SOROLOGIA. - IMPORTÂNCIA E PARÂMETROS.

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SOROLOGIA: IMPORTÂNCIA E 
PARÂMETROS
Universidade Federal de Pernambuco
Centro de Ciências da Saúde
Departamento de Patologia
Imunologia e Sorologia
PARÂMETROS
Recife
2014
Patrícia Areias Feitosa Neves
• Ausência do agente infeccioso
• Falta de sensibilidade dos métodos
• Ausência do agente infeccioso
• Falta de sensibilidade dos métodos
Métodos 
IMPORTÂNCIA DOS TESTES SOROLÓGICOS NA PATOLOGIA CLÍNICA
O diagnóstico de certeza do processo infeccioso é a demonstração do patógeno ou 
de seus produtos nos fluidos biológicos dos hospedeiros. Porém, nem sempre isso 
é possível.
• Falta de sensibilidade dos métodos
• Falhas técnicas
• Demora na liberação dos resultados
• Falta de sensibilidade dos métodos
• Falhas técnicas
• Demora na liberação dos resultados
Métodos 
parasitológicos ou 
microbiológicos
• Simplicidade de execução
• Automação
• Baixo custo operacional
• Rapidez
• Simplicidade de execução
• Automação
• Baixo custo operacional
• Rapidez
Métodos 
imunológicos
Importância da Pesquisa de Anticorpos no Diagnóstico 
Individual
1. Elucidar processos patológicos com sintomas e sinais clínicos
confundíveis.
Ex: patologias como toxoplasmose e mononucleose infecciosa.
2. Diferenciar a fase da doença:2. Diferenciar a fase da doença:
Ex: IgM nos processos agudos e IgG nos processos crônicos.
3. Diagnosticar doença congênita:
Ex: presença de anticorpos IgM anti-T. pallidum no sangue do cordão umbilical.
4. Selecionar doadores de sangue:
Ex: triagem sorológica para doença de Chagas, sífilis, hepatites B e C, HIV,
HTLV, etc.
5. Selecionar doadores e receptores de órgãos para transplantes:
Importância da Pesquisa de Anticorpos no Diagnóstico 
Individual
5. Selecionar doadores e receptores de órgãos para transplantes:
Ex: anticorpos específicos para determinantes estruturais que caracterizam
antígenos do HLA.
6. Avaliar prognóstico da doença:
Ex: presença de anticorpos anti-HBe na hepatite B.
Importância da Pesquisa de Anticorpos no Diagnóstico 
Individual
7. Avaliar a eficácia da terapêutica:
Ex: queda gradual dos níveis de anticorpos.
8. Avaliar a imunidade especifica naturalmente adquirida ou8. Avaliar a imunidade especifica naturalmente adquirida ou
artificialmente induzida:
Ex: anticorpos produzidos após vacinação.
9. Verificar o agravamento da patologia:
Ex: presença de auto-anticorpos
Importância dos Testes Sorológicos para a Pesquisa 
de Antígenos
1. Como critério de cura:
Ex: Ausência do patógeno ou seus produtos (teste de pesquisa de Ag negativo).
2. Na definição da etiologia da doença:
Ex: presença de antígenos específicos.
3. Na seleção de doadores de sangue:
Ex: Pesquisa de antígenos circulante em detrimento da janela imunológica.
4. Em inquéritos epidemiológicos.
Parâmetros para validação de um teste 
sorológicosorológico
Parâmetros para validação de um teste sorológico
• TESTE
DOENÇA – DIAGNÓSTICO VERDADEIRO
PRESENTE AUSENTE TOTAL
POSITIVO Verdadeiro Positivo Falso Positivo VP + FPPOSITIVO Verdadeiro Positivo
(VP)
Falso Positivo 
(FP)
VP + FP
NEGATIVO Falso Negativo
(FN)
Verdadeiro Negativo 
(VN)
FN + VN
TOTAL VP + FN FP + VN VP + VN + FP + FN
(total de indivíduos)
• O teste de referência é utilizado para definir o verdadeiro estado do paciente.
• O teste de referência deve ser definitivo e independente do que está sendo
avaliado.
1. Sensibilidade
• Porcentagem de resultados positivos pelo
teste na população de doentes, ou seja, a
proporção de resultados verdadeiros
positivos.
S= VP
VP + FN
TESTE
DOENÇA – DIAGNÓSTICO
VERDADEIRO
AUSENTE TOTAL
POSITIVO 25 120
NEGATIVO 175 180
TOTAL 200 300
Exemplo:
S = 95
100
95%
2. Especificidade
• Porcentagem de resultados negativos
pelo teste nos indivíduos não doentes, ou
seja, a proporção de verdadeiros
negativos.
E= VN
VN + FP
TESTE
DOENÇA – DIAGNÓSTICO
VERDADEIRO
PRESENTE TOTAL
POSITIVO 95 120
NEGATIVO 5 180
TOTAL 100 300
Exemplo:
E= 175
200
87,5%
3. Eficiência
• Relação entre o somatório dos
verdadeiros resultados positivos e
verdadeiros resultados negativos
com a população estudada.
EF = VP + VN 
VP + VN + FP + FN 
TESTE
DOENÇA – DIAGNÓSTICO
VERDADEIRO
TOTAL
POSITIVO 120
NEGATIVO 180
TOTAL 300
Exemplo:
EF = 270
300
90%
4. Valor preditivo positivo (VPP)
• Proporção de indivíduos doentes entre
os resultados positivos obtidos no teste
em estudo, portanto se refere a
probabilidade de doença quando o
resultado do teste é positivo.
VPP= VP 
VP + FP 
TESTE
DOENÇA – DIAGNÓSTICO
VERDADEIRO
PRESENTE AUSENTE TOTAL
NEGATIVO 5 175 180
TOTAL 100 200 300
Exemplo:
VPP = 95
120
79,16%
5. Valor Preditivo Negativo (VPN)
• Proporção de indivíduos não doentes
entre os resultados negativos do teste
em estudo, portanto se refere a
probabilidade da não-ocorrência da
doença quando o resultado do teste é
negativo.
VPN= VN 
VN + FN 
negativo.
TESTE
DOENÇA – DIAGNÓSTICO
VERDADEIRO
PRESENTE AUSENTE TOTAL
POSITIVO 95 25 120
TOTAL 100 200 300
Exemplo:
VPN= 175
180
97,22%
6. Prevalência
• Porcentagem de indivíduos
doentes em uma população.
P= VP + FN
VP + FN + VN + FP
TESTE
DOENÇA – DIAGNÓSTICO
VERDADEIRO
PRESENTE AUSENTE TOTAL
POSITIVO 95 25 120
NEGATIVO 5 175 180
TOTAL 100 200 300
Exemplo:
P= 100
300
33,33%
P. S.= VP + FP
VP + FN + VN + FP
7. Prevalência sorológica
• Porcentagem de casos
positivos pelo teste
TESTE
DOENÇA – DIAGNÓSTICO
VERDADEIRO
PRESENTE AUSENTE TOTAL
POSITIVO 95 25 120
NEGATIVO 5 175 180
TOTAL 100 200 300
Exemplo:
P= 120
300
40%
8. Limiar de reatividade ou cut-off
É a região de corte do teste 
sorológico, ou seja, um valor 
acima do qual os resultados acima do qual os resultados 
são considerados positivos e 
abaixo os resultados são 
dados como negativos.
Corte em:
α = máxima sensibilidade.
β = máximas sensibilidade
e especificidade.
γ = máxima especificidade
8. Limiar de reatividade ou cut-off
� O cut-off pode variar de
acordo com a finalidade do
teste:
� Triagem de doadores de sangue:
alta sensibilidade.
� Certeza diagnóstica: alta
especificidade.
9. Curva ROC (Receiver Operating Characteristic) 
� A curva ROC é uma ferramenta que
permite estudar a variação da
sensibilidade e especificidade para
diferentes valores de pontos de cortes.
� É definida como a relação entre a taxa� É definida como a relação entre a taxa
de verdadeiros positivos
(sensibilidade) e a taxa de falsos
positivos (1-especificidade).
AUC = 0,7 a 0,8 = Razoável
0,8 a 0,9 = Bom
> 0,9 = Excelente
Área sob a curva 
ROC
Desempenho do 
teste
0,7 Razoável
Superior a 0,8 Bom
Superior a 0,9 Excelente
� O ponto mais acima e à esquerda
corresponde ao melhor ponto de
corte para o teste.
Exemplo 1: validação da técnica de ELISA utilizando antígenos
recombinantes de T. cruzi para monitorar eficácia do tratamento com o Bz.
�Indivíduos saudáveis – 34;
�Pacientes adultos infectados pelo T. cruzi – 40.
FN = 7
FP = 1
VP
FP = 1
VP = 33
VN = 33
FP
FN
Sensibilidade e 
especificidade???
82,5%
VN
97,05% 
Exemplo 2:
Precisão
• É um parâmetro que determina existir concordância dos resultados
obtidos quando um mesmo teste é feito várias vezes.
Exatidão ou Acurácia
• É um parâmetro que determina a capacidade do teste em fornecer• É um parâmetro que determina a capacidade do teste em fornecer
resultados muito próximos ao verdadeiro valor do que está se
medindo.
Reprodutibilidade
• Refere-se à obtenção de resultados iguaisem testes realizados com a
mesma amostra do material biológico, quando feito por diferentes
pessoas em diferentes locais.
Índice Kappa
• Mede a avaliação da reprodutibilidade pelo grau e concordância
entre os resultados de dois ou mais observadores.