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IQB201 – Bioquímica Básica I Tradução Joab Trajano Silva Instituto de Química/UFRJ Dogma Central da Biologia Molecular A tradução usa o código genético 5’ – GGTCACGTATCGCGTA - 3’ [Fita com Sentido] 3’ – CCAGTGCATAGCGCAT - 5’ [Fita Molde] 5’ – GGUCACGUAUCGCGUA - 3’ [RNA] TRANSCRIÇÃO A tradução usa o código genético O código genético O código genético Atores Envolvidos na Síntese Protéica - Ribossoma Atores Envolvidos na Síntese Protéica - Ribossoma Estrutura e forma do ribossoma 70S de E.coli. A subunidade ribossomal maior 50S (vermelha) e a subunidade ribossomal menor 30S (azul) são apresentadas com uma resolução de 200 Å (20 nm). Na subunidade 50S, os rRNA 23S (vermelho escuro) e 5S (laranja avermelhado) e as proteínas ribossomais (rosa) estão destacatas. Na subunidade 30S, o rRNA 13S rRNA (azul escuro) e as proteínas ribossomais (azul claro) são destacadas. Atores Envolvidos na Síntese Protéica - Ribossoma Atores Envolvidos na Síntese Protéica - Ribossoma Estrutura do ribossoma. Os rRNA estão representados em cinza e as proteínas em dourado. Atores Envolvidos na Síntese Protéica - Ribossoma Aminoacil tRNAs ligados aos sítios A e P do ribossoma. Atores Envolvidos na Síntese Protéica - Ribossoma Atores Envolvidos na Síntese Protéica - Ribossoma Atores Envolvidos na Síntese Protéica - rRNA Atores Envolvidos na Síntese Protéica - tRNA Estrutura Geral tRNA de Ala Bases Modificadas no tRNA As bases são criadas pós-transcricionalmente co o propósito de permitir pareamentos de bases promíscuos: inosina na posição “wobble” pode parear com U, C ou A no codon. Também pode desempenhar função estrutural. Ativação dos tRNAs por aminoacil tRNA sintetases Visão Geral do Processo de Traduação em Procarionte A Sequencia de Shine-dalgarno são sítios de ligação dos ribossomas procariontes Em procariontes, uma sequencia específica no mRNA próxima ao códon AUG, chamada sequencia de Shine-Delgarno , é reconhecida pelo complexo de iniciação que consiste de um Met amino-acil tRNA, fatores de iniciação e a subunidade menor do ribossoma Início da Traduação em Procarionte A hidrólise de GTP por IF2 promove a dissociação dos IFs e a ligação da subunidade maior do ribossoma. Início da Traduação em Procarionte A primeira etapa é o reconhecimento do Cap 5’ por eIF4F, o qual é formado pela proteínas eIF4E, eIF4G eeIF4A. eIF4E se lica ao Cap A região N-terminal de eIF4G liga eIF4E e o C-terminal liga eIF4A A subunidade 40S se liga a eIF4G por meio de eIF3 Iniciação dependente de CAP em eucariontes O complexo de iniciação é formado no Cap com a subunidade ribossomal 40S e outros fatores de iniciação. O complexo 40S varre a região 5’ não traduzida do mRNA em busca do codon AUG. A hidrólise de GTP por eIF2 induzida pro eIF5 promove a liberação dos fatores de iniciação. A subunidade 60S se une ao complexo e o ribossoma 80S inicia a tradução da ORF. Iniciação dependente de CAP em eucariontes Iniciação Alongamento Há um túnel através da subunidade maior que permite a cadeia peptídica crescente passar para fora do ribossoma A formação da ligação peptídica é catalisada pelo rRNA da subunidade maior Possible mechanistic pathways for aminolysis of the ribosomal P-site peptidyl-tRNA ester bond by the A-site amino acid where the role of a putative rRNA base (B) is indicated. Término Término
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