9 10 Golgi Gil mod Renato Mod Gil UFRJ

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Transporte de vesículas e complexo de Golgi
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Figure 12-1 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Compartimentos intracelulares e direcionamento de proteínas para estes
compartimentos
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Figure 12-6 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Direcionamento é específico
Biderecional
Ativo
Seletivo
Poros
\nucleo com dupla membrana
Transporte transmemebranas
Translocadores
unidirecional
Transporte vesicular
Bidirecional
Feito em vesículas 
transpostadpas
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Figure 13-21 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Dentro do retículo as proteínas que serão 
secretadas são verificadas -Controle de qualidade
Chaperonas- seguram dentro do lúmen ptn mal dobradas 
Ex: linfócitos B na produção de anticorpos
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As mal enoveladas são mandadas para o citoplasma
Ubiquitinadas e 
Degradadas no proteassoma
Açúcares reaproveitados
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Figure 13-2 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Compartimento doador
Compartimento 
receptor
brotamento
fusão
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Figure 13-3 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Caminho endocítico
Caminho biossintetico e secretório
Endossoma secundário
Endossoma primário
Via endocítica
Via secretória
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Figure 13-25a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Primeira organela a ser vista em microscopia depois do núcleo
Complexo de Golgi
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Figure 13-25b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Figure 13-5 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Vesículas tem marcadores específicos
Endossoma 
secundário
Endossoma 
primário
clatrina
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Caminho endocítico e caminho biossintético
Ptns residentes ao ER voltam pq
Possuem tb um sinal KDEL
Reconhecido por um receptor
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Figure 13-23b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Sai encapada- “capa” reaproveitada
Volta de ptns reticulares ex: Bip-chaperona
Vesiculas “encapadas”
Direcionamento para o golgi
Transporte retrógrado
Retorna ao ER o que a ele pertence
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Movimento de vesículas: microscopia de fluorescência
 observação de proteínas, estruturas ou moléculas fluorescentes.
 localização de estruturas
 movimentos de proteínas ou vesículas
 estudos de colocalização de diferentes moléculas
(proteína-proteína; proteína DNA ou proteína RNA)
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Espectro de fluorescência
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Imunofluorescência: localização de estruturas
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Filmes de movimento de vesículas
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Figure 13-4 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Diferentes tipos de vesículas-determinam o destino
Golgi e MP
ER
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Figure 13-6 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
vesiculas de clatrina
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Figure 13-7a, b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Clatrina-cadeia pesada
 e cadeia leve-
Triskeleton
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Figure 13-7c, d Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Capaz de formar uma estrutura semelhante a uma cesta
Triskeleton forma complexa rede de hexágonos e pentágonos
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Receptor seleciona e concentra carga
Adaptina-liga ao receptor e a clatrina se liga a ela
Dinamina estrangula a vesicula
Vesicula se separa 
Clatrina e adaptina são reaproveitadas
Formação de vesículas encapadas por clatrina
Organização do 
revestimento e seleção 
da carga a ser transportada
Formação da 
vesícula
desencapamento
Receptor 
de carga
Proteína 
adaptadora
Vesícula 
encapada
COMO seleciona a proteína a ser carregada nas vesículas?
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Figure 13-12a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Dinamina e
 proteínas 
associadas
Dinamina é ancorada na membrana através de ligação com fosfatidil-inositol (fosfolídes de membrana)
Estrangulamento ou constrição da vesícula e brotamento
DINAMIMA
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Figure 13-12b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Mostrar filmes clatrinas
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Como vesículas reconhecem para onde ir?
Proteínas Rab direcionam as vesículas para as membranas (GTPases)
Efetor Rab: ancora vesículas
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Diferentes Rabs para vesículas provenientes de diferentes compartimentos
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Formação de domínios Rab nas membranas das vesículas
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Figure 13-18 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
V-SNARE e T-SNARE (mais de 20 tipos diferentes)
Ancoragem entre vesícula doadora e receptora
Quando se encontram se embaralham
Direcionamento das vesículas: múltiplos alvos
Bacterias produzem toxinas que destroem SNARES
Botulismo e tetano- impedem a união das vesiculas com 
neurotransmissores –bloqueiam a transmissão nervosa
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Figure 13-17 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
As SNARES e se enrolam e aproximam as duas membrasnas a serem fusionadas 
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Figure 13-19a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Page 766 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Figure 13-24b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Não se sabe como o Golgi mantém esta compartimentalização
Composição de proteínas específicas de cada compartimento
Cis Golgi Trans Golgi
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Figure 13-25a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Primeira organela a ser vista em microscopia depois do núcleo
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Figure 13-25b Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Figure 13-55 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Figure 13-26a Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Figure 13-28 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Manose
+ acetilglucosamina
+galactose
+ácido siálico
Sulfatação de tirosinas 
ecarboidratos
 remoção manose
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Figure 13-27 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Figure 13-31 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Só ilustração de reações que acontecem no Golgi, não é para decorar
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Figure 13-30 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Figure 13-29 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Produção de proteoglicanos
Golgi-glicosil transferases
Glicosilação O
Matriz extracelular, 
muco
Secreção de muco
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Page 779 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
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Figure 13-36 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Nucleases
Proteases
Glicosidases
Lipases
Fosfatases
Sulfatases
fosfolipases
No lisossomo 
pH mantido abaixo
do pH do citosol
Pela bomba de prótons
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Figure 13-39 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Vacúolo de células vegetais
Acúmulo de nutrientes (sementes)
 Enzimas hidrolíticas
Controla a turgência da célula
Controla pH (bombas de H+)
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Figure 13-42 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Vias que também envolvem lisossomos:
Endocitose- fagocitose e pinocitose
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Figure 13-41 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Autofagia
Ainda não é bem compreendido
Reaproveitamento de organelas e reciclagem
Ex: Mit-dura10 dias; Diminuição do retículo liso depois de detox
Origem destas membranas????
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Figure 13-44 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Manose 6-fosfato (M6P)
N-acetil glicosamina fosfotransferase
Receptor M6P na vesícula do Golgi destinada ao lisossoma (clatrina)
Vai para o endossoma primário pH diferente- dissocia
Receptor volta para o Golgi vazio
Hidrolase fica no endossoma primário
Direcionamento de Proteínas para os lisossomas
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Figure 13-44 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Direcionamento de Proteínas para os lisossomas
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Doença de Hurlers– não há formação de M6P
Hidrolase não são direcionadaspara lisossomo
Acúmulo de “coisas” não digeridas no lisossomo
I-Cell- as hidrolases são secretadas no sangue e não vão para lisossomoEm células então detectam-se corpúsculos densos- lisossomos cheios
Porém em hepatócitos destes pacientes-lissosmos OK-outra via de sinalização para entrega de hidrolases para o lisossomo
Problemas nas funções do lissossomo
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Figure 13-64 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Separação
de cargas
1- Sinalização para lisossomos
Sinalização para 
Vesículas de secreção
3-Secreção
constitutiva
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