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Roteiro de Aulas Práticas – Departamento de Fisiologia e Biofísica – ICB - UFMG ROTEIRO PARA A AULA PRÁTICA: TONICIDADE INTRODUÇÃO O movimento de água através da membrana plasmática depende não apenas da concentração do soluto e do solvente, mas também da natureza do soluto (fatores moleculares) e do seu mecanismo de transporte (fatores inerentes às membranas). OBJETIVO Estudar a influência da composição do meio externo sobre o movimento de água através da membrana plasmática, utilizando hemácias de mamífero como modelo. Avaliar o efeito da permeabilidade a solutos diferentes: o cloreto de sódio (membrana plasmática impermeável) e a uréia (membrana plasmática permeável). CONHECIMENTOS PRÉVIOS Osmolaridade Coeficiente de reflexão Tonicidade celular Preparo de soluções Osmolaridade da hemácea: 0,300 Osmois/L MATERIAL Hemácias de mamífero Água destilada Solução de NaCl 0,3 mol/L Solução de uréia 0,6 mol/L Tubos de ensaio Pipetas MÉTODO Prepare as soluções, complete o Quadro 1 e determine a concentração em osmolar para cada solução. Compare os valores obtidos para a concentração Osmolar de cada solução com a osmolaridade intracelular, indicando se cada solução é hiperosmóstica, iso-osmótica ou hipo-osmótica em relação às hemácias, e indique este resultado na coluna de OSMOTICIDADE QUADRO 1 TUBO SOLUÇÂO Volume (mL) Concentração Osmolar OSMOTICIDADE 1 água destilada, 6 2 NaCl 0,05 mol/L 6 3 NaCl 0,15 mol/L 6 4 NaCl 0,3 mol/L 6 5 Uréia 0,3 mol/L 6 6 NaCl 0,3 mol/L + Uréia 0,6mol/L 3 + 3 Acrescente uma gota de sangue a cada tubo. Observe a aparência da solução, se está Translúcida, indicando a hemólise ou se Turva, indicando a não hemólise. RESULTADOS Preencha a tabela a seguir avaliando se houve ou não hemólise. Avalie a tonicidade das diferentes soluções, utilizando os resultados experimentais e seus conhecimentos teóricos. Preencha a tabela e discuta os resultados encontrados. Solução HEMÓLISE: sim ou não? TONICIDADE hipotônica?- isotônica? hipertônica? 1 2 3 4 5 6
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