Artigo sobre o eletroestimulador prévio 1

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Instituto de Biologia
Departamento de Ciências Fisiológicas
Laboratório de Toxinologia
Aluno: CLEYDSON LUIZ DE OLIVEIRA – 08/26847
Extração de dois tipos de venenos de Rhopalurus agamemnom, por 
eletroestimulação variável.
Introdução
O veneno de escorpiões é um composto polipeptídico que apresenta propriedades com 
grande potencial terapêutico, sendo portanto, amplamente estudado por institutos de pesquisas 
biológicas. Uma etapa importante no estudo com toxinas do veneno do escorpião é a de extração 
desse veneno. A extração por meio de eletroestimulação é, dentre as formas de extração de venenos 
de escorpiões, a que tem se mostrado mais eficaz e com o melhoramento dos aparelhos 
eletroestimuladores, vem se mostrando mais eficientes, como será descrito neste artigo. Uma 
demonstração da eficiência na extração por eletroestimulação em Rhopalurus agamemnon é 
descrita neste artigo e constitui a possibilidade de extração de dois tipos de veneno: o pré-veneno, 
de carácter mais aquoso, rico em sais e pobre em peptídeos e o veneno, de carácter mais leitoso, 
pobre em sais e rico em peptídeos. A condição em que se pode extrair estes diferentes tipos de 
venenos se dá pela variação da intensidade da eletroestimulação, que tem características peculiares 
e serão exploradas a seguir. 
Materiais e métodos
Rhopalurus agamemnon é um escorpião da família Buthidae, que pode chegar a medir cerca 
de 10 a 11cm de comprimento, típico do Brasil e amplamente distribuído nas regiões onde há 
predomínio de vegetação de cerrado. Para o experimento, foram utilizados 10 Rhopalurus 
agamemnon adultos, coletados na região se Serra da Mesa (GO). O veneno é produzido por um par 
de glândulas presentes no telson e envoltas por musculatura. A eletroestimulação atua na contração 
de toda a musculatura do escorpião, inclusive daquela que reveste as glândulas, que por sua vez 
aumenta a pressão nestas glândulas, liberando o veneno através do ferrão. O aparelho de 
eletroestimulação, cujo o esquema elétrico é apresentado na figura 1, consiste de um oscilador de 
onda quadrada, baseado no Circuito Integrado NE 555, na configuração astável, com a frequência 
definida por f = 1,44 / [(R1+2R2) C ], fixada em 40Hz e circuito inversor, formado por Q1 (BD 
139) e trafo de 4,5 + 4,5 VAC x 200mA. A lista de componentes e seus respectivos valores 
estimados é apresentada na tabela 1. O sinal de saída, apresentado nas figuras 2 e 3, assemelha-se a 
um potencial de ação de estímulo fisiológico, com largura de pulso de 300us, ciclo de 40Hz e 
amplitude ajustável, de 0 a 200 V pico a pico (Vpp). A corrente máxima de saída do sinal é de 
130uA. Para a extração, o escorpião é coletado de seu recipiente, com uma pinça; É molhado em 
água potável, para que tenha uma melhor condutividade e acomodado em uma tela metálica, que 
está conectada ao eletroestimulaodor por um dos eletrodos; Um tubo de eppendorf é posicionado 
junto ao aguilhão, para extração da amostra de veneno; O eletrochoque ocorre quando há o contato 
do eletrodo com a base do telson.
Resultados
A aplicação do eletroestímulo em Rhopalurus agamemnon, com amplitude entre 60 e 70 
Vpp, produz um estímulo capaz de provocar a extração de uma amostra de veneno 
caracteristicamente aquosa, apresentando uma alta concentração de sais e baixa concentração de 
peptídeos, tal amostra é o pré-veneno. Com o aumento da amplitude do eletroestimulador, temos a 
partir de 100 Vpp, uma estimulação capaz de provocar a ejeção de um veneno caracteristicamente 
mais leitoso, pobre em sais e rico em peptídeos, sendo este, o veneno propriamente dito. Em 
animais maiores, estes valores podem ser aumentados, devendo ser aplicada a eletroestimulação 
com amplitude gradativamente aumentada, até o ponto de extração do pré-veneno, porém, não 
continuamente, ou seja, aplica-se o eletrochoque com determinado valor, não ocorrendo a ejeção, 
retira-se o estímulo, altera-se o valor da amplitude e inicia-se um novo estímulo.
Discussão
A extração por eletroestimulação demonstrou ser não apenas eficaz na extração de pre-
veneno e veneno, como também eficiente, pois explora a fisiologia do animal de forma não invasiva 
e no limiar de sua contração tetânica, o qual foi verificado após inúmeros testes, com eletrochoques 
em diferentes frequências, amplitudes e potências do pulso. Alguns aparelhos utilizados em 
extração de venenos de escorpiões apresentam baixa eficiência, pois, após o eletrochoque, o animal 
entra num estado de dormência e imobilidade severas, condições estas, que não ocorreram em 
nenhum dos ensaios realizados em laboratório com o eletroestimulador apresentado neste artigo. 
Conclusão
O eletroestimulador apresentado neste artigo demonstrou ser um excelente instrumento para 
extração de pré-veneno e veneno de escorpiões Rhopalurus agamemnon, bem como de outras 
espécies de escorpiões, de forma eficaz e eficiente. O eletroestimulador é dotado de bateria interna 
recarregável, permitindo a sua utilização em trabalhos de campo.
Bibliografia
Apêndices
Tabela 1
Componentes, valores e custo estimado.
Componente Valor Custo (R$) $US (1,780)
IC 1
Transistor 1
Diode 1
Diode 2
Rectifier Bridge
Capacitor 1
Capacitor 2
Capacitor 3
Resistor 1
Resistor 2
Resistor 3
Resistor 4
Potenciometer
Transformer 1
Transformer 2
Switch S1
Switch S2
Box
Electric cable
Jack
Electrodes
Borns
Knob
Clip para bateria
rechargeable Battery 
NE 555
BD 139
1N 5062
BYV 27
W10M - 2A
1000uF – Eletrolític 
33nF – Poliéster metalizado
470uF – Eletrolític 
1 MΩ x ⅛ W – 5% 
100 KΩ x ⅛ W – 5% 
47 KΩ x ⅛ W – 5% 
1 KΩ x ⅛ W – 5% 
5 KΩ – LINEAR 
4,5 + 4,5 V x 200mA – 110/220V
4,5 + 4,5 V x 200mA – 110/220V
switch H-H 110/220V
switch On/Off with LED
box PB 112
Electric cable
Jack J2 ST
BBC – PP
BBC – B 
Knob ST
Clip para Bateria 9V
rechargeable Battery 9Vx300mA
1,00
1,00
0,75
1,00
2,00
1,00
0,50
0,50
0,20
0,20
0,20
0,20
2,50
10,00
10,00
2,00
4,00
8,70
4,00
2,00
8,50
5,60
1,00
1,00
32,00
0,56
0,56
0,42
0,56
1,12
0,56
0,28
0,28
0,15
0,15
0,15
0,15
1,40
5,60
5,60
1,12
2,24
4,88
2,24
1,12
4,77
3,14
0,56
0,56
17,97
Total: 99,85 56,14