel em solventes orgânicos Energia e isolante térmico (acilgliceróis = ácidos graxos); Impermeabilizante (ceras); Anti-oxidantes (vitaminas A e E); Digestão (sais biliares); Usados na construção da membrana celular (fosfolipídeos e glicolipídeos); Regulação do transporte Hormônios: EX: protaglandina, originada de um dobramento do ácido aracdônico (ácido graxo – todos insolúveis em água); - esteróides; 3 (H2O) + hidrólise Fosfolipídeos (apresentam um lado polar, o qual apresenta afinidade com a água, e outro apolar, sem afinidade com a água; por isso chamado de estrutura anfipática); Lipídeos São polímeros de nucleotídeos; Cada nucleotídeo é constituído por uma molécula de ácido fosfórico, uma pentose e uma base púrica (adenina e guanina) ou pirimídica (timina, citosina e uracila); A polimerização dos nucleotídeos cria uma molécula capaz de transmitir uma informação química que controla os mecanismos metabólicos da célula Dois tipos de ácidos nucleicos: DNA e RNA Ácidos Nucleicos Subst. Local na célula Função Água Toda Dissolução e Temperatura Eletrólitos Toda Osmolaridade e pH Proteínas (acelerador de reação química) Membrana, citoesqueleto, ribossomos e enzimas Estrutura, contratilidade, catálise e tamponamento. Lipídeos Membrana, Complexo de Golgi, inclusões energia, forma, proteção, isolamento Carboidratos Inclusões Combustível preferencial DNA Núcleo, cromossomos e genes Armazenamento da informação genética e controle da atividade celular RNA Núcleo e citoplasma Transmissão da informação genética e transporte de aa Vitaminas Citoplasma e núcleo Enzimática Minerais Citoplasma e núcleo Equilíbrio osmótico Sinais extracelulares Receptores protéicos; Resposta a moléculas sinalizadoras secretadas por outras células; Regulação da célula; A célula animal depende de múltiplos sinais extracelulares; Ausência dos estímulos apropriados causa o suicídio celular; Os tecidos não são constituídos apenas por células. Uma parte substancial do seu volume é de espaço extracelular, que por sua vez, é preenchido por uma rede de macromoléculas que constituem a MATRIZ EXTRACELULAR Matriz Extracelular Apoptose – cascata de eventos Necrose celular: resposta inflamatória; Apoptose: morte limpa; Maquinaria de proteases; Condensação e encolhimento; Destruição do citoesqueleto; Envelope nuclear degradado; DNA nuclear fragmentado; Alteração da superfície celular causando fagocitose pelas cels vizinhas e pelos macrófagos; Apoptose Mutação genética e desenvolvimento tumoral TÉCNICAS DE COLORAÇÃO Métodos que permitem identificar os componentes celulares O microscópio óptico é um instrumento usado para ampliar, com uma série de lentes, estruturas pequenas impossíveis de visualizar a olho nu. Esta visualização pode ser realizada com a ajuda de corantes (Feulgen-DNA, Hematoxilina-linfócitos, Schiff-polissacarídeos) Método citoquímico baseado no uso de anticorpos, através de uma reação direta, na qual o anticorpo é acoplado a um corante fluorescente. Permite observar microorganismos capazes de fixar substâncias fluorescentes (fluorocromos). A luz UV, ao incidir nessas partículas, provoca a emissão de luz visível e observa-se os microorganismos a brilhar em fundo escuro. Forma-se a imagem pela passagem de elétrons através das estruturas celulares (cortes ultrafinos). Apresenta um potencial de aumento muito superior ao óptico!!! 20-50 nm de espessura. Forma-se a imagem pela passagem de elétrons refletidos a partir das estruturas (superfície da célula e dos organismos – organelas) H2O2 é citotóxico (recuperação antigênica) Peroxidase quebra a molécula do peróxido de hidrogênio em H2O + O2 Ligação específica do anticorpo detectável ao antígeno Mostra a localização citológica do antígeno Resultados Imunocitoquímicos (Expressão da heparanase na FMSP de mulher saudável e pacientes portadoras de câncer de mama) Kit: Peroxidase. Mulher Saudável Mulher Saudável + MCF-7 Células MCF-7 OBRIGADA!!!
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