1 ténicas de semeadura e cultura de bacterias

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Aula prática 1 – Cultura Microbiana de amostras do meio ambiente
Materiais:
	1.1) Placa de Petri;
1.2) Ágar Sangue;
1.3) Ágar Manitol;
1.4) Ágar EMB;
1.5) Swab estéril;
1.6) Bico de Bunsen
1.7) E.P.I
	Fig. 1) Bico de Bunsen
Métodos:
Fig 2. Swab
	2.1) realizamos a coleta do material em Swab Estéril, nos seguintes locais:
Superfície do Bebedouro do 3º andar – Identificado com um ponto na placa.
Superfície da Tampa do vaso sanitário do Banheiro Feminino do 3º andar.
	
2.2) Semeadura do Material em três diferentes meios de Cultura:
	
	
 Fig. 3 - Ágar Sangue – Meio não seletivo, porém diferencial (Por meio do padrão de hemólise de cada bácteria)
	
	
 Fig. 4 - Ágar Manitol – Meio seletivo para Sthafilococcus, diferencial para Stafillococcus Aureus (por meio da fermentação de polissacarídeos).
	
	
 Fig. 5 - Ágar EMB Teague – Meio seletivo para Enterobactérias e Bacilos intestinais, diferencial para fermentadoras de Lactose/Sacarose (Por meio da absorção do corante eosina azul, quando positivo). É um meio muito diferencial para E. coli.
Figura 6 – Diferenciação visual dos meios de cultura
Técnica de Semeadura: A semeadura consiste na passagem do Swab no meio de cultura. A manipulação ocorre no raio de proteção gerado pela chama do bico de Bunsen, que deve estar o mais transparente possível.
2.3) Deixamos por 48h as placas em estufa a 37ºC, para que as bactérias se adaptem ao novo ambiente e se alimentem dos nutrientes proveniente dos meios de cultura, tornando possível o crescimento das colônias.
2.4) Após o período de 48h, transferimos as placas para uma geladeira a 4ºC, diminuindo o crescimento para observação na semana seguinte.
Resultados:
3.1). Resultados após uma semana da semeadura. Crescimento em 48h em estufa a 37ºC e 5 dias em geladeira a 4ºC:
	Amostra
	Ágar Sangue
	Ágar Manitol
	Ágar EMB
	Bebedouro (5º andar)
	Beta e Alfa Hemolítica
	Negativo
	Negativo
	Corrimão (3ºandar)
	Beta e Alfa Hemolítica (Predomínio Beta h.)
	Negativo
	Lactose +
	Celular 1
	Beta Hemolítica
	Coagulase + e –
	Negativo
	Maçaneta
	Beta e Alfa Hemolítica
	Coagulase –
	Negativo
	Celular 2
	Beta, alfa e Gama Hemolítica
	Coagulase –
	Lactose –
	Vaso Sanitário
	Beta Hemolítica
	Negativo
	Negativo
	Bebedouro (3º andar)
	Beta Hemolítica
	Coagulase +
	Lactose –
Conclusão;
Por meio desta aula observamos a técnica de semeadura de bactérias e como ocorre a cultura destas no ambiente laboratorial. Observamos também como ocorre a seleção e diferenciação destas nos diferentes meios de cultura (ágar sangue, Manitol e EMB) . Além de técnicas de biossegurança.