Fase Analítica em Bioquímica Clínica

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Fase Analítica
Bioquímica Clínica
Profª. Carolina M. Wallauer
carolinawallauer@gmail.com
Fase Analítica
• Destinada à manipulação da amostra
• Processos de calibração de equipamentos e de técnicas
• Quantificação do parâmetro em estudo
• Uso e o controle de reagentes, padrões e controles
É onde ocorre 13,3% dos erros laboratoriais
O DESEMPENHO DA FASE ANALÍTICA DEPENDE DE DIVERSOS
FATORES:
• Preparação das amostras
• Diluição, fator de diluição, perdas
• Amostras
• Posição no equipamento ou estante de leitura, amostras
hemolisadas, mal centrifugadas, lipêmicas, expostas à luz,
temperatura de armazenagem
• Padrões, Controles e Calibradores
• Reconstituição, perda de liofilizado, homogeinização após
descongelamento, temperatura de armazenagem, cálculos de
Média e DP, concentração por evaporação, programação incorreta
dos protocolos...
FASE ANALÍTICA
• Calibração
• Preparo inadequado dos calibradores, ajustes incorretos dos
equipamentos
• Metodologia
• Desvios de protocolo analítico (filtro de leitura, volume de amostra,
volume de reagente, diluições obrigatórias), desconsiderar limites de
detecção e linearidade, diluições muito elevadas ou insuficientes,
desconsiderar diluições, unidades de medidas (urinas de 24 hr).
• Reagentes
• Temp. de armazenagem, validade, preparo
(proporção/estabilidade), concentração (vedação), solventes
(qualidade da água), estabilidade , exposição à luz.
FASE ANALÍTICA
•Equipamentos e Instrumentos e operadores
• Manutenção inadequada, tubulações rompidas, com ar ou com
rachaduras, ajustes inadequados comp. de onda, ajuste do zero,
temp. de leitura, leitura instável, carreamento, volume de leitura
incorreto, interferências físicas temperatura da sala, campos
eletromagnéticos (ruídos na rede), tripidações...
• Pipetas não calibradas, pipetas ou ponteiras molhadas ou com
pontas danificadas, ponteiras mal adaptadas, ajuste incorreto do
menisco, contaminação por limpeza inadequada ou por produtos de
limpeza inadequados, uso incorreto das pipetas automáticas.
• Calibração incorreta de equipamentos, vazamentos, obstrução ou
nas linhas de ar dos reagentes
• Erros operacionais técnicos: operadores
FASE ANALÍTICA
Processamento das amostras e reagentes
1. Manipulação e conservação das amostras
adequados.
2. Controle de reagentes, padrões, temperatura e
equipamentos.
3. Limpeza das vidrarias e equipamentos conforme
legislação.
4. Pipetagem dos reagentes e das amostras,
homogeneização adequada.
Manipulação da amostra FASE ANALÍTICA
Análise da amostra
Metodologias utilizadas em bioquímica clínica
estão baseadas na medida quantitativa da absorção da luz 
pelas soluções. 
• Tais medidas são efetuadas por instrumentos
fotocolorímetros ou espectrofotômetros.
FASE ANALÍTICA
Análise espectrofotométrica
• Os componentes desconhecidos de uma solução podem ser
identificados por seus espectros característicos ao ultravioleta,
visível, ou infravermelho.
• Quando um feixe de luz monocromática atravessa uma solução
com moléculas absorventes, parte da luz é absorvida pela
solução e o restante é transmitido.
• A absorção de luz depende basicamente da concentração das
moléculas absorventes e da espessura da solução – caminho
óptico
• Metodologia (UV- Visível):
Condições da reação: tempo de incubação, seleção do
comprimento de onda.
Análise espectrofotométrica
REAÇÃO = TEMPO x TEMPERATURA
Mais utilizada!!
Fase Analítica (CQ)
▪ Cálculo para obtenção dos resultados
Concentração do analito na amostra 
Ex:
CP = 100mg/dL
Abs P = 1,4
CA = ??mg/dL
Abs A = 0,7
CA(?) = CP/Abs P x Abs A
Fator
DEFINIÇÃO: Sistema dinâmico e complexo, sistema esse que envolve
– direta ou indiretamente – todos os setores da empresa, com o
intuito de melhorar e assegurar economicamente a qualidade do
produto final (Paladini, 1995) .
• A qualidade está apoiada no tripé: recursos humanos, recursos
físicos e recursos tecnológicos.
Controle de Qualidade (CQ)
FASE ANALÍTICA
Controle de Qualidade Analítico (CQA)
Serve para fornecer, tanto ao analista quanto aos 
clientes, critérios objetivos para avaliar o 
desempenho laboratorial.
O objetivo principal é ter uma menor 
variabilidade dos resultados obtidos .
PRECISÃO E EXATIDÃO
FASE ANALÍTICA
1.Controle de qualidade interno (CQI).
Intra-laboratorial
- Soro controle
2. Controle de qualidade externo (CQE).
Inter-laboratorial
- PNCQ(SBAC) www.pncq.com.br
- PELM (SBPC/ML) www.control-lab.com.br
FASE ANALÍTICA
Fase Pós-Analítica
Fase Pós-Analítica
• Transcrição dos resultados
• Redação dos laudos pelo Analista Clínico, Médico Patologista ou
Biomédico.
• Análise de consistência dos resultados
• Liberação do laudo
• Armazenamento dos resultados
• Armazenamento das amostras (soroteca)
Fase Pós-Analítica (Laudo)
O laudo deve conter os seguintes registros:
1. Identificação clara, completa e precisa do paciente,
estabelecimento e responsável técnico
2. Data da coleta ou recebimento das amostras e data da emissão
do laudo.
3. Nome do material biológico analisado, exame realizado e
método utilizado.
4. Valores de referência normais e respectivas unidades.
Fase Pós-Analítica
5. Todo laudo deve ser assinado pelo Resp. técnico e ou
profissional legalmente habilitado.
6. Os laudos podem ser entregues diretamente ao paciente, ou
ainda por fax, comunicação on line, telefone e indiretamente
quando autorizado pelo paciente.
7. Os Responsáveis Técnicos pelo Laboratório Clínico deverão
garantir a privacidade dos cidadãos através da implantação de
medidas eficazes que confiram caráter confidencial a
quaisquer resultados de exames e testes laboratoriais
Fase Pós-Analítica
• A comunicação dos resultados críticos e também as tentativas de
contato mal sucedidas com o médico, devem ser registradas.
• O laboratório pode optar por incorporar os dados provenientes
do laudo do laboratório de apoio ao seu próprio. Contudo,
nenhuma informação clinicamente relevante, enviada pelo
laboratório de apoio, pode ser omitida ou modificada
inapropriadamente.
Fonte: RDC 302-2005
Fase Pós-Analítica (back up)
• A documentação armazenada apenas em meio eletrônico é
polêmica, deve ser vista com cautela e, quando praticada,
deve ser cercada de procedimentos que garantam a
segurança da informação.
Fase Pós-Analítica
• Interpretação dos resultados
1. Verificar se os resultados são normais ou anormais
2. Verificar se os resultados são compatíveis com o estado do 
paciente
3. Verificar se ocorreu alguma mudança significativa nos 
resultados quando comparados aos dados prévios
Fase Pós-Analítica
Fases 
laboratoriais
Pré-Analítica Analítica Pós-Analítica
POPs RDC 302/2005. Regulamento Técnico para 
Funcionamento de Laboratórios Clínicos. 
Fase Pós-Analítica
EXAME
É o conjunto de procedimentos pré-analíticos, 
analíticos e pós-analíticos, realizados nos 
pacientes e/ou em suas amostras e aplicados à 
saúde humana.
Erros em Laboratórios
•Fase pré-analítica –68,2% 
•Fase analítica –13,3%
•Fase pós-analítica –18,5%
Plebani & Carraro, ClinChem, 43(8), 1448-1451, 
1997.
Laboratório Clínico
Além dos procedimentos para as fases pré, analítica e pós –
analítica, o laboratório deve possuir também:
➢ Treinamento de pessoal
➢ Prevenção e extinção de incêndio
➢ Segurança do trabalho
➢ Descarte do material (lixo biológico, perfurocortante, químico)
Laboratório Clínico
➢ Profissional capaz de tomar decisões;
➢ Comunicador; líder; Gerente; Atualizado permanentemente; 
Educador.
Laboratório Clínico
O BIOMÉDICO ou BIOQUÍMICO deve procurar
estar sempre disponível e preparadopara
prestar informações e auxiliar na interpretação
dos laudos
Considerações finais
• Os volumes de amostra utilizados são cada vez menores
• A importância dos resultados laboratoriais nas decisões
clínicas é cada vez maior
• O exame de laboratório, apesar das similaridades, não pode
ser considerado como um processo fabril
• Cada material, cada amostra e cada teste têm
particularidades que exigem cuidado, atenção e
conhecimentos específicos.
Cada diagnóstico, uma vida!!
Questões
1. Diferencie soro controle de padrão:
2. Descreva as três fases que compõe o processo
laboratorial:
3. Quais das fases que geram mais erros? Porque?
4. Cite três exemplos de erros que podem ocorrer na
nas três fases do processo laboratorial e quais as
possíveis soluções para os mesmos.
5. Qual a diferença entre variações intra-individuais e
inter-individuais? Dê exemplos.
REFERÊNCIAS
➢ RDC 302: 2005 - Edição Comentada
Compreendendo o Regulamento.
➢www.controllab.com.br - Regras Múltiplas e
“Regras de Westgard”: O que são? Multirule and
“Westgard Rules”: What are They? James O.
Westgard.