ENZIMAS DE RESTRIÇÃO

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ENZIMAS DE RESTRIÇÃO 
 
Enzimas de restrição são 
encontradas em bactérias (e outros 
procariontes). Elas reconhecem e se ligam 
a sequências específicas de DNA, 
chamadas sítios de restrição. Cada 
enzima de restrição reconhece apenas um 
ou alguns sítios de restrição. Quando ela 
encontra suas sequências alvo, a enzima 
de restrição fará um corte na dupla hélice 
da molécula de DNA. Normalmente, o corte 
é no sítio de restrição ou próximo a ele e 
ocorre em um padrão arrumado, previsível. 
Como um exemplo de como uma 
enzima de restrição reconhece e corta uma 
sequência de DNA, vamos 
considerar Eco RI, uma enzima de restrição comum usada em laboratórios. 
Quando EcoRI reconhece e corta este sítio, ela sempre faz isso em 
uma padrão muito específico que produz extremidades com DNA fita simples. 
Se outro pedaço de DNA tiver terminação correspondente (por 
exemplo, porque ele também foi cortado pela EcoRI), as terminações podem se 
juntar por pareamento de bases complementares. Por esta razão, diz-se que 
enzimas que deixam terminações de fita única produzem extremidades 
pegajosas . Extremidades pegajosas são úteis em clonagem porque seguram 
dois pedaços de DNA que podem ser ligados pela DNA ligase. 
Nem todas as enzimas de restrição produzem extremidades adesivas. 
Algumas são "cortadoras bruscas" que cortam no meio de uma sequência alvo 
e não deixam terminação. A enzima de restrição SmaI é um exemplo de 
enzima que faz cortes bruscos: 
Fragmentos com corte perpendicular, sem terminações de fita única, 
podem ser unidos um ao outro pela DNA ligase. No entanto, fragmentos deste 
tipo são mais difíceis de se ligarem (a reação de ligação é menos eficiente e 
mais propensa a falhar) porque não há terminações de fita única para manter 
as moléculas de DNA na posição.