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O que é hibridoma? Como o hibridoma é produzido? Hibridoma são linhagens celulares desenvolvidas artificialmente para produzir um determinado anticorpo em grande quantidade. Para produzir um hibridoma é necessária a (1) imunização do ratinho, (2) isolamento de linfócitos B a partir das células do baço, (3) cultura de células de mieloma, (4) fusão de células do mieloma com linfócitos B, (5) separação das linhagens celulares, (6) identificação e escolha das linhagens. Com relação á figura abaixo, podemos observar a interação antígeno-anticorpo. Explique que tipo de anticorpo são as figuras e qual a diferença dos dois tipos de anticorpos. FIGURA A - Anticorpo monoclonal – anticorpo específico pra um epitopo e produzido por um hibridoma de células B (linhagem celular resultante da fusão de uma única célula B normal com uma linhagem imortalizada de tumor de células B. FIGURA B - Anticorpo policlonal – possuem vários clones, ou seja, se originam de diferentes linfócitos B, o que significa que reagem com vários epitopos do antígeno. Polimorfismo em genes envolvidos diretamente ou indiretamente no metabolismo ou na cascata de efeitos de uma droga específica podem afetar a resposta de cada individuo a esta droga. Suponha que, em um estudo de duas novas drogas, as mesmas foram administradas, em uma dosagem padrão, a um número substancial de indivíduos (homens e mulheres). Após a administração da droga, a presença de possíveis eventos adversos foi avaliada. Como resultado, observou-se que grupo de homens apresentava eventos adversos de grau 3. Entretanto, um outro grupo de mulheres exibiu eventos adversos grau 1, mas ainda assim presentes. Por ultimo, observou-se um terceiro grupo de mulheres no qual nenhum evento adverso foi observado. Levando em consideração apenas as bases genéticas da resposta individual, sugira a melhor e mais simples hipótese que explicaria esses resultados. Polimorfismos genéticos em enzimas metabolizadoras, transportadores ou receptores contribuem para as variações nas respostas a medicamentos. A hipótese seria que cada indivíduo responde de forma diferente aos estímulos gerados pelo fármaco. Nas pessoas em que o fármaco provou efeitos adversos, o metabolismo da droga pode ser considerado de fase 1, onde a ativação da droga ocorre de forma mais rápida por conta de ser hidrossolúvel; e nos grupos que não apresentaram efeitos adversos, pode ser considerado metabolismo de fase 2, onde a excreção ocorre de forma rápida e não ocorre ativação da droga. Com relação á classificação das células tronco, defina: CÉLULAS TOTIPOTENTES – células capazes de diferenciarem-se em todos os 216 tecidos do corpo, placenta e anexos embrionários. CÉLULAS PLURIPOTENTES – células capazes de diferenciar-se em quase todos os tecidos humanos, exceto: placenta e anexos embrionários. CÉLULAS OLIGOPOTENTES – células que se diferenciam em poucos tecidos. CÉLULAS UNIPOTENTES – células que se diferenciam em um único tecido. Com relação ás células tronco, coloque V ou F nas alternativas a seguir: ( V ) As células tronco adultas tem capacidade de diferenciação limitada e grande parte dos tecidos humanos não podem ser obtidas a partir delas; ( F ) As células tronco embrionárias só podem ser encontradas nos embriões humanos e cordão umbilical e são classificadas como pluripotentes, dado seu alto poder de diferenciação; ( V ) Podemos encontrar células tronco adultas em medula óssea, fígado, popa dentária, cordão umbilical, placenta e tecido adiposo, dentre outros; ( F ) As células tronco do cordão umbilical são mais imunorreativas que as células da medula óssea, aumentando a ocorrência de rejeição; ( V ) Células tronco são células indiferenciadas que têm a capacidade de se multiplicar e se diferenciar em células especializadas. Em relação á Biotecnologia aplicada á área humana, podemos citar a obtenção de vacinas produzidas por engenharia genética, a terapia gênica, e a obtenção de produtos farmacêuticos recombinantes e anticorpos modificados entre outros. Identifique se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas em relação ás vacinas e aos produtos farmacêuticos produzidos por engenharia genética: ( F ) A grade desvantagem desta tecnologia é a utilização de vacinas vivas usando vírus ou bactérias atenuadas; ( V ) Uma vantagem de vacinas utilizando vírus ou bactérias inativadas é qe estas vacinas são seguras, podendo até ser administradas em pacientes com HIV; ( V ) Uma possibilidade gerada por esta tecnologia é a obtenção de vacinas formadas por plasmídeos contendo gene que codificam antígenos patogênicos ou tumorais; ( V ) Uma das vantagens da produção de produtos farmacêuticos em micro-organismos é a produção em grande escala e a facilidade de purificação do produto; ( V ) Uma desvantagem na produção de fármacos em sistemas eucariontes é o alto custo de purificação do fármaco. O vírus da dengue é capaz de atuar sobre a resposta de RNAi (“Interferência por RNA”) da células, estando esta ação relacionada ao sucesso do seu ciclo celular. Sobre a resposta RNai, assinale a alternativa correta. Uma resposta celular natural á presença de RNA dupla-fita no interior da célula e leva á degradação de RNAs específicos; Uma resposta celular natural á presença de RNA dupla-fita no interior da célula e leva á degradação de genes específicos; Uma ferramenta em que DNA dupla-fita especifica podem ser introduzidos no interior da célula de forma a desligar a expressão do gene em questão; Apenas uma ferramenta em que RNA dupla-fita especifica podem ser introduzidos no interior da célula para degradar genes específicos; Uma resposta na qual os siRNAs levam á degradação do complexo RISC O óvulo em que o núcleo foi retirado de uma ovelha, da raça “Scottish Blackface” (SB), recebeu o núcleo de uma célula mamaria de outra ovelha, da raça “Finn Dorset” (FD). O embrião resultante dessa união foi implantado na ovelha SB, conforme mostrado na figura: O embrião implantado na ovelha SB resultou no clone Dolly. Com relação á origem dos genes nucleares e mitocondriais da ovelha Dolly, assinale a opção correta: Os genes nucleares provieram da ovelha FD e da SB; Os genes mitocondriais provieram da ovelha FD e da SB Os genes mitocondriais e os nucleares provieram da ovelha FD; Os genes mitocondriais e os nucleares provieram da ovelha SB; Os genes nucleares provieram da ovelha FD e os mitocondriais da SB; O milho transgênico é produzido a partir da manipulação do milho original, com a transferência, para este, de um gene de interesse retirado de outro organismo de espécie diferente. A característica de interesse será manifestada em decorrência Da duplicação do DNA a partir da duplicação do gene transferido; Da transcrição do RNA transportador a partir do gene transferido; Da expressão de proteínas sintetizadas a partir do DNA do milho hibridizado Da síntese de carboidratos a partir da ativação do DNA do milho original Da tradução do RNA mensageiro sintetizado a partir do DNA recombinante. Entre as diferentes biotecnologias modernas encontramos a produção do transgênicos. Sobre o tema, assinale com V ou F: ( V ) Pela técnica do DNA recombinante novos organismos chamados transgênicos, ou organismos geneticamente modificados são produzidos pela inserção de genes exógenos ( V ) O objetivo da produção dos transgênicos é desenvolver novos tipos de seres vivos, mais próximos da perfeição e isentos de doenças genéticas previsíveis ( V ) Um transgênico da Escherichia coli tem grande importância terapêutica, sendo usado atualmente na produção do hormônio de crescimento humano, de insulina e do fator VIII recombinante, no tratamento de hemofílicos ( F ) Dolly foi uma ovelha que, além de ser um clone, era um animal geneticamente modificado, obtido pela inserção de um gene humano em seu DNA. Esse gene codifica a produção do fato IX, uma proteína da coagulação sanguínea, importante no tratamento de hemofílicos. A partir do sangue da ovelha Dolly, esse fator podia ser obtido em grande quantidade. (V ) Uma das técnicas para a obtenção de organismo transgênicos é o uso de vetores, que são vírus e bactérias nos quais se insere o DNA, para ser incorporado em um outro organismo.
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