3. Anticorpos Monoclonais

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Anticorpos Monoclonais Anticorpos Monoclonais 
Professora: Amanda Vasconcelos do Nascimento, Bsc em 
Biomedicina, UFPE. Mestranda em Biociências e Biotecnologia em 
Saúde, Fiocruz-PE
O que são Anticorpos Monoclonais ?
São anticorpos que produzem 
clones com uma única clones com uma única 
especificidade!
Como são produzidos?
• Foram idealizados pelos cientistas Georges Köhler e
Cesar Milstein, em 1975;
• Utilizaram a técnica do Hibridoma ;
• O trabalho foi Publicado na Revista Nature.
Teoria do Hibridoma de Köhler e 
Milstein
• 1°Linhagem Celular – Os Linfócitos B podem ser ativados a
produzir anticorpo específico para um antígeno de interesse,
mas têm vida curta quando cultivados in vitro.
• 2° Linhagem Celular- As células de mieloma crescem• 2° Linhagem Celular- As células de mieloma crescem
indefinidamente in vitro mas perdem sua habilidade para
produzir imunoglobulina.
HIBRIDOMA
• Os Híbridos formados tinham propriedades de crescimento
imortal em cultura e a habilidade para produzir e secretar
anticorpo de um única especificidade.
Geração de Anticorpos Monoclonais 
Polietilenoglicol
(PEG)
Hipoxantina aminopterinaHipoxantina aminopterina
e timidina (HAT) inibe o
crescimento do Mieloma,
por não possui a
enzima hipoxantina
fosforribosil transferase
(HPRT).
Anticorpos Monoclonais 
Especificidade de ligação,
homogeneidade e pode serhomogeneidade e pode ser
produzido em quantidades
ilimitadas
Produção de Anticorpos Monoclonais
• Imunização do camundongo
• Seleção dos Linfócitos B
• Função com a linhagem de Mieloma
• Seleção dos clones positivos• Seleção dos clones positivos
• “Screening”(ELISA, dot-blot, imunocitoquímica)
• Clonagem e detecção do isotipo do Ac monoclonal
• Criopreservação das células
• Produção de ascites ou propagação em meio de cultura
• Purificação do anticorpo
• Conjugação a uma enzima (Ac conjugado)
Aplicações dos Anticorpos Monoclonais 
• Intentificação de marcadores Fenotípicos
▫ Estes anticorpos são utilizados na definição de
grupamentos ( clusters ) de diferenciação (CD) degrupamentos ( clusters ) de diferenciação (CD) de
diversos tipos celulares.
▫ CD4, CD8, CD19, CD80
Linfócito 
T Helper Linfócito T 
Citotóxixo
Molécula Co-
estimulatória
Linfócito B
Aplicações dos Anticorpos Monoclonais 
• Imunodiagnóstico
▫ É utilizado no diagnósticos de inúmeras doenças
Infecciosas e Sistêmicas, e é baseado na detecção de
antígenos ou anticorpos na circulação ou em tecidos,antígenos ou anticorpos na circulação ou em tecidos,
através da utilização de anticorpos monoclonais.
▫ Exs: Doença de Chagas, Leishmanioses, Sífilis, Lúpus.
Aplicações dos Anticorpos Monoclonais 
• Detecção de Tumores 
▫ São utilizados anticorpos monoclonais específicos
contra tumores na detecção de neoplasias por técnicas
de diagnósticos por imagem e coloração de tecidos
com imunoglobulinas marcadas.com imunoglobulinas marcadas.
▫ Exemplos de técnicas: Imunocitoquímica,
Imunohistoquímica.
▫ Neoplasias: Câncer de mama, Câncer de próstata,
câncer de colo de útero.
• Terapia
▫ Avanços na medicina levaram a identificação de células
e moléculas envolvidas na patogênese de diversas
doenças.
Aplicações dos Anticorpos Monoclonais 
doenças.
▫ Devido a grande especificidade dos Ac monoclonais ,
eles podem ser direcionados a tais células e moléculas.
▫ Exemplos: Ac contra TNF (Doenças Inflamatórias); Ac
contra CD20 (Leucemias de Linfócito B); Ac contra
Fator de Crescimento Epidérmico Tipo 2 (Cancer de
mama)
Ac monoclonais utilizados na prática 
médica 
• OKT3: Liga-se à molécula CD3 de linfócitos T e é usado para
prevenir rejeição aguda de órgãos transplantados.
• Rituximab: Liga-se ao CD20 em linfócitos B e é usado para
tratar linfomas.
• Daclizumab: Liga-se a uma parte do receptor para IL-2 em
células T ativadas. É usado na prevenção da rejeição de rins
transplantados.
• Infliximab:Liga-se ao TNF-α e tem se mostrado promissor
no tratamento de doenças inflamatórias.
• Herceptin:liga-se à HER2, que é um receptor para fator de
crescimento de células tumorais. Parece ser efetivo contra
tumores sólidos.
• Pesquisa de moléculas secretadas ou ancoradas a 
superfície celular
� São utilizados para estimular ou inibir determinadas 
moléculas, interferindo em certas funções celulares .
Aplicações dos Anticorpos Monoclonais 
moléculas, interferindo em certas funções celulares .
� São utilizadas para purificar populações celulares em 
misturas complexas.
• Estudos epidemiológicos.
▫ Com a utilização do Anticorpos monoclonais é
possível reconhecer variantes e mutantes de
agentes patogênicos aumentando a nossa
Aplicações dos Anticorpos Monoclonais 
agentes patogênicos aumentando a nossa
capacidade de entendimento e controle dos surtos
epidêmicos provocados por mutantes novos.
Limitações de Utilização de Anticorpos 
monoclonais 
• Como são produzidos em camundongos , Acs monoclonais
podem ser reconhecidos pelo sistema imune do homem como
não-próprio e o paciente pode apresentar resposta imune
contra eles, produzindo Acs anti-camundongo ou
HAMA(human anti-mouse antibodies).HAMA(human anti-mouse antibodies).
SOLUÇÃO ???
Consiste em fundir a região hipervariável da molécula de Ac
Monoclonal do camundongo com a porção constante da molécula 
de Ac humano,através de engenharia genética.
OBRIGADA!!
Obrigada !!!
OBRIGADA!!