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Estafilococos Universidade Federal do Piauí – UFPI Campus Ministro Reis Veloso - CMRV Biomedicina: Microbiologia Médica Prof.º Gustavo P. Ferreira Cocos Gram positivos Staphylococcus Streptococcus Enterococcus Características gerais dos estafilococos Cocos Gram positivos com 1 - 1,5 µm; Imóveis; Não esporulantes; Anaeróbios facultativos; Pouco exigentes; Crescimento de 15 - 45ºC; Catalase positivo (diferencial); Hemolíticos Cocos jovens são fortemente Gram (+) com o envelhecimento tornam-se Gram (-); Comensais da pele e membranas mucosas (TR/TUG) e transitórios no TGI; Doenças: cutâneas, intoxicação e sistêmicas Patógeno oportunista – infecções piogênicas; Colônias em meio sólido são: esféricas, lisas, elevadas e brilhantes / Formação de várias tonalidades de pigmentos; S. aureus - são acinzentadas/ amarelo dourado intenso. S.epidermidis - coloração de cinza a branca. Características gerais dos estafilococos Espécies associadas ao homem Mais de 30 espécies: pele e mucosas de humanos (16sp.) - S. aureus - S. epidermidis - S. saprophyticus - S. lugdunensis - S. warneri - S. haemolyticus - S. hominis - S. capitis - S. intermedius S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus Cápsula (algumas cepas): fator de virulência – 11 sorotipos Inibe fagocitose Aderência (cateteres, materiais sintéticos). Peptideoglicano: produção de IL-1 (febre) atração de leucócitos(abscessos) proteína A(S.aureus): liga-se a Fc de IgGs Ácidos Tecóicos: Aderência e fixação - fibronectina (FNBP) Coagulase ou fator de aglutinação: agregação Estrutura e Patogenia Coagulase - ligada à parede/ forma livre Proteção à fagócitos Catalase - diferenciação dos Streptococcus; Hialuronidase - disseminação e propagação. Estafiloquinase - dissolução de fibrina. Lipases - invasão do tec. cutâneo e subcutâneo (furúnculo/carbunc). Penicilases/β -lactamases – transferência plasmidial Ubíquos – pop. possui coagulase negativa Encontrados na orofaringe, TGI, urogenital e pele 15 a 50% dos adultos sadios normais – S. aureus nasofaringe. Fatores de virulência - Enzimas Toxinas Alfa citolítica (eritrócitos, plaquetas, hepatócitos). Poros na membrana Toxinas Beta esfingomielinase C (degradação esfingomielina hidrolisa fosfolip. memb.).Tóxica eritrócitos, fibroblastos, MØ Toxinas Delta citolítica/eritrócitos - ação “surfactante” Leucocidina destrói leucócitos (Leucotóxica/sem ativ. hemolítica) Toxina gama + Leucocidina 6 diferentes toxinas citolíticas – lise de neutrófilos e MØ Fatores de virulência - Exotoxinas Fatores de virulência - Exotoxinas Toxina esfoliativa (ETA-termoest./ETB-termolábil) síndrome da pele escaldada estafilocócica (SSSS) e descamação generalizada. Toxina -1 da Síndrome do Choque Tóxico (TSST1) – Superantígeno – febre, exantema e descamação, comprometimento dos sistemas orgânicos; Enterotoxinas (A-I) Termoestáveis (100°C - 30’). Não há destruição cozimento Atuam sobre o SNC – vômitos e náuseas estimulam o peristaltismo intestinal Produção de toxina Doença Colonização e Proliferação - Infecção cutâneas piogênicas Carbúnculos/Furúnculos e abscessos localizados (grandes nód.dolorosos). Foliculite (infecção dos folículos pilosos).Terçol - localizado nas pálpebras Impetigo (mancha vermelha – vesícula nos pés, formando crostas) Manifestações Clínicas Infecção em pacientes pós cirurgia ou traumas - Bacteremia, endocardite, ostemielite e artrites graves). - Pneumonias/empiemia (pacientes doenças pulmonares). - Síndrome da pele escaldada estafilocóccica - SSSS (dermatite esfoliativa, doença de Ritter) Formação de vesículas e bolhas c/ descamação. Observada em crianças / adultos têm Ac. - Síndrome do choque tóxico Mulheres menstruadas: uso de tampões - Febre, hipotensão, vômitos, exantema(descamação da pele) e comprometimento multisistêmico . SNC,TGI,hepático Manifestações Clínicas Furúnculo e Carbúnculo Impetigo - Intoxicação alimentar – toxina termoestável Ex.: Carnes, presuntos (embutidos), massas, bolos, cremes, sorvetes. Diarréia, dores abdominais, vômitos. Imunidade não duradoura Manipulador infecção por estafilococos Metade é assintomático Manifestações Clínicas - Amostras: depende do processo infeccioso Ex.: Swab, sangue, LCR, alimentos suspeitos - Microscopia: Gram estrutura típica, nem sempre útil. Na amostra: vínico, pares, cadeias Cultura: Ágar Sangue (hemólise) Ágar + 7,5% NaCl Ágar Manitol - Teste da Catalase - Teste da Coagulase - Teste Sorológico Ac contra ác. tecóico - não muito sensível Diagnóstico Catalase positivos Diferenciação com os estreptococos Dividem-se em dois grupos principais: • Coagulase-positivos (CPS) - S. aureus todas as espécies; S. intermedius – cães e gatos e S. hyicus - suínos; • Coagulase-negativos (CNS) - S. epidermidis e outros; Os CPS são mais patogênicos que os CNS. Classificação Identificação dos estafilococos PROVA DA CATALASE; COAGULASE LIGADA e LIVRE TESTE da DNase PROVA DA NOVOBIOCINA BIOLOGIA MOLECULAR Isolamento e identificação Isolamento e identificação Isolamento e identificação Isolamento e identificação Isolamento e identificação - Crescimento em manitol Trealose ou manitol Isolamento e identificação Isolamento e identificação - Prova da Novobiocina Staphylococcus saprophyticus
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