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M I C R O B I O L O G I A G E R A L – P R O F A . H E L V I A W . C A S U L L O D E A R A Ú J O Características das células PROCARIÓTICAS Tipos de células Básicos As células vivas podem ser: •Procarióticas: Pro (antes) e Karyon (núcleo); Exemplos: Bactérias e cianobactérias •Eucarióticas: eu ( verdadeiro) e Karyon (núcleo); •Exemplos: animais, plantas, fungos e protozoários. Tipos de células Básicos As células eucarióticas que são a mais complexas por possuírem um núcleo celular separado do citoplasma por uma membrana nuclear. As células procarióticas que apresentam material nuclear sem membrana, são as células mais simples ou mais primitivas. Principais características diferenciais dos procariotos 1. Seu DNA não está envolvido por uma membrana; 2. Seu DNA não está associado a proteína histonas; 3. Eles não possuem organelas revestidas por membranas; 4. Suas paredes celulares contêm o peptideoglicano. Principais características diferenciais dos Eucariotos 1. Seu DNA é encontrado no núcleo da célula, que é separado do citoplasma por uma membrana nuclear; 2. Seu DNA está associado a proteína histonas; 3. Eles possuem diversas organelas revestidas por membranas; 4. As paredes celulares quando presentes, são quimicamente simples. Tipos de células Células Procarióticas Células Eucarióticas Origem célula procariótica: 3,7 bilhões de anos (condições anoxigênicas) Tamanho da célula procariótica • Estão entre as menores células; •A maioria mede entre 0,5 a 2,0µm de diâmetro; •Invisíveis a olho nu; • 1012 ou um trilhão de bactérias pesam somente 1 grama; •As bactérias são comumente visualizadas em microscópio ótico; •As bactérias possuem grande relação superfície/volume; Bactéria – Escherichia coli (1µm) A alta relação entre superfície da célula e seu volume permite as células procarióticas as seguintes características: •Permite que os nutrientes alcancem rapidamente toda as partes das células •Alta taxa de metabolismo e crescimento da bactéria; •Quanto menor for a célula maior é o crescimento; •Maior interação entre o meio; A bactéria Escherichia coli sofre divisão celular a cada 20 minutos. - Decomposição: atuam na reciclagem da matéria, devolvendo ao ambiente moléculas e elementos químicos reutilizáveis por outros seres vivos. - Fermentação: algumas bactérias são utilizadas nas indústrias para produzir iogurte, queijo etc (derivados do leite). - Indústria farmacêutica: na fabricação de antibióticos e vitaminas - Indústria química: na produção de metanol, etanol etc; - Genética: com a alteração de seu DNA, pode-se fazer produtos de interesse dos seres humanos, como insulina. - Fixação do Nitrogênio: retiram o nitrogênio do ar e o fixa no solo, servindo de alimentação para as plantas. - Doenças: Cólera, Pneumonia, Tuberculose, Tétano, Gonorréia, Hanseníase, Leptospirose, Disenterias bacterianas,... Importância das bactérias Forma da célula procariótica Cocos : células esféricas. Arredondadas, ovóide. Bacilos: São células cilindrícas ou formando bastão. Bacilos (Halobacterium/Salmonella) Espirilos ou espiral: são bactérias espiraladas ou helicoidais. Espirilo Forma da célula procariótica Vibrião: em formato de vírgula. Vibrião (Bdellovibrio) Espiroqueta: apresenta formato espiral. Espiroqueta (Leptospira) Pleomorfismo: Algumas bactérias podem apresentar variações nas suas formas, dentro de uma mesma cultura, este fenômeno é conhecido como Pleomorfismo. Arranjo da célula procariótica – Plano de divisão cocos •Divisão em um plano: Diplococo- duas células ligadas; •Divisão em um plano e permanece ligados formandos cadeias – tem o arranjo estreptococos; •Divisão em dois planos: produz células com arranjo tétrades, que são quatro células dispostas em cubos, conhecidas como tétrades. •Divisão em três planos: resultam oito células dispostas em cubos chamadas de sarcina . • Aqueles que se dividem em múltiplos planos, formando agrupamentos em forma de cachos de uvas denominadas de estaflilococos Arranjo da célula procariótica – Plano de divisão cocos Arranjo da célula procariótica – BACILOS Paliçada: produz grupos de células alinhados lado a lado como palitos de fósforo. Ex: o bacilo da difteria. Estreptobacillos: apresentam arranjos em formas de cadeias. Diplobacilos : Formam arranjos em pares. Cocobacilos: São ovais e por serem parecidos com os cocos recebem o nome de cocobacilos Os bacilos se dividem com menos agrupamentos que os cocos Arranjo da célula procariótica – BACILOS FORMAS E ARRANJOS DE BACTÉRIAS Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos 1. Flagelos; 2. Glicocálise; 3. Filamentos axiais; 4. Fímbrias e pili Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos Flagelos •Filamentos que projetam para fora das célula a partir da membrana; • comprimento de 15 – 20µm; •Espessura: 12-20nm; • Número e distribuição variável de acordo com o gênero e espécie; •É formada por três partes: o corpo basal, uma estrutura curta em forma de ganchos ou alça; e um longo filamento helicoidal •O filamento é formado por subunidades de proteínas chamadas de flagelina; Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos Flagelos •As Gram negativas apresentam dois pares de anéis o par externo ligado a parede celular e o par interno ligado a membrana plasmática. •As Gram positivas apresentam um par de anéis. •As bactérias com flagelo são móveis, ocorrendo a rotação do corpo basal FUNÇÃO DOS FLAGELOS 1. Locomoção; 2. Participa da quimiotaxia e fototaxia; Movimento: •Buscar ou fugir de condições ambientais favoráveis/desfavoráveis; •Quimiotaxia: Movimento de reposta química ao meio, buscando níveis elevados de nutrientes ou afastando de substâncias tóxicas ou inibitórias; •Fototaxia: movimento em busca da luz ( bactérias fotossintéticas). Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos IMPORTANTE!!!!! •Flagelo é a principal estrutura de locomoção das bactérias; •Nem todas bactérias tem flagelos!!!! •Nem todas as bactérias são móveis!!! •Nem todas as bactérias móveis tem flagelos!!!! Exemplo de bactérias com flagelos: muitas bactérias com formas de bacilos e espirilos. Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos Classificação dos flagelos: As bactérias podem ter um, dois ou muitos flagelos. As bactérias Polares : •Que apresentam apenas um flagelo – Localizada em uma extremidade ou pólo chamam –se MONOTRÍQUIAS; •Que apresentam dois flagelos, um em cada extremidade, são denominadas ANFITRÍQUIAS; •Que apresentam dois ou mais flagelos em uma ou ambas extremidades são chamadas de LOFOTRÍQUIAS; Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos •As bactérias que apresentam flagelos em todas as superfícies são denominadas de PERÍTRIQUIAS. •As bactérias que não apresentam flagelos são as denominadas de ATRÍQUIAS Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos A- B- C- D- Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos Filamentos Axiais •Conhecidos como endoflagelos; •Tem a função de proporcionar mobilidade; •Presentes nas espiroquetas; •Presentes em uma das extremidades em forma de espiral; •Produz um movimento da bainha externa que propele a espiroqueta em um movimento espiral. •Bastante presentes nas Gram – negativas;•São curtas, finas e retas; •Distribuídos homogeneamente na célula ou podem ocorrer em um dos pólos; •Tem a função de fixação; •Possui uma subunidade protéica denominada de pilina; •Como exemplo tem a bactéria Neisseria gonorrhoeae, que auxiliam o micróbio a colonizar as membranas mucosas; •Com as fímbrias ausentes não ocorre a colonização e desta forma não ocorre doença. Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos FÍMBRIAS ou pili de ligação Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos Os pili (singular: pilus) •Normalmente são mais longos que fímbrias; •Há apenas um ou dois por células; •Os pili unem-se às células bacterianas na preparação para a transferência de DNA de uma célula para outra. • Devido a transmissão do DNA, algumas vezes são denominados pili sexuais GLICOCÁLICE •CAMADA EXTERNA DAS CÉLULAS FORMADA POR UM MATERIAL VISCOSO; • FORMADA POR POLISSACARÍDEOS, POLIPEPTÍDEO OU AMBOS; CAMADA LIMOSA : CAMADA DESORGANIZA E ACOPLADA DE FORMA FROUXA CÁPSULA: CAMADA ORGANIZADA E SE LIGA FIRMENTE A PAREDE CELULAR FUNÇÕES: •PROMOVEM A ADERÊNCIA AS SUPERFÍCIEIS; •PROTEÇÃO CONTRA DESSECAMENTO; •RESERVA NUTRITIVA; •PROTEÇÃO CONTRA FAGOCITOSE. •CONTRIBUI PARA VIRULÊNCIA BACTERIANA Estruturas Externas à parede celular dos microorganismos Procarióticos A PAREDE CELULAR A parede celular dos procariotos é uma estrutura bastante complexa, semi- rígida, responsável pela forma da célula; Está presente em quase todos os procariotos; Circunda a membrana plasmática; FUNÇÕES BÁSICAS: Rigidez e manutenção da forma celular; Proteção osmótica; Proteção mecânica (barreira); Essencial ao crescimento e divisão; Responsável por reações de coloração diferencial (GRAM); A PAREDE CELULAR Composição e características: A parede celular bacteriana é composta de uma rede macromolecular denominada de : PEPTIDEOGLICANA OU MUREÍNA; O peptideoglicana é um polímero extremamente poroso e insolúvel A peptideoglicana consiste de um dissacarídeo repetitivo unido por polipeptídeos; A porção dissacarídeo é composta por monossacarídeo denominados N-acetilglicosamina(NAG) e N- acetilmurânico (NAM); A PAREDE CELULAR A PAREDE CELULAR Composição e características: A porção glicana: são moléculas alternadas de NAM e NAG ligadas em filas de 10 a 65 açúcares formando um esqueleto de carboidratos; A porção peptídica: são cadeias laterais de tetrapeptídeos( quatro aminoácido); As moléculas NAM e NAG são ligadas de forma cruzadas com os tetrapeptídeos; Na Gram- positiva o terceiro é a lisina; Na Gram – negativa: o terceiro aminoácido é diaminopimélico; Nas cadeias tetrapeptídeos, alguns aminoácidos são estereoisômeros. A PAREDE CELULAR Composição e características: No peptideoglicano os açúcares e os tetrapeptídeos se ligam de forma cruzada através de uma ligação peptídica simples. A PAREDE CELULAR – GRAM POSITIVA A parede celular das Gram Positivas consiste de várias camadas de peptideoglicana, formando uma estrutura espessa e rígida; Contém ácidos teicóicos, que consiste principalmente em um álcool( como o glicerol ou ribitol) e fosfato; Acidos teicóicos: podem unir e regular o movimento dos cátions; Os ácidos teicóicos também assumem um papel importante no crescimento da célula, impedindo a ruptura extensa da célula. ÁCIDO TEICÓICO: É UM POLOSSACARÍDEO APENAS PRESENTE NA PAREDE DAS BACTÉRIAS GRAM POSITIVAS •Favorecem o transporte dos íons para dentro e para fora das células, devido a carga negativa do grupamento fosfato. •O ácido teicóico funciona como sítios de ligação para bacteriófagos. A PAREDE CELULAR – GRAM POSITIVA A PAREDE CELULAR – GRAM NEGATIVA Consistem de uma ou poucas camadas de peptideoglicana e uma membrana externa. A membrana externa consiste de lipopolissacarídeos(LPS), lipoproteínas e fosfolipídeos; A porção lipídica do LPS, denominada de lipídeo A, é referida como endotoxina, sendo tóxica quando presente na corrente sanguínea. Não contém ácidos teicóicos; Possui o espaço periplasmático que representa uma área muito ativa que contém muitas enzimas digestivas e proteínas de transporte. Diferença entre a Parede celular das bactérias Gram negativas e positivas: 1. Mais complexa que as das bactérias Gram- positivas; 2. A Gram negativas Possuem uma camada externa que recobre a fina camada de peptideoglicano; 3. Possuem um espaço periplásmatico(periplasma) entre a membrana citoplasmática e a membrana externa; 4. A membrana externa responsável pela resistência das bactérias GRAM-; 5. Devido a fina camada de peptideoglicana nas Gram negativas, elas são mais suscetíveis ao rompimento mecânico. A PAREDE CELULAR Diferença na composição da Parede celular de bactérias Gram + e Gram negativas GRAM + GRAM - PEPTIDEOGLICANO – 50% PEPTIDEOGLICANO10-20% ÁCIDOS TEICÓICOS FOSFOLIPÍDEOS LIPOPOLISSACARÍDEOS (LPS) LIPOPROTEÍNAS A PAREDE CELULAR Diferença da Parede celular de bactérias Gram + e Gram negativas Características GRAM Positivas GRAM negativas Peptideoglicana Camada espessa Camada fina Ácido teicóico presente Ausente Lipídios Escassos Alta presença Membrana externa Ausente Presente Espaço periplasmático Ausente Presente Estrutura flagelar 2 anéis ao corpo basal 4 anéis ao corpo basal Forma da célula Sempre rígida Rígida ou flexível Resultado da digestão enzimática- lisozima Protoplasto Esferoplasto Sensibilidade a corantes e antibióticos Mais sensível Moderadamente sensível Resistência à ruptura física alta baixa Gram negativaGram positiva Fixação Cristal violeta Tratamento com lugol Álcool - acetona Corante de contraste safranina Qual o motivo da GRAM+ permanecer Púrpura?Qual o motivo da GRAM+ permanecer Púrpura? GRAM -GRAM + PAREDES CELULARES DAS BACTÉRIAS GRAM+ E GRAM - A PAREDE CELULAR A MEMBRANA PLASMÁTICA MEMBRANA CELULARMEMBRANA CELULAR Composição química : •Fosfolipídios Apresentam em estado fluido, permitindo que os componentes protéicos se movimentam na membrana. •Proteínas Estão dispersa entre as moléculas de lipídios e algumas agem como carreadoras, através dos canis que formam. Estrutura: •Bicamada de fosfolipídios; •Proteínas ficam embebidas; •As membranas de procariotos não possuem esteróis(colesterol), tornando-as mais flexíveis; •O arranjo de fosfolipídios e proteínas é chamado de modelo mosaico fluido •Estruturação semelhantes as células eucarióticas A MEMBRANA PLASMÁTICA A MEMBRANA PLASMÁTICA FUNÇÕES DA MEMBRANA CITOPLÁSMATICAFUNÇÕES DA MEMBRANA CITOPLÁSMATICA •Permeabilidade Seletiva; •Transporte de nutrientes; • Secreta proteínas; •Respiração celular e digestão de nutrientes ; •Captura energia na forma de ATP •Ajuda na replicação do DNA. FUNÇÕES DA MEMBRANA PLASMÁTICA MOVIMENTO DE SUBSTÂNCIAS ATRAVÉS DA MEMBRANA PLASMÁTICA Os materiais se movem através das membranas plasmática através de dois processos: 1. Processo passivo: as substâncias atravessam a membrana de uma área de alta concentração para uma de baixa concentração . SEM GASTO DE ENERGIA. Incluem os processos:Difusão simples, Difusão facilitada e a osmose 2. Processo Ativo: a célula gasta energia (ATP) para mover as substâncias das áreas de alta concentração . MOVIMENTO DE SUBSTÂNCIAS ATRAVÉS DA MEMBRANA PLASMÁTICA Difusão simples: corresponde à resultante do movimento de partículas de uma região de maior para uma de menor concentração Difusão simples: ocorregeralmente nas células o transporte de oxigênio e o dióxido de carbono MOVIMENTO DE SUBSTÂNCIAS ATRAVÉS DA MEMBRANA PLASMÁTICA A difusão facilitada: é a difusão que ocorre em um gradiente de concentração através da membrana com auxílio poros especiais ou moléculas transportadora. MOVIMENTO DE SUBSTÂNCIAS ATRAVÉS DA MEMBRANA PLASMÁTICA Osmose: É o movimento líquido de moléculas de solvente através de uma membrana seletivamente permeável, de uma região de alta concentração para outra de baixa concentração. A pressão osmótica: é definida como a pressão necessária para impedir o fluxo de água pela osmose. Solução isotônica: a concentração total de solutos é a mesmo em qualquer lado da membrana semipermeável, não há fluxo líquido de água. Solução hipôtonica : a concentração de solutos no meio é mais baixa que no interior da célula, desta forma a água entra na célula. Solução hipertônica: tem uma concentração mais alta de solutos do que no interior da célula, neste caso a água deixa o interior da célula. MOVIMENTO DE SUBSTÂNCIAS ATRAVÉS DA MEMBRANA PLASMÁTICA OSMOSE MOVIMENTO DE SUBSTÂNCIAS ATRAVÉS DA MEMBRANA PLASMÁTICA ESTRUTURA INTERNA DAS CÉLULAS PROCARIÓTICAS •CITOPLASMA; •RIBOSSOMOS; •NUCLEÓIDE; •INCLUSÕES; •ENDOSPOROS Citoplasma •Formado por 80% de água, o restante por substâncias que incluem enzimas e outras proteínas, carboidratos, lipídios e uma variedades de íons inorgânicos; •Fluido denso onde ocorrem diversas reações químicas; •As principais estruturas do citoplasma dos procariotos são: área nuclear, ribossomos e inclusões. ESTRUTURA INTERNA DAS CÉLULASPROCARIÓTICAS Ribossomos: •São compostos de ácido ribonucléico (RNA) e proteína; •Estão dispersos e abundantes no citoplasma; •Possuem duas subunidades de tamanhos diferentes. A maior é a subunidade 50S e a menor é a subunidade 30S, juntas elas formar o ribossomo bacteriano 70S (unidade de Svedberg). FUNÇÃO DOS RIBOSSOMOS: •Participa da síntese protéica Os ribossomos procarióticos são alvos de muitos antibióticos que inibem a síntese de proteínas, tais como a estreptomicina, neomicina, eritromicina e a tetraciclina. Estrutura interna da membrana celularEstrutura interna da membrana celular Estrutura interna da membrana celularEstrutura interna da membrana celular Região Nuclear •As bactérias têm uma região nuclear ou nucleóide; •A região nuclear é constituída principalmente por DNA, mas possui algum RNA e também proteínas associadas; •O DNA de dupla fita que é denominado de cromossomo bacteriano é uma única molécula longa, contínua e arranjada de forma circular •Função: armazenamento das informações genéticas. Plasmídios •São pequenas moléculas circulares de DNA chamadas de extracromossômico; • Possuem informações genéticas que não são vitais as células. INCLUSÕES •As células procarióticas dentro de seu citoplasma apresentam diferentes tipos de substâncias, que servirão como depósito de reservas denominadas de inclusões; •As inclusões são : Grânulos ou vesículas. Os Grânulos de polifosfato são chamados volutina, ou grânulos metacromáticos, pois apresentam metacromosia. Grânulos Polissacarídicos; Carbixossomos; Magnetossomos. Estrutura interna da membrana celularEstrutura interna da membrana celular Vesículas ou vacúolos de Gás Certas bactérias possuem estruturas especializadas envoltas por membranas chamadas de vesículas ou vacúolos, que proporcionam a capacidade destes organismos flutuarem na coluna de água para obter a quantidade de luz, oxigênio e nutrientes necessários, este fato se deve a quantidade de gás presente nos vacúolos. Vacúolos estão presentes em bactérias fotossintéticas e cianobactérias Estrutura interna da membrana celularEstrutura interna da membrana celular •Determinadas células vegetativas de algumas bactérias gram positivas produzem estágios de repousos chamados endósporos; •A falta de nutrientes induzem a determinadas células bacterianas a produzirem esporos; •A esporulação, ou formação de endósporos, é a forma que algumas bactérias convive em condições desfavoráveis. •A esporulação em bactéria não é um meio de reprodução; •Os endósporos são células desidratadas, duráveis, com paredes espessas e camadas adicionais. Endósporos ou formas latentes de Microorganismos Procarióticos Esporulação Endósporos ou formas latentes de Microorganismos Procarióticos •O centro altamente desidratado do esporo, contém somente, DNA, pouco ribossomos, enzimas e algumas moléculas pequenas importantes entre ela o ácido dipicolínico; •O ácido dipicolínico (DPA) possui grande quantidade de íons cálcio ( Ca+2) •A presença do ácido dipicolínico (DPA) proporciona a alta resistência a temperatura; •Bactérias permanecem nesta fase latente até encontrarem condições favoráveis. •A germinação é ativada por uma lesão física ou química no revestimento do esporo, com a penetração da água inicia-se o metabolismo. •Encontradas em algumas Gram positivas: Bacillus, Clostridium, Sporosarcina, Sporolactobacillus; •Os esporos são importantes do ponto de vista clinico e para a indústria alimentícia, pois são resistentes a processos que normalmente matam as células vegetativas. Endósporos ou formas latentes de Microorganismos Procarióticos Endosporos ou formas latentes de Microorganismos Procarióticos Endosporos ou formas latentes de Microorganismos Procarióticos Características Células Vegetativas Endósporo Aspecto Microscópio Não refringente Refringente Conteúdo de Cálcio Baixo Alto Ácido Dipicolínico Ausente Presente Atividade Enzimática Alta Baixa Metabolismo ( captação de O2) Elevado Ausente ou muito baixo Síntese macromoléculas Presente Ausente Resistência ao calor baixo alto Resistência à Radiação baixo Alto Resistentes agentes químicos (H2O2), ácidos... Baixo Alto Conteúdo de água Alto Baixo Capacidade de corar Presente Presente ,apenas em métodos especiais Estruturas da células Procarióticas FUNDAMENTAIS Para viabilidade da célula Parede celular Membrana Citoplasmática Citoplasma Ribossomos Nucleóide ACESSÓRIOS Confere características adicionais a célula Flagelo Pili Cápsulas Plasmídeos Endósporo Inclusões 1- cápsula; 2 – Parede celular; 3 – membrana plasmática; 4 – citoplasma; 5- ribossomos; 6- Mesossomos; 7 – Nucleóide – DNA; 8 - Flagelo Células Procarióticas Células Procarióticas 1- 2- 3- 4- 5 - 6 - 7- 8 -
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