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IMUNOLOGIA CLÍNICA PROFº MS. ANA LÚCIA HANEMANN Diluições – Titulações Diluição • Quantidade de uma substância que é adicionada a outra substância; • SOLUTO + SOLVENTE • Problemas em relação na manipulação deste método? • Uma diluição deve significar o volume de concentrado no volume total da solução final. CONCENTRAÇÃO DAS SOLUÇÕES I. Alteração da concentração de uma solução Diluição T H E N E X T /C ID Diluição T H E N E X T /C ID Mais concentrada Mais diluída Diluição • Faça uma diluição 1 para 10 de soro em salina. • Faça uma diluição 1 em 10 de soro em salina. • Faça uma diluição 1 para 10 de soro com salina. • Faça uma diluição 1/10 de soro com salina. • Faça uma diluição 1:10 de soro usando salina. • Faça uma diluição de 1 parte de soro e 9 partes de salina. • Faça uma diluição de 1 parte de soro para 9 partes de salina. Diluição D= V soluto J V soluto + V solvente 1 parte de soro + 9 partes de salina 10 partes de solução final Diluição • Ex. – Dilua 3 ml de soro com 25 ml de salina 3 ml de soro +25ml de salina 28 ml de solução final Resultado – 3 em 28 ou 1:9,3 Razão – proporção: 3:28 assim como 1 está para X Diluição • Ex. – 5 ml de soro é diluído para 25 ml com salina. Qual é a diluição de soro? Qual é a razão de soro para a salina? X = 25 - 5 X = 20 ml de salina Resultado 5 para 20 ou 1 para 4 SALINA? Cálculos envolvendo uma diluição • Ex. – Faça 250 ml de uma diluição 1 para 10 de soro em salina. 1 parte de soro = X ml de soro 10 partes totais de uma solução 250 ml de solução total Resultado x = 25 ml SORO? Salina? Diluições seriadas • Ex. – Faça a seguintes diluições de soro em salina - 1/1, 1/2 e 1/4, 1/8. Todas as diluições após a primeira sejam iguais; Uma diluição 1/1 é diluída em salina. Esta solução é diluída para 1 /2 e então diluída 1 /4. Diluição seriada Como calcular o fator da diluição I. Qual o fator da diluição se você adicionar 0,1mL de uma amostra a 9,9mL de diluente? Alíquota + Diluente = Volume Final: II.O fator da diluição é o volume final dividido pelo volume da alíquota: 0,1 mL + 9,9 mL = 10 mL 10 mL = 100 ml 0,1 mL 1/100 Atividade em sala Atividade em sala 1 – Faça 250 mL de uma diluição 1:10 de soro em salina. 2 - Faça 45 mL de uma diluição 1:15 de soro em salina. 3 - Faça 33 mL de uma diluição 1:22 de soro em salina. 4 - Faça 4 mL de uma diluição 1:8 de soro em salina. 5 - Faça 7,5 mL de uma diluição 1:10 de soro em salina. 6- Determine a quantidade de soro em 40 ml de uma diluição 1:5 de soro em salina. Atividade em sala 7 – Quais diluições representam as misturas abaixo a) 0,3 mL de soro sanguíneo com 4,2 mL de solução fisiológica. b) 0,5 mL de soro sanguíneo com 3 mL de solução fisiológica. c) 0,2 mL de soro sanguíneo com 6,2 mL de solução fisiológica. 8- Qual o fator de diluição quando se adiciona 2mL de alíquota em 8 mL de diluente? Atividade em sala 9 – Em uma série de 8 tubos, coloque 0,9 mL de solução fisiológica no 1º tubo e 0,5 mL de solução fisiológica nos tubos restantes. Adicione 0,1 mL de soro ao 1º tubo, misture e coloque 0,5 mL dessa solução no tubo subsequente e repita o processo até o último tubo. Despreze o último 0,5 mL. Para cada tubo adicione 0,5 mL de antígeno. A partir disso responda: a) Qual é a diluição de cada tubo antes de adicionar o antígeno. b) Qual a quantidade de soro presente nos tubos após a transferência. Atividade em sala 10 – Em uma série de 6 tubos, coloque 0,9 mL de solução fisiológica no 1º tubo e 0,5 mL de solução fisiológica nos tubos restantes. Adicione 0,1 mL de soro ao 1º tubo, misture e coloque 0,5 mL dessa solução no tubo subsequente e repita o processo até o último tubo. Despreze o último 0,5 mL. Para cada tubo adicione 0,5 mL de células sanguíneas de carneiro. A partir disso responda: a) Qual é a diluição de cada tubo antes de adicionar o antígeno. b) Qual a quantidade de soro presente nos tubos após a transferência. c) Qual é a diluição de substância após a adição das células sanguíneas de carneiro. Atividade em sala 11 – Use os seguintes métodos para fazer uma diluição seriada do soro do paciente: a) Coloque 11 tubos em uma estante; b) Pipete 1,5 mL de salina no primeiro tubo; c) Pipete 1 mL de salina em cada um dos tubos restantes; d) Adicione 0,5 mL de soro teste no primeiro tubo e transfira 1,0 mL do primeiro tubo aos tubos restantes; Descreva seus resultados: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Diluição do tubo Diluição da substância
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