Comparação entre dois métodos de determinação de colesterol em Alimentos

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Universidade Federal do Maranhão – UFMA
Centro de Ciências Sociais, Saúde e Tecnologia – CCSST
Campus de Imperatriz; Unidade Avançada Bom Jesus
Disciplina: Análise de Alimentos
Docente: Profª Dra. Ana Lúcia Fernandes Pereira
COLESTEROL EM ALIMENTOS
“Avaliação comparativa entre dois métodos para determinação do colesterol em carnes e leite.”
Autoras: Tatiana SALDANHA; Mônica Roberta MAZALLI; Neura BRAGAGNOLO.
Discentes: Mauriane Maciel da Silva 
	 Sabrina Cynthia de Araújo Ramalho
 
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1. HISTÓRICO
 O colesterol é um tipo de gordura presente nas células, fundamental para o bom funcionamento do organismo. No entanto, ter os níveis de colesterol total alto no sangue aumenta o risco de doenças cardiovasculares
 Cerca de 75% do colesterol do organismo é produzido pelo corpo, e apenas 25% é obtido pela alimentação
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2. INTRODUÇÃO
Método enzimático
Degradação do colesterol pela enzima colesterol-oxidase  H2O2  Cor
Superestima os teores de colesterol em alguns alimentos  interação com a enzima colesterol-oxidase
 Amostras e massas contendo ovos, maionese, sopas, salsichas, queijo, frango e determinação de colesterol em sangue humano
Métodos cromatográficos
Impedem a oxidação do colesterol a 30 ºC
Muito onerosos
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3. OBJETIVO
 Otimizar, validar e comparar duas metodologias distintas, enzimática e por CLAE na determinação dos teores de colesterol em amostras de leite e carne.
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4. MATERIAL E MÉTODOS
10 repetições de cada amostra para ambos métodos
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4-aminofenizona
fenol
FIGURA 1. Fluxograma para determinação de colesterol em carne.
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FIGURA 2. Fluxograma para determinação de colesterol em leite.
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4. MATERIAL E MÉTODOS
Cromatógrafo líquido (SHIMADZU) equipado com sistema ternário de solventes (LC–10 ADVP) e detector UV-Visível (SPD -10 AVVP)
Coluna analítica de C18 , 100 x 4,6mm x 4μm
Solventes em grau cromatográfico, filtrados e desgaseificados em ultrassom antes do uso. 
Cromatogramas processados a 210nm
A identificação do colesterol  comparação do tempo de retenção das amostras com o padrão e a quantificação através das áreas correspondentes dos picos, por padronização interna, utilizando-se 6-cetocolestanol como padrão interno.
Determinação do colesterol por CLAE
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4. MATERIAL E MÉTODOS
Utilização de material de referência certificado de carne (SRM 1546, NIST) 
Verificar e garantir exatidão e precisão das metodologias testadas
Recuperação
Adicionando-se dois níveis de colesterol às amostras de carne (0,503 e 0,760mg) e leite (0,106 e 0,125mg)
5 repetições para cada nível de adição
%CV para verificar a precisão.
Validação das metodologias
Análise estatística
Análise de variação e as médias comparadas pelo Teste de Tuckey a 1,0 % de significância
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5. RESULTADOS E DISCUSSÃO
TABELA 1. Teores de colesterol (mg/100g) em amostras de
carne obtidos pela comparação entre os métodos enzimático
e por CLAE.
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5. RESULTADOS E DISCUSSÃO
TABELA 2. Teores de colesterol (mg/100g) em amostras de
leite obtidos pela comparação entre os métodos enzimático
e por CLAE.
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5. RESULTADOS E DISCUSSÃO
TABELA 3. Teores de colesterol (mg/100g) em material de
referência certificado de carne (SRN 1546, NIST)
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5. RESULTADOS E DISCUSSÃO
TABELA 4. Recuperação do colesterol (%) em amostras de
carne, obtidas pelos métodos cromatográfico e enzimático.
TABELA 5. Recuperação do colesterol (%) em amostras de
leite, obtidas pelos métodos cromatográfico e enzimático.
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6. CONCLUSÃO
A metodologia enzimática apresentou-se exata e precisa, podendo ser empregada com segurança por indústrias de alimentos e laboratórios de pesquisa na determinação dos teores de colesterol em carne e leite, sendo uma opção barata e rápida, especialmente quando um grande número de amostras é analisado. Entretanto, ao contrário da metodologia cromatográfica, necessita de controle rigoroso das condições de análise.
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7. REFERÊNCIAS
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7. REFERÊNCIAS
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non-aqueous capillary electrophoresis. J. Chrom. B., v. 768, p. 369-373, 2002.
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Obrigada pela atenção!!!