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CROMATOGRAFIAS CCD CCD DE ALTA RESOLUÇÃO LÍQUIDA (HPLC) GASOSA (CG e CG/EM) PAPEL IMUNOCROMATOGRAFIA FUNDAMENTO DOS MÉTODOS • SEPARAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS, PARA: – IDENTIFICAÇÃO (QUALITATIVOS); – QUANTIFICAÇÃO (QUANTITATIVOS E SEMI-QUANTI) Histórico Mikhail Semyonovich Tswet, 1930 Apresentou em Congresso de Médicos e Naturalistas de San Petersburgo Cluna de absorção líquida, Com carbonato de cálcio Separação de pigmentos De plantas Cromatografia em Papel Cromatografia em Camada Delgada - CCD • Pré-tratamento das amostras (biológicas, ambientais, etc) – Necessidade de aplicação de métodos de extração • Purificação (diminuir interferentes); • Concentração (aumentar sensibilidade do método) • Separação de misturas de substâncias, pelas características físico-químicas das mesmas – P.M., polaridade, afinidade físico-química, solubilidade, etc. Placas Placas de sílica Merck Cromatografia em Camada Delgada - CCD • Não aplicável a solventes e gases; • Mistura sólido/líquido; • Duas fases: – Fase estacionária (Sólida) • Superfície Plana – Adsorvente • Pós finos (sílica, p.e); Inerte • Finos (aumenta superf. de contato – Fase móvel (líquida – soventes) Afinidade pelas fases • Adsorção: – Temperatura, Pressão, Área da superfície e força de interações moleculares (Van der Walls, dipolo-dipolo, etc). Quím. Nova vol.28 no.3 São Paulo May/June 2005 CCD – cubas e corrida/Estabilidade CCD Cromatografia Gasosa - CG Cromatograma CG-MS Colunas cromatográficas CG-EM HPLC – Cromatografia Líquida de Alta Eficiência HPLC – High Performance Liquid Chromatography Colunas cromatogáficas
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