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3/17/14 1 CGATC TCGAT CGATC GATGA TACTA TATTA GCATG AGCGG GCATA TGCGA TGCTG CATCG ATTGA TCGCG ATCGT A GTCTA GCTAG CTAAT CGATG CGCGC TATAG TCGCG TATAT GACTA TCGAC TACAC GGCAT CAGTC GTTAC ATTAT AT ATGCG CATGA TCGAT CGATG CTACG TTAGC ATCGA TCGAT CGATG CGACT GACTG ATTAT GCTCG ATGCG GCGCG C GATGA GAGAT ATATC ATCTC GATAC TATGC ATGAG CATGC TCAGG ATCGA TGCTA CCGAT CTCGA TCGAT CGATG A TACTA TATTA GCATG AGCGG GCATA TGCGA TGCTG CATCG ATTGA TCGCG ATCGT AGTCT AGCTA GCTAA TCGAT G CGCGC TATAG TCGCG TATAT GACTA TCGAC TACAC GGCAT CAGTC GTTAC ATTAT ATATG CGCAT GATCG ATCGA TG CTACG TTAGC ATCGA TCGAT CGATG CGACT GACTG ATTAT GCTCG ATGCG GCGCG CGATG AGAGA TATAT CATCT C GATAC TATGC ATGAG CATGC TCAGG ATCCG ATCTC GATCG ATCGA TGATA CTATA TTAGC ATGAG CGGGC ATATG C GATGC TGCAT CGATT GATCG CGATC GTAGT CTAGC TAGCT AATCG ATGCG CGCTA TAGTC GCGTA TATGA CTATC GA CTACA CGGCA TCAGT CGTTA CATTA TATAT GCGCA TGATC GATCG ATGCT ACGTT AGCAT CGATC GATCG ATGCG AC TGACT GATTA TGCTC GATGC GGCGC GCGAT GAGAG ATATA TCATC TCGAT ACTAT GCATG AGCAT GCTCA GGATC C GATCT CGATC GATCG ATGAT ACTAT ATTAG CATGA GCGGG CATAT GCGAT GCTGC ATCGA TTGAT CGCGA TCGTA G TCTAG CTAGC TAATC GATGC GCGCT ATAGT CGCGT ATATG ACTAT CGACT ACACG GCATC AGTCG TTACA TTATA TA TGCGC ATGAT CGATC GATGC TACGT TAGCA TCGAT CGATC GATGC GACTG ACTGA TTATG CTCGA TGCGG CGCGC G ATGAG AGATA TATCA TCTCG ATACT ATGCA TGAGC ATGCT CAGGA TCCGA TCTCG ATCGA TCGAT GATAC TATAT TA GCATG AGCGG GCATA TGCGA TGCTG CATCG ATTGA TCGCG ATCGT AGTCT AGCTA GCTAA TCGAT GCGCG CTATA G TCGCG TATAT GACTA TCGAC TACAC GGCAT CAGTC GTTAC ATTAT ATATG CGCAT GATCG ATCGA TGCTA CGTTA GC ATCGA TCGAT CGATG CGACT GACTG ATTAT GCTCG ATGCG GCGCG CGATG AGAGA TATAT CATCT CGATA CTATG C ATGAG CATGC TCAGG ATCCG ATCTC GATCG ATCGA TGATA CTATA TTAGC ATGAG CGGGC ATATG CGATG CTGCA T CGATT GATCG CGATC GTAGT CTAGC TAGCT AATCG ATGCG CGCTA TAGTC GCGTA TATGA CTATC GACTA CACGG C ATCAG TCGTT ACATT ATATA TGCGC ATGAT CGATC GATGC TTAGT AGTAC TACGT TAGCA TCGAT CGATC GATGC GA Claudemir Rodrigues Dias Filho Perito Criminal ! Breve Histórico e Importância da Biologia Forense ! Entomologia Forense ! Genética Forense ! Hematologia e Sorologia Forenses ! Outros Métodos e Aplicações " Botânica e Palinologia Forense ! Perspectivas e o Futuro da Biologia Forense in fo rm aç ão informação in fo rm aç ão inform ação inform ação informação inf orm açã o in fo rm aç ão inform ação inform ação i nf or m aç ão inf orm açã o investigação inf orm açã o inform ação in fo rm aç ão in fo rm aç ão VERDADE! inform ação inform ação in fo rm aç ão in fo rm aç ão 3/17/14 2 in fo rm aç ão informação in fo rm aç ão inform ação inform ação informação inf orm açã o in fo rm aç ão inform ação inform ação in fo rm aç ão inf orm açã o inf orm açã o inform ação in fo rm aç ão in fo rm aç ão VERDADE! inform ação inform ação in fo rm aç ão in fo rm aç ão Informações testemunhais 1/2 investigação inf or m aç ão inform ação inf or m aç ão inform ação inform ação informação info rm açã o in fo rm aç ão inform ação inform ação inf or m aç ão inf orm açã o info rm açã o inform ação inf or m aç ão inf or m aç ão VERDADE! inform ação inform ação inf or m aç ão in fo rm aç ão Informações testemunhais Informações objetivas (científicas) investigação 3/17/14 3 in fo rm aç ão informação in fo rm aç ão inform ação inform ação inf orm açã o in fo rm aç ão inform ação inform ação i nf or m aç ão inf orm açã o inform ação in fo rm aç ão in fo rm aç ão VERDADE! inform ação inform ação i nf or m aç ão in fo rm aç ão Heptâmetro de Quintiliano Que? Quem? Quando? Porquê? Como? Onde? Com que meios? investigação in fo rm aç ão informação in fo rm aç ão inform ação inform ação inf orm açã o in fo rm aç ão inform ação inform ação i nf or m aç ão inf orm açã o inform ação in fo rm aç ão in fo rm aç ão VERDADE! inform ação inform ação i nf or m aç ão in fo rm aç ão Heptâmetro de Quintiliano investigação Método Científico Observação Hipotetização Teste de Hipótese Aceitação/Refutação … Conhecimento científico vítima su sp eit o local de crime 3/17/14 4 Método científico Αρχιμιδις (Arquimedes) Entomologia Forense (séc. XIII) Sung Tzu (1235) - China “Hsi yuan chi lu” (“The Washing Away of Wrongs”) Claudemir Rodrigues Dias Filho Perito Criminal 3/17/14 5 A entomologia é um campo de estudo vasto e amplo que se ocupa do entendimento da biologia dos insetos, de sua história natural a suas interações com outros organismos. Está entrelaçada com outras áreas de interesse biológico como ecologia das interações, biologia da polinização, dispersão primária e secundária de propágulos, parasitologia e outras. entomon (inseto) logos (estudo) entomologia = estudo dos inseto Conhecimento biológico … micologia genética zoologia botânica entomologia inseto? 3/17/14 6 Reino Animalia Porifera Cnidaria Platyhelminthes Aschelminthes Annelida Mollusca Arthropoda Echinodermata Chordata Arthropoda Trilobitomorpha Trilobitas Cheliceriformes Pycnogonida Chaelicerata Unirramia Miriapoda Hexapoda Entognatha Insecta Crustacea ! Sem metamorfose Desenvolvimento direto, jovem muito semelhante ao adulto (exceto pelo tamanho e maturidade sexual) ! Metamorfose incompleta Desenvolvimento com transformação parcial, jovem (ninfa) e adulto semelhantes, mas ninfa sem asas (desenvolvidas a partir de brotos alares) ! Metamorfose completa Desenvolvimento indireto, passando por uma larva, uma pupa e, finalmente, um adulto. Larva e adulto são completamente diferentes. 3/17/14 7 Metamorfose completa = desenvolvimento holometabólico Desenvolvimento indireto, passando por uma larva, uma pupa e um adulto. Larva e adulto são completamente diferentes. ! Pecilotérmicos Não possuem controle metabólico da temperatura corporal (varia com o ambiente) ! Corpo dividido em três partes Denominadas de cabeça, tórax e abdômen ! Três pares de patas Localizadas no tórax. Outro nome para a classe Insecta é Hexapoda Entomologia: estudo dos insetos Entomologia Forense: estudo dos insetos aplicado à justiça Ciências biológicas Ciênciasjurídicas Biologia Forense Entomologia Forense Forense: relativo ao foro judicial, à justiça 3/17/14 8 Lord & Stevesson (1986) E. F. Urbana – insetos em imóveis (brocas e cupins) E. F. de Produtos Armazenados ou Estocados – contaminação de produtos estocados E. F. Médico-Legal – área criminal (morte violenta, à esclarecer, IPM, maus-tratos) Lord & Stevesson (1986) E. F. Urbana – insetos em imóveis (brocas e cupins) Outros interesses? Médico? Veterinário? Saúde Pública? D er m at ob ia h om in is C oc hl io m yi a ho m in iv or ax P er ip la ne ta a m er ic an a 3/17/14 9 Lord & Stevesson (1986) E. F. De Produtos Armazenados ou Estocados – contaminação de produtos estocados Cadeia Produtiva do bem ou serviço como objeto da perícia Indústria de Alimentos: APPCC (Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle) Lord & Stevesson (1986) E. F. Urbana – insetos em imóveis (brocas e cupins) E. F. de Produtos Armazenados ou Estocados – contaminação de produtos estocados E. F. Médico-Legal – área criminal (morte violenta, à esclarecer, IPM, maus-tratos) Lord & Stevesson (1986) E. F. Ambiental ? 3/17/14 10 E. F. Médico-Legal E. F. Urbana E. F. Produtos Estocados insetos são o vestígio insetos são o problema E. F. Ambiental? insetos são indicadores ambientais ou o bem jurídico a ser preservado Lei no. 9605/98 (Lei de Crimes Ambientais) Art. 29. Matar, perseguir, caçar, apanhar, utilizar espécimes da fauna silvestre, nativos ou em rota migratória, sem a devida permissão, licença ou autorização da autoridade competente, ou em desacordo com a obtida: Pena - detenção de seis meses a um ano, e multa. § 3° São espécimes da fauna silvestre todos aqueles pertencentes às espécies nativas, migratórias e quaisquer outras, aquáticas ou terrestres, que tenham todo ou parte de seu ciclo de vida ocorrendo dentro dos limites do território brasileiro, ou águas jurisdicionais brasileiras. Lei no. 9605/98 (Lei de Crimes Ambientais) Art. 31. Introduzir espécime animal no País, sem parecer técnico oficial favorável e licença expedida por autoridade competente: Pena - detenção, de três meses a um ano, e multa. Insetos são introduzidos? São silvestres? 3/17/14 11 Prof. Dr. Warwick Kerr Apis mellifera scutellata 141 rainhas 51 sobreviveram Camacuã, SP (1956) 1970 1975 1980 Importação de pragas agrícolas Lei no. 9605/98 (Lei de Crimes Ambientais) Art. 61. Disseminar doença ou praga ou espécies que possam causar dano à agricultura, à pecuária, à fauna, à flora ou aos ecossistemas: Pena - reclusão, de um a quatro anos, e multa. Abelhas africanas? Pragas agrícolas? 3/17/14 12 Melanismo industrial (Briston betularia) Melanismo industrial (Briston betularia) 1956 Melanismo industrial (Briston betularia) 1996 3/17/14 13 Composição faunísBca pré-‐perturbação Composição faunísBca pós-‐perturbação Ectima thecla Família Brassolinae Memphis sp. Euptychoides castrensis Heliconius erato Forsterinaria quantius Dasyophthalma creusa Família Biblidinae 0,3km 0,5km 2,5km 4,0km Dauwe et al. (2004) Acumulo de metais pesados em larvas de lepidópteros Cons. secundários (predadores) Cons. terciários (predadores) Biomassa Biomagnificação (metais) Produtores (plantas) Cons. primários (herbívoros) 3/17/14 14 E. F. Médico-Legal E. F. Urbana E. F. Produtos Estocados insetos são o vestígio insetos são o problema E. F. Ambiental! insetos são indicadores ambientais ou o bem jurídico a ser preservado Lord & Stevesson (1986) – adapt. E. F. Urbana – insetos em imóveis (brocas e cupins) E. F. de Prod. Estoc. – contaminação de produtos estocados E. F. Ambiental – insetos como indicadores ou espécies protegidas E. F. Médico-Legal – área criminal ! Estimativa de IPM ! Local de morte e transporte PM ! Maus tratos e abandono de incapaz ! Crimes sexuais seguidos de morte ! Tóxicos e narcóticos 3/17/14 15 ! Comportamento reprodutivo de insetos ! Dieta das larvas • saprófagas • detritívoras • tecidos vivos • tecidos mortos 3/17/14 16 Relembrando: - Insetos são pecilotérmicos (não possuem controle metabólico da temperatura) Consequência: - O metabolismo de um inseto e influenciado pela temperatura do ambiente. -Seu desenvolvimento (larval) também! Por Grau-hora acumulado (GHA) te m pe ra tu ra tempo de desenvolvimento Grau-hora = temperatura x tempo temperatura em que a larva se desenvolveu período em que a larva permaneceu àquela temperatura Por Grau-hora acumulado (GHA) ou Grau-dia acumulado (GDA) Greenberg & Kunich (2002) 25°C (Calliphora vicina) Duração média de cada fase: Ovo = 14,4h Primeiro instar = 9,6h Segundo instar = 24h Terceiro instar = 158,4h 14,4 x 25 = 360 GHA 9,6 x 25 = 240 GHA 24 x 25 = 600 GHA 158,4 x 25 = 3960 GHA Grau-hora acumulado: 5160 GHA = 215 GDA Para chegar à próxima fase (pupa) + + + 3/17/14 17 Por Grau-hora acumulado (GHA) Exemplo: a) Corpo é encontrado as 11h da manhã do dia 23 de julho e espécimes entomológicos foram coletados as 12h do mesmo dia. b) A maioria das larvas (de Calliphora vicina) coletadas do corpo estavam entrando no terceiro instar. c) Os GHA necessários para chegar a esta fase é a soma dos GHA requeridos para completar cada fase anterior (ovo, primeiro instar e segundo instar), ou seja: (14,4 + 9,6 + 24) x 25 = 1200 GHA Greenberg & Kunich (2002) 25°C (Calliphora vicina) Duração média de cada fase: Ovo = 14,4h Primeiro instar = 9,6h Segundo instar = 24h Terceiro instar = 158,4h Por Grau-hora acumulado (GHA) Exemplo: d) Para estimar o IPM, observa-se o calendário de trás para frente considerando a temperatura média de cada dia desde a data e hora em que as larvas foram coletadas, calculando os GHA. e) As larvas estavam em 1200 GHA, logo se sabe que a colonização se deu antes do dia 20 e durante o dia 19. f) Para saber o horário da oviposição: 1200 – 1104 = 96 GHA 23 de julho (temp. 15oC) 12h x 15oC = 180 GHA 22 de julho (temp. 12oC) 24h x 12oC = 288 GHA 21 de julho (temp. 13oC) 24h x 13oC = 312 GHA 20 de julho (temp. 13,5oC) 24h x 13,5oC = 324 GHA 19 de julho (temp. 13oC) 24h x 13oC = 312 GHA GHA 180 468 780 1104 1416 Por Grau-hora acumulado (GHA) Exemplo: f) Para saber o horário da oviposição: 1200 – 1104 = 96 GHA 23 de julho (temp. 15oC) 12h x 15oC = 180 GHA 22 de julho (temp. 12oC) 24h x 12oC = 288 GHA 21 de julho (temp. 13oC) 24h x 13oC = 312 GHA 20 de julho (temp. 13,5oC) 24h x 13,5oC = 324 GHA 19 de julho (temp. 13oC) 24h x 13oC = 312 GHA 96 GHA = 96 oC.h 96 oC.h = 7,4 h 13oC time line dia 23 22 21 20 19 18 12h 16h30 GHA 180 468 780 1104 0h 0h 0h 0h 0h 0h 0h GHA 180 468 780 1104 1416 3/17/14 18 3 6 12 18 0 6 12 18 0 6 12 18 0 6 12 18 0 6 12 18 0 6 12 dia 20 dia 22 dia 23 dia 21 dia 19 horas te m p er at u ra (° C ) 6 9 12 15 18 2124 27 • identificação das espécies • identificação do estádio larval • estimativas abióticas • estimativa da idade dos imaturos • estimativa de IPM (mínimo) time line dia 23 22 21 20 19 18 12h 16h30 GHA 180 468 780 1104 0h 0h 0h 0h 0h 0h 0h 3/17/14 19 SYSTEMATICS, MORPHOLOGY AND PHYSIOLOGY The Value of PCR-RFLP Molecular Markers for the Differentiation of Immature Stages ofTwo Necrophagous Flies (Diptera: Calliphoridae) of Potential Forensic Importance. Neotropical Entomology 34(5):777-783 (2005) Fig. 1. Control region (CR) and COI amplification products of Hemilucilia segmentaria (Hsg) and Hemilucilia semidiaphana (Hsd). Column 1: 1kb DNA Ladder molecular size standard; columns 2-3: CR amplicons of Hsg and Hsd, respectively; columns 4-5: COI amplicons of Hsg and Hsd, respectively; column 6: ΦX174/Hae III molecular size standard. 3/17/14 20 Grande escala Média escala 3/17/14 21 Cochliomyia hominivorax idade estimada: 6,5 dias Lucilia sericata idade estimada: 2 dias 3/17/14 22 • técnicas moleculares: • Repogle et al. 1994 Análise molecular de piolhos pubianos Dieta: sangue + células de escamação Esperma sobre a superfície cutânea DNA do estuprador • técnicas moleculares: 3/17/14 23 ! Origem ! Detecção em cadáveres ! Erro na estimativa de IPM 3/17/14 24 Beyer et al. (1980) -corpo em fase seca (esqueletizado) -análise de larvas de Cochliomyia macellaria por CG -presença de fenobarbital modificações no ciclo biológico dos artrópodes Goff et al. (1989) Cocaína: acelera o metabolismo de larvas de mosca Campobasso et al. (2001) Arsênico: retarda o metabolismo de larvas de mosca 3/17/14 25 Lesões post mortem causadas por Solenopsis invicta 1 min 26 h 48 h 72 h 3/17/14 26 (mm) (mm) MUNIÇÃO DIÂMETRO (mm) COMPRIMENTO (mm) .22” 5,5 11,8 - 12,0 .22” curto 5,5 8,9 - 8,8 6,35 mm 6,4 - 6,5 12,0 .32” curto 7,8 13,3 .32” 7,8 - 7,9 14,1 - 14,2 .320” 7,1 - 7,3 12,9 - 13,4 7,65 mm 7,7 - 7,8 11,9 - 12,0 .38” 8,9 - 9,0 18,1 - 18,2 .38” semi,ponta Pb 8,9 16,1 .380 AUTO 9,0 11,0 - 11,2 .380” 8,6 - 8,8 13,8 - 14,4 .357 9,0 18,1 - 18,2 9mm 8,8 - 8,9 14,0 - 15,9 ? ? Claudemir Rodrigues Dias Filho Perito Criminal 3/17/14 27 in fo rm aç ão informação in fo rm aç ão inform ação inform ação inf orm açã o in fo rm aç ão inform ação inform ação i nf or m aç ão inf orm açã o inform ação in fo rm aç ão in fo rm aç ão VERDADE! inform ação inform ação i nf or m aç ão in fo rm aç ão Heptâmetro de Quintiliano investigação Que? Fato típico (crime) Que? vestígio evidência Todo e qualquer sinal, marca, objeto potencialmente relacionado ao crime ou presente em um local de crime. Vestígio que, após avaliações de cunho objetivo, mostrou vinculação direta e inequívoca com o evento delituoso. análise 3/17/14 28 Sangue? 3. Princípio da interpretação. “Dois objetos podem ser indistinguíveis, mas nunca idênticos” ! Schönbein (1863) " hemoglobina possui atividade de peroxidase Christian Schönbein (1799-1868) H-O-O-H H-O-H O=O + peroxidase hemoglobina Ka stle -M eye r H 2 O 2 Nick Stokes CSI: Crime Scene Investigation 3/17/14 29 Ad ler H 2 O 2 Nick Stokes CSI: Crime Scene Investigation benzidina forma reduzida (incolor) benzidina forma oxidada (azul) IUPAC: 5-Amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione luz 3/17/14 30 ! Kastle-Meyer (fenolftaleína) " Sensibilidade: 1 : 1.000.000 ! Adler (benzidina) " Sensibilidade: 1 : 2.000.000 ! Luminol " Sensibilidade: 1 : 1.000.000.000 ! Kastle-Meyer ! Adler ! Luminol Positivo para = sangue ? falsos positivos? qualquer substância capaz de oxidar o reagente Alimentos: nabo raiz forte polpa de banana rabanete fresco alho-poró feijão verde gengibre cenoura laranja (luminol) milho doce (luminol) Produtos: alvejante água sanitária verniz alquídico tintas a base de óleo sulfato de manganês sulfato de cobre sulfato de ferro permanganato de potássio Entre outros... 3/17/14 31 ! Kastle-Meyer (fenolftaleína) ! Adler (benzidina) ! Luminol Humano? ✓ ✓ ✓ Mateu Josep Bonaventura Orfila ( 1787-1853) Tal mancha é sangue? Sangue humano? Qual o tipo de vestígio? Se biológico, de que organismo? Se animal, é humano? Se humano, apresenta material genético? Se afirmativo, é possível estabelecer a origem? Sangue, sêmen, urina, saliva, folha, suco de fruta, asa de inseto, larvas… 3/17/14 32 ! Teste Indireto de Coombs " Presença de IgG humana ! Teste Imunocromatográfico É sangue? Sim. É humano? Vacher-Sulton (Teste indireto de Coombs) 3/17/14 33 3/17/14 34 Feca-Cult – Sensibilidade (Longo et al. 2011) Falso positivo? in fo rm aç ão informação in fo rm aç ão inform ação inform ação inf orm açã o in fo rm aç ão inform ação inform ação i nf or m aç ão inf orm açã o inform ação in fo rm aç ão in fo rm aç ão VERDADE! inform ação inform ação i nf or m aç ão in fo rm aç ão Heptâmetro de Quintiliano investigação Hematologia Reconstrutora! 3/17/14 35 ! Averiguação da altura de queda do sangue ! Averiguação de direcionalidade, ângulo de impacto e ponto de origem ! Verificação da dinâmica e de instrumentos relacionados 3/17/14 36 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 0 50 100 150 200 250 300 d iâ m et ro d a m an ch a (m m ) altura de queda (cm) 3/17/14 37 cabeça calda 3/17/14 38 comprimento (C) la rg ur a (L ) θ = arc sen L C 2002 3/17/14 39 2008 Dexter Morgan “Blood never lies” local su sp ei to vítim a Sangue humano ? 3/17/14 40 CGATC TCGAT CGATC GATGA TACTA TATTA GCATG AGCGG GCATA TGCGA TGCTG CATCG ATTGA TCGCG ATCGT A GTCTA GCTAG CTAAT CGATG CGCGC TATAG TCGCG TATAT GACTA TCGAC TACAC GGCAT CAGTC GTTAC ATTAT AT ATGCG CATGA TCGAT CGATG CTACG TTAGC ATCGA TCGAT CGATG CGACT GACTG ATTAT GCTCG ATGCG GCGCG C GATGA GAGAT ATATC ATCTC GATAC TATGC ATGAG CATGC TCAGG ATCGA TGCTA CCGAT CTCGA TCGAT CGATG A TACTA TATTA GCATG AGCGG GCATA TGCGA TGCTG CATCG ATTGA TCGCG ATCGT AGTCT AGCTA GCTAA TCGAT G CGCGC TATAG TCGCG TATAT GACTA TCGAC TACAC GGCAT CAGTC GTTAC ATTAT ATATG CGCAT GATCG ATCGA TG CTACG TTAGC ATCGA TCGAT CGATG CGACT GACTG ATTAT GCTCG ATGCG GCGCG CGATG AGAGA TATAT CATCT C GATAC TATGC ATGAG CATGC TCAGG ATCCG ATCTC GATCG ATCGA TGATA CTATA TTAGC ATGAG CGGGC ATATG C GATGC TGCAT CGATT GATCG CGATC GTAGT CTAGC TAGCT AATCG ATGCG CGCTA TAGTC GCGTA TATGA CTATC GA CTACA CGGCA TCAGT CGTTA CATTA TATAT GCGCA TGATCGATCG ATGCT ACGTT AGCAT CGATC GATCG ATGCG AC TGACT GATTA TGCTC GATGC GGCGC GCGAT GAGAG ATATA TCATC TCGAT ACTAT GCATG AGCAT GCTCA GGATC C GATCT CGATC GATCG ATGAT ACTAT ATTAG CATGA GCGGG CATAT GCGAT GCTGC ATCGA TTGAT CGCGA TCGTA G TCTAG CTAGC TAATC GATGC GCGCT ATAGT CGCGT ATATG ACTAT CGACT ACACG GCATC AGTCG TTACA TTATA TA TGCGC ATGAT CGATC GATGC TACGT TAGCA TCGAT CGATC GATGC GACTG ACTGA TTATG CTCGA TGCGG CGCGC G ATGAG AGATA TATCA TCTCG ATACT ATGCA TGAGC ATGCT CAGGA TCCGA TCTCG ATCGA TCGAT GATAC TATAT TA GCATG AGCGG GCATA TGCGA TGCTG CATCG ATTGA TCGCG ATCGT AGTCT AGCTA GCTAA TCGAT GCGCG CTATA G TCGCG TATAT GACTA TCGAC TACAC GGCAT CAGTC GTTAC ATTAT ATATG CGCAT GATCG ATCGA TGCTA CGTTA GC ATCGA TCGAT CGATG CGACT GACTG ATTAT GCTCG ATGCG GCGCG CGATG AGAGA TATAT CATCT CGATA CTATG C ATGAG CATGC TCAGG ATCCG ATCTC GATCG ATCGA TGATA CTATA TTAGC ATGAG CGGGC ATATG CGATG CTGCA T CGATT GATCG CGATC GTAGT CTAGC TAGCT AATCG ATGCG CGCTA TAGTC GCGTA TATGA CTATC GACTA CACGG C ATCAG TCGTT ACATT ATATA TGCGC ATGAT CGATC GATGC TTAGT AGTAC TACGT TAGCA TCGAT CGATC GATGC GA Claudemir Rodrigues Dias Filho Perito Criminal local su sp ei to vítim a Que? local su sp ei to vítim a 3/17/14 41 Quem? local su sp ei to vítim a Onde? local su sp ei to vítim a DNA? Que? Quem? Onde? Genética? local su sp ei to vítim a 3/17/14 42 Identificar Individualizar Comparar … Concluir vestígio local Tem relação com o fato? não sim descarte evidência prova material análise “Propriedade de cada ser, concreto ou abstrato, animado ou inanimado, se ele próprio e não outro” Eraldo Rabello “Ato ou conjunto de atos através dos quais chegamos à verificação, à constatação iniludível e à definitiva fundamentação concreta da prova da identidade de um ser ou de uma coisa” Eraldo Rabello “Toda identificação, sob o ponto de vista prático, é um trabalho de verificação e análise comparativa de características objetivamente assinaláveis, previamente admitidas como constantes, inconfundíveis e próprias do ser ou da coisa a identificar” Eraldo Rabello Qualquer característica objetivamente assinalável é válida para uma identificação? 3/17/14 43 local su sp ei to vítim a vestígio (amostra desconhecida) amostra conhecida VS (análise comparativa) Compatíveis? não sim descarte evidência local su sp ei to vítim a Compatíveis evidência local su sp ei to vítim a Incompatíveis local su sp ei to vítim a vestígio biológico (amostra desconhecida) amostra conhecida (biológica) VS (análise comparativa) ANÁLISE BIOLÓGICA Estabelecer se o vestígio e a amostra conhecida tiveram a mesma origem 3/17/14 44 Qual o tipo de vestígio? Se biológico, de que organismo? Se animal, é humano? Se humano, apresenta material genético? Se afirmativo, é possível estabelecer a origem? !" !" !" Karl Landsteiner (1868–1943, Nobel 1930) Sistema ABO • sangue de certos indivíduos coagulam de outros • tal característica não muda ao longo da vida • variação na população humana (polimorfismo) A B AB O Anti-A Anti-B 3/17/14 45 Leone Lattes (1887–1954) • Aplicação da tipagem em sistema ABO às questões propostas por Orfila: • Tipagem de manchas de sangue seco Adultério? Marido: tipo O Esposa: tipo A Hipóteses do marido: - O sangue era dele, ou - O sangue era da esposa, ou - O sangue era resultado de uma passada pelo açougue Mancha de sangue: tipo O Homicídio Vítima: tipo A - O sangue era da vítima? - O sangue era do suspeito? Suspeito: tipo O Mancha de sangue: tipo O 3/17/14 46 Cathleen Crowell Webb Tipo B Gary Dotson Tipo B Tipo B Perito: o fornecedor só pode ser do tipo B Crowell: “Foi ele!” Seis anos depois… Crowell-Webb: “Não fui estuprada.” agressor vítima mistura B B B O B B população humana Sist. ABO: O Sist. Rh: + Sist. MN: MN Sist. Kidd: A • Muita variação (polimorfismos) encontrada nas proteínas do sangue. • Polimorfismos são mais comuns do que se imaginava (isoenzimas). • Análise dos polimorfismos aplicado às ciências forenses! 3/17/14 47 Prob( )? 50x 50x 50% Prob( )? 60x 40x 40% Prob( e ) ? 50% x 40% = 20% 3/17/14 48 O 45% A 42% B 10% AB 3% A Sistema ABO: Frequências na população brasileira Fator Rh: + Sistema MN: M Rh+ 81% Rh-‐ 19% M 30% MN 50% N 20% (42%) (81%) (30%) Sistema ABO: Fator Rh: Sistema MN: O 45% A 42% B 10% AB 3% A,+,M Rh+ 81% Rh-‐ 19% M 30% MN 50% N 20% 42% x 81% x 30% = 10,21% Frequências na população brasileira Sistema ABO: Fator Rh: Sistema MN: A,+,M 42% x 81% x 30% = 10,21% Suspeito 1 Suspeito 2 Suspeito 3 Suspeito 4 ABO O A AB A + + - + M MN N M Rh MN Prob? 10,21% Aprox. 1 em 10 3/17/14 49 Prob (A) 42% (1 em 2,4) Ideal: 1 em 10000000000… 1 em 10 1.100.000 possíveis População de São Paulo: 11.000.000 habitantes 42% x 81% = 34,02% (1 em 2,9) 42% x 81% x 30% = 10,21% (1 em 9,8) Prob (A,+) Prob (A,+,M) Prob (A, +, M, ...) 42% x 81% x 30% x … = 0,0000…1% (1 em 1000000…) Genética de populações Frequências alélicas na população e o Equilíbrio de Hardy-Weinberg O 45% A 42% B 10% AB 3% Rh+ 81% Rh-‐ 19% M 30% MN 50% N 20% Frequências na população brasileira Sistema ABO: Fator Rh: Sistema MN: (p + q)2 = p2 + 2pq+ q2 Freq. alelo 1 Freq. alelo 2 organismo diplóide 3/17/14 50 PROBLEMAS: degradação de proteínas em manchas secas expressão tecido-dependente (Deoxyribonucleic Acid ou Ácido Desoxirribonucleico) DNA Bases nitrogenadas: Adenina (A) Timina (T) Citosina (C) Guanina(G) 3/17/14 51 D N A 3/17/14 52 Francis Crick (1916-2004) James Watson (1928- ) local su sp ei to vítim a Alec Jeffreys, 1987 Colin Pitchfork Lynda Man, 1983 Dawn Ashworth, 1986 Sêmen Tipo A 10% da população masculina Nos Eucariotos em geral: • sequências de DNA não-repetitivo: regiões codificantes (genes) • sequências de DNA moderadamente repetitivo e altamente repetitivo: regiões não-codificantes o Função ainda não esclarecida o Constituem a maior parte do genoma 3/17/14 53 CGATCTCGATCGATCGATGATACTATATTAGCATGAGCGGGCATATGCGATGCTGCATCGA TTGATCGCGATCGTAGTCTAGCTAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATC GACTACACGGCATCAGTCGTTACATTATATATGCGCATGATCGATCGATGCTACGTTAGCAT CGATCGATCGATGCGACTGACTGATTATGCTCGATGCGGCGCGCGATGAGAGATATATCAT CTCGATACTATGCATGAGCATGCTCAGGATCGATGCTACCGATCTCGATCGATCGATGATACTATATTAGCATGAGCGGGCATATGCGATGCTGCATCGATTGATCGCGATCGTAGTCTAGC TAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATCGACTACACGGCATCAGTCGTT ACATTATATATGCGCATGATCGATCGATGCTACGTTAGCATCGATCGATCGATGCGACTGAC TGATTATGCTCGATGCGGCGCGCGATGAGAGATATATCATCTCGATACTATGCATGAGCAT GCTCAGGATCCGATCTCGATCGATCGATGATACTATATTAGCATGAGCGGGCATATGCGAT GCTGCATCGATTGATCGCGATCGTAGTCTAGCTAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGT ATATGACTATCGACTACACGGCATCAGTCGTTACATTATATATGCGCATGATCGATCGATGC TACGTTAGCATCGATCGATCGATGCGACTGACTGATTATGCTCGATGCGGCGCGCGATGA GAGATATATCATCTCGATACTATGCATGAGCATGCTCAGGATCCGATCTCGATCGATCGATG ATACTATATTAGCATGAGCGGGCATATGCGATGCTGCATCGATTGATCGCGATCGTAGTCTA GCTAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATCGACTACACGGCATCAGTCG TTACATTATATATGCGCATGATCGATCGATGCTACGTTAGCATCGATCGATCGATGCGACTG ACTGATTATGCTCGATGCGGCGCGCGATGAGAGATATATCATCTCGATACTATGCATGAGC ATGCTCAGGATCCGATCTCGATCGATCGATGATACTATATTAGCATGAGCGGGCATATGCG ATGCTGCATCGATTGATCGCGATCGTAGTCTAGCTAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGC GTATATGACTATCGACTACACGGCATCAGTCGTTACATTATATATGCGCATGATCGATCGAT GCTACGTTAGCATCGATCGATCGATGCGACTGACTGATTATGCTCGATGCGGCGCGCGAT GAGAGATATATCATCTCGATACTATGCATGAGCATGCTCAGGATCCGATCTCGATCGATCG ATGATACTATATTAGCATGAGCGGGCATATGCGATGCTGCATCGATTGATCGCGATCGTAGT CTAGCTAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATCGACTACACGGCATCAG TCGTTACATTATGATGAGAGATATATCATCTCGATACTATGCATGAGCATGCTCAGGATCCC CGATCTCGATCGATCGATGATACTATATTAGCATGAGCGGGCATATGCGATGCTGCATCGA TTGATCGCGATCGTAGTCTAGCTAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATC GACTACACGGCATCAGTCGTTACATTATATATGCTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGAGCTAATCGA TGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATCGACTACACGGCATCAGTCGTTACATTATATATG CGATCTCGATCGATCGATGATACTATATTAGCATGAGCGGGCATATGCGATGCTGCATCGA TTGATCGCGATCGTAGTCTAGCTAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATC GACTACACGGCATCAGTCGTTACATTATATATGCTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGAGCTAATCGA TGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATCGACTACACGGCATCAGTCGTTACATTATATATG 3/17/14 54 VNTR’S Variable Number of Tandem Repeats Minissatélites: Repetições de sequências básicas maiores que 8 pares de bases Long Tandem Repeats LTR’s Microssatélites: Repetições de sequências básicas compostas por 2 a 8 pares de bases Short Tandem Repeats STR’s Polimorfismos de comprimento Polimorfismos de comprimento 3/17/14 55 TCGTAGTCTAGCTAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGTATATGAGCTAGCTAATCGAT GCGCGCTATAGTCTATCGACTACACGGCATCAGTCGTTACATTATATATGCTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAG GTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGG TTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGT TAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTT AGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTAGGTTA GGTTAGGAGCTAATCGATGCGCGCTATAGTCGCGTATATGACTATCGACTACACGGCATC AGTCGTTACATTATATATGCGCATGATCGATCGATGCTACGTTAATTCGCATCGATCGATCG Kary Mullis (1944- ) 3/17/14 56 Prob (A) 42% (1 em 2,4) Ideal: 1 em 10000000000… 1 em 10 1.100.000 possíveis População de São Paulo: 11.000.000 habitantes 42% x 81% = 34,02% (1 em 2,9) 42% x 81% x 30% = 10,21% (1 em 9,8) Prob (A,+) Prob (A,+,M) Prob (A, +, M, ...) 42% x 81% x 30% x … = 0,0000…1% (1 em 1000000…) 3/17/14 57 P2 AGAT AGAT AGAT AGAT AGAT AGAT AGAT P1 P2 região conservada região conservada 7 repetições = alelo 7 = 134 pares de bases P1 região conservada região conservada AGAT AGAT AGAT AGAT AGAT AGAT AGAT AGAT 8 repetições = alelo 8 = 138 (134+4) pares de bases 9 repetições = alelo 9 = 142 (138+4) pares de bases 10 repetições = alelo 10 = 146 (142+4) pares de bases 11 repetições = alelo 11 = 150 (146+4) pares de bases 1 em 1 bilhão à 1 em 1 trilhão local su sp ei to vítim a A prob. de outro indivíduo, além do suspeito, ter esse mesmo perfil genético é de 1 em 1 trilhão. 3/17/14 58 local su sp ei to vítim a vestígio biológico (amostra desconhecida) amostra conhecida (biológica) VS (análise comparativa) ANÁLISE BIOLÓGICA Estabelecer se o vestígio e a amostra conhecidativeram a mesma origem Locus Genótipo (vestígio) Genótipo (suspeito) Frequência (hipotética) D8S1179 14/14 14/14 Freq(14)2 = 0,08 D21S11 30/30 30/30 Freq(30)2 = 0,02 D7S820 11/13 11/13 2*Freq(11)*Freq(13) = 0,12 CSF1PO 10/12 10/12 2*Freq(10)*Freq(12) = 0,05 D3S1358 14/17 14/17 2*Freq(14)*Freq(17) = 0,11 TH01 7/9.3 7/9.3 2*Freq(7)*Freq(9.3) = 0,04 D13S317 12/13 12/13 2*Freq(12)*Freq(13) = 0,06 D16S539 9/11 9/11 2*Freq(9)*Freq(11) = 0,02 D2S1338 19/20 19/20 2*Freq(19)*Freq(20) = 0,01 D19S433 14.2/16.2 14.2/16.2 2*Freq(14.2)*Freq(16.2) = 0,02 vWA 16/17 16/17 2*Freq(16)*Freq(17) = 0,07 TPOX 8/9 8/9 2*Freq(8)*Freq(9) = 0,04 D18S51 15/18 15/18 2*Freq(15)*Freq(18) = 0,09 D5S818 11/12 11/12 2*Freq(11)*Freq(12) = 0,01 FGA 19/19 19/19 Freq(19)2 = 0,08 Amelogenina XY (masc.) XY (masc.) TOTAL: 2,04374016*10-21 Ou 1 em 4,89299*1020 indivíduos!!! vítima suspeito local !!! 3/17/14 59 ! Identificação animal ! Identificação vegetal ! outras • identificação específica • identificação individual (restrito) v1 v2 v3 v4 v5 v6 s1 s2 s3 vit sp1 sp2 sp3 sp4 sp3 sp5 (PCR-RFLP, SSR, VNTR...) local su sp ei to vítim a Que? Quem? Onde? • A coleta compulsória de sangue ou qualquer outro material biológico para realização de Exame de DNA (nas investigações de paternidade e nas ações penais) tem suscitado debates jurídicos • Em matéria penal, são garantias constitucionais do acusado favoráveis a não doação: – direito à intimidade e à integridade física – presunção de inocência – inadmissibilidade de provas contrárias a ele, obtidas por meios ilícitos – direito ao silêncio, como interpretação do princípio “nemo tenetur se detegere” (ninguém está obrigado a fazer prova contra si) 3/17/14 60 • A coleta forçada ou involuntária de material para Exame de DNA é uma das formas de obtenção ilícita da prova, além de ferir outras garantias constitucionais • Resolução SSP nº 194/99 determina que a coleta de amostras de sangue, destinadas para exame de DNA, sejam efetuadas mediante um Termo de Doação Voluntária e esclarecimento de que o material, se doado, será utilizado unicamente para exames forenses relacionados com a ocorrência, visando preservar seus direitos de pessoa humana e evitar imputações criminosas indevidas B an co d e D N A (C O D IS -B R ) Claudemir Rodrigues Dias Filho Perito Criminal 3/17/14 61 ! Análise de resíduos vegetais ! Análise de grãos de pólen ! Análise de resíduos vegetais ! Análise de grãos de pólen • identificação “de plantas que se constituam em matéria-prima para a preparação de drogas” • Cannabis sativa 3/17/14 62 ! Análise de resíduos vegetais ! Análise de grãos de pólen • identificação “de plantas que se constituam em matéria-prima para a preparação de drogas” • Cannabis sativa • Eritroxilum coca ! Análise de resíduos vegetais ! Análise de grãos de pólen • identificação “de plantas que se constituam em matéria-prima para a preparação de drogas” • Cannabis sativa • Eritroxilum coca • Banisteriopsis caapi e Psycotria viridis ! Análise de resíduos vegetais ! Análise de grãos de pólen • coleta, análise e interpretação de resíduos vegetais presentes em locais de crime local vítima 3/17/14 63 ! Análise de resíduos vegetais ! Análise de grãos de pólen • coleta, análise e interpretação de resíduos vegetais presentes em locais de crime suspeito vítima local ! Análise de resíduos vegetais ! Análise de grãos de pólen ! Análise de resíduos vegetais ! Análise de grãos de pólen Szibor et al, 1998 • quando ocorreu a morte? • qual o local de morte? • houve transporte do corpo? 3/17/14 64 ! Avaliação de tempo mínimo de inumação 6 15 12 15 16 8 7 5 10 6 11 14 13 26 13 35 41 25 29 42 37 43 37 84 76 102 100 160 93 94 127 137 158 176 241 167 161 186 170 159 163 386 417 403 460 637 705 788 849 860 943 1092 1040 1325 1194 1349 1429 1621 1774 2042 2072 1683 0 300 600 900 1200 1500 1800 2100 19 50 19 51 19 52 19 53 19 54 19 55 19 56 19 57 19 58 19 59 19 60 19 61 19 62 19 63 19 64 19 65 19 66 19 67 19 68 19 69 19 70 19 71 19 72 19 73 19 74 19 75 19 76 19 77 19 78 19 79 19 80 19 81 19 82 19 83 19 84 19 85 19 86 19 87 19 88 19 89 19 90 19 91 19 92 19 93 19 94 19 95 19 96 19 97 19 98 19 99 20 00 20 01 20 02 20 03 20 04 20 05 20 06 20 07 20 08 20 09 20 10 20 11 Claudemir Rodrigues Dias Filho Perito Criminal ! Avaliação de: " idade de uma mancha de sangue " idade de quem produziu a mancha de sangue " falsidade de amostras de DNA ! Alteração de fauna e microorganismos de solo 3/17/14 65 ! Avaliação de: " idade de uma mancha de sangue " idade de quem produziu a mancha de sangue " falsidade de amostras de DNA ! Alteração de fauna e microorganismos de solo ! Avaliação de: " idade de uma mancha de sangue " idade de quem produziu a mancha de sangue " falsidade de amostras de DNA ! Alteração de fauna e microorganismos de solo Linfócitos T Estimativa etária Involução do timo Diminuição da produção de linfócitos T 3/17/14 66 (Zubakov et at, 2010) idade timo T-cell sjTRECs (Zubakov et at, 2010) C. I. 9 5% ! Avaliação de: " idade de uma mancha de sangue " idade de quem produziu a mancha de sangue " falsidade de amostras de DNA ! Alteração de fauna e microorganismos de solo ??? 3/17/14 67 ! Avaliação de: " idade de uma mancha de sangue " idade de quem produziu a mancha de sangue " falsidade de amostras de DNA ! Alteração de fauna e microorganismos de solo Pesquisa Fapesp 193 (março de 2012) 3/17/14 68 41 47 39 85 77 11 3 11 0 16 9 99 97 13 0 14 2 16 2 18 5 24 8 17 3 16 3 19 4 17 5 18 5 17 5 43 0 45 4 43 8 50 1 69 3 77 9 85 1 95 2 92 9 1 06 1 11 64 11 53 15 60 14 48 15 50 16 98 19 95 22 13 26 04 25 98 26 62 12 02 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 19 70 19 72 19 74 19 76 19 78 19 80 19 82 19 84 19 86 19 88 19 90 19 92 19 94 19 96 19 98 20 00 20 02 20 04 20 06 20 08 20 10 20 12 n ú m er o d e p u b li ca çõ es ano Web of Science, out/2012 “forensic”OR “forensics”OR “criminalistics” 10 76 7 30 76 24 82 14 59 12 57 10 92 10 34 90 5 89 8 85 8 72 0 62 9 59 3 56 4 55 1 46 2 43 4 38 9 34 1 33 9 30 8 30 4 30 1 27 2 26 9 256 24 6 24 1 20 9 18 7 18 6 17 0 14 7 13 7 13 6 13 2 11 6 11 5 11 4 11 0 10 2 0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 U SA EN G LA N D G ER M A N Y A U ST R A LI A C A N A D A JA PA N IT A LY PE O PL ES R C H IN A FR A N C E SP A IN SW IT Z ER LA N D SW ED EN SC O TL A N D IN D IA N ET H ER LA N D S TU R K EY A U ST R IA BR A Z IL D EN M A R K N EW Z EA LA N D BE LG IU M FI N LA N D PO R TU G A L IS R A EL PO LA N D SO U TH K O R EA SO U TH A FR IC A N O R W A Y TA IW A N G R EE C E W A LE S FE D R EP G ER C R O A TI A R U SS IA R O M A N IA IR EL A N D A R G EN TI N A H U N G A R Y C Z EC H R EP U BL IC M A LA Y SI A N O R TH IR EL A N D n ú m er o d e p u b li ca çõ es país de origem da publicação Web of Science, out/2012 “forensic”OR “forensics”OR “criminalistics” 18° 11 2 2 2 5 3 2 5 17 28 18 18 29 39 41 36 26 47 67 46 97 102 80 87 108 130 138 167 197 217 174 0 50 100 150 200 250 <1 98 4 19 84 19 85 19 86 19 87 19 88 19 89 19 90 19 91 19 92 19 93 19 94 19 95 19 96 19 97 19 98 19 99 20 00 20 01 20 02 20 03 20 04 20 05 20 06 20 07 20 08 20 09 20 10 20 11 20 12 20 13 n ú m er o d e p u b li ca çõ es ano Web of Science, out/2013 "forensic entomology" OR "forensic botany" OR "forensic biology" OR "forensic palynology" OR "forensic microbiology" OR "forensic genetics" OR "forensic zoology" OR "forensic DNA" OR "forensic biochemistry" 3/17/14 69 560 191 170 150 128 120 98 90 72 65 64 61 58 57 52 42 40 33 31 31 30 29 29 25 24 23 22 22 20 18 16 14 14 13 10 145 0 100 200 300 400 500 600 E. U .A . A le m an ha Es pa nh a In gl at er ra Br as il A us tr ál ia It ál ia C hi na Po rt ug al Fr an ça C an ad á D in am ar ca N ov a Z el ân di a Á us tr ia H ol an da Po lô ni a Ja pã o N or ue ga Bé lg ic a Ta ilâ nd ia A rg en tin a Es có ci a Á fr ic a do S ul Su íç a C ol ôm bi a Su éc ia M al ás ia Ta iw an C or éi a do S ul Fi nl ân di a Ín di a C ro ác ia Tu rq ui a Is ra el Ve ne zu el a ou tr os n ú m er o d e p u b li ca çõ es país de origem da publicação Web of Science, out/2013 "forensic entomology" OR "forensic botany" OR "forensic biology" OR "forensic palynology" OR "forensic microbiology" OR "forensic genetics" OR "forensic zoology" OR "forensic DNA" OR "forensic biochemistry" 5° Web of Science, out/2013 "forensic entomology" OR "forensic botany" OR "forensic biology" OR "forensic palynology" OR "forensic microbiology" OR "forensic genetics" OR "forensic zoology" OR "forensic DNA" OR "forensic biochemistry" 1 2 1 1 2 1 3 1 5 8 11 15 20 14 14 16 13 0 5 10 15 20 25 1996 1997 1998 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 n ú m er o d e ar ti go s p u b li ca d os p or b ra si le ir os ano da publicação
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