Coleta, transporte e processamento de amostras clínicas no Laboratório de Microbiologia

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10/02/2006
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COLETA, TRANSPORTE E PROCESSAMENTO 
DE AMOSTRAS CLÍNICAS NO LABORATÓRIO DE 
MICROBIOLOGIA
Microbiologia Básica
Prof. Msc. Fernanda Siqueira
ANVISA Módulo III
1. Primeira Consideração:
EXISTE TEMPO MÁXIMO PERMITIDO ENTRE A COLETA E 
O PROCESSAMENTO INICIAL DE MATERIAIS COLETADOS 
PARA EXAMES MICROBIOLÓGICOS?
O tempo máximo permitido entre a coleta e o
processamento de um determinado material
clínico é um fator importante para um resultado
confiável do exame.
A temperatura de transporte é outro fator
importante.
A higiene e/ou anti-sepsia (álcool e iodo) do local
da coleta também interfere no resultado do exame.
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2. Refrigeração de materiais 
clínicos após a coleta: é necessário?
 Temperatura ambiente (TA) para o transporte e
armazenamento de amostras é de 25oC
 Estudos mostram que a viabilidade de bactérias
fastidiosas transportadas em swabs com meio de
transporte, foi melhor quando os swabs foram
armazenados refrigerados.
 A refrigeração da amostra tem como finalidade manter a
viabilidade do agente a ser pesquisado e não permitir a
multiplicação de bactérias que fazem parte da microbiota
do sítio de onde a amostra foi coletada.
Exceção: líquor.
3. O uso de swabs com meio de 
transporte para coleta de materiais 
clínicos
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A coleta apropriada e um sistema de transporte
eficiente são as etapas mais críticas da fase pré-
analítica do exame microbiológico.
Swab com meio de transporte pode ser utilizado
para: secreções do trato genital, trato respiratório
superior (orofaringe, nasofaringe), secreção ocular
e do trato digestório (ânus e reto).
 Não deve ser utilizado para secreções de feridas.
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Sequência correta de semeadura de 
um material clínico
nos diferentes meios de cultura
O processamento do material clínico:
 confecção de esfregaço corado pelo Gram e semeadura em
meios de cultura.
 Os meios de cultura são classificados basicamente em meios
seletivos e não-seletivos
Os meios ricos são livres de agentes inibidores
Os meios seletivos já possuem agentes inibitórios
favorecendo o crescimento de alguns microrganismos e
inibindo o de outros.
 A semeadura deve ser realizada primeiramente no meio rico,
seguido do meio seletivo.
Agar sangue
Agar MacConkey
5. Rejeição de amostras
clínicas no laboratório de microbiologia
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COLETA DE MATERIAIS
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 Aplicar álcool na tampa do recipiente
Realizar a antissepsia com álcool 70% no 
local da punção
Aplicar iodo 1 a 2% e retirar o excesso 
com álcool 70%
Esperar secar
Não apalpar
• Transporte: < 2h, TA
• Armazenamento: <48h, TA
COLETA DE SECREÇÕES 
ABSCESSOS
 Lesão aberta:
 Remover exsudato superficial, limpando com solução
fisiológica estéril, as margens e a superfície da lesão.
Coletar a amostra na parte mais profunda da lesão,
utilizando de preferência, seringa e agulha. Swab com
meio de transporte.
 Abscesso fechado e nódulos:
 Não usar swab .
Fazer anti-sepsia; limpar com solução
fisiológica estéril.
 Aspirar o exsudato com agulha e seringa
COLETA DE SECREÇÕES 
ABSCESSOS
 Limpar a superfície com salina estéril.
Se possível, biopsiar (médico); se não, aspirar
com seringa e agulha; em último caso, colher
com "swab" e colocar em meio de transporte
(Stuart).
COLETA DE SECREÇÕES
ÚLCERA DE DECÚBITO (ESCARAS)
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 Conjuntiva: colher de ambos os olhos com
"swabs" umedecidos em salina ou caldo; semear
imediatamente em agar sangue e agar chocolate, ou
transportar em Stuart
Transporte: placas <15 min, Tº ambiente
"swabs" <2 h, Tº ambiente
COLETA DE SECREÇÕES
SECREÇÃO OCULAR
 Cérvix: Após limpeza do muco/secreção com um
"swab", colher com outro “swab” material do canal
cervical, e incluir em meio de transporte.
 Secreção vaginal: limpar o excesso de secreção,
colher com "swab", e colocar em meio de transporte
(Stuart). Um segundo "swab“ deve ser colhido e
passado em lâmina. Um terceiro deve ser colhido e
mantido em tubo com salina
COLETA DE SECREÇÕES
SECREÇÕES GENITAIS FEMININAS
COLETA DE SECREÇÕES
SECREÇÕES GENITAIS MASCULINAS
 Uretra: "swab" urogenital no lúmen uretral (2-4 cm 
profundidade), rotativamente, colocando em meio de 
transporte Stuart.
LESÃO ULCERADA MASCULINA OU FEMININA
 Colher com "swab", após limpeza e colocar em 
meio de transporte (Stuart).
PROCESSAMENTO DE 
SECREÇÕES
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PROCESSAMENTO
 Swab sem meio de transporte:
 Suspender a amostra em volume pequeno de caldo
TSB ou solução fisiológica estéril e homogeneizar.
Utilizar a solução para inocular nos meios e fazer
lâmina para o Gram.
 Semear por esgotamento.
 Swab com meio de transporte:
 Rolar o swab numa parte do meio e semear por
esgotamento.
PROCESSAMENTO
 Seringa
 Inocular diretamente nos meios de cultura
sólidos (esgotamento)
Secreção de orofaringe
CULTURA EM AGAR SANGUE: 
Streptococcus pyogenes
COLETA DE SECREÇÕES
SECREÇÕES TRATO RESPIRATÓRIO SUPERIOR
PROCESSAMENTO: CULTURAS QUANTITATIVAS
amostras respiratórias
 Uso de Alça Calibrada. 
 Critérios de Interpretação:
 Escovado Protegido:  103 UFC/mL 
 Lavado Bronco-alveolar (LBA):  104 UFC/mL
 Aspirado Traqueal:  106 UFC/mL