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ROTEIRO PRÁTICA: Pesquisa de polissacarídeos: reação com iodo 1. Objetivos - obter informações sobre o tamanho e grau de ramificação da molécula de carboidrato através da reação com o iodo. 2. Princípios teóricos Polissacarídeos são moléculas de elevado peso molecular, cuja unidade fundamental são os monossacarídeos, principalmente a glicose. Como exemplos de polissacarídeos importantes na natureza podemos destacar o glicogênio, a celulose e o amido. O amido, polissacarídeo de extrema importância em alimentos, é produzido em grande quantidade nas folhas dos vegetais como forma de armazenamento dos produtos da fotossíntese, e é constituído por dois outros polissacarídeos estruturalmente diferentes: amilose e amilopectina (ver figura abaixo). Como podemos observar, a molécula da amilose não apresenta ramificações e, no espaço, assume conformação helicoidal (forma de hélice). A ligação entre os átomos de carbono das unidades de glicose são do tipo alfa 1-4. A amilopectina apresenta estrutura ramificada, sendo que os "ramos" aparecem a cada 24- 30 moléculas de glicose. A ligação entre as unidades de glicose também é do tipo alfa 1-4 na mesma cadeia. Porém, unindo duas cadeias aparecem ligações do tipo a 1-6. Observe a figura: Moléculas de alto peso molecular (como a amilose e a amilopectina) podem sofrer reações de complexação, com formação de compostos coloridos. Um exemplo importante é a complexação da amilose e da amilopectina com o iodo, resultando em complexo azul e vermelho- violáceo, respectivamente. A figura abaixo esquematiza a interação do iodo com a estrutura do amido: Já sabemos que o amido é formado pela combinação da amilose com a amilopectina. Também sabemos que a amilose forma um complexo azul com o iodo, enquanto a amilopectina forma um complexo vermelho. Qual será então a cor do complexo iodo - amido??? O complexo esquematizado ao lado apresenta coloração azul intensa, desenvolvida pela oclusão (aprisionamento) do iodo nas cadeias lineares da amilose. E a interação iodo -amilopectina? Como vimos, o aprisionamento do iodo dá-se no interior da hélice formada pela amilose. Como a amilopectina não apresenta estrutura helicoidal, devido à presença das ramificações, a interação com o iodo será menor, e a coloração menos intensa. IMPORTANTE - nem todos os polissacarídeos, apesar de serem moléculas grandes, dão complexo colorido com o iodo. Isso porque é necessário que a molécula apresente uma conformação que propicie o "encaixe" do iodo. A celulose é um exemplo de polissacarídeo que não dá reação colorida com o iodo. 3. Procedimento Experimental 3.1. Material a) Reagentes e soluções - solução de amido 1% * - solução de glicose 2% - solução de lugol ** - solução de hidróxido de sódio (NaOH) 1M - solução de ácido clorídrico (HCl) 1M - água destilada b) Vidraria e instrumental - 03 tubos de ensaio - conta-gotas ou pipeta Pasteur - pipetas de 2 mL * Como o amido é de difícil dissolução, preparar a solução da seguinte maneira: misturar 1 g de amido com 10 ml de água. Derramar a pasta em um recipiente que contenha 100 ml de água fervente. Cessar a ebulição e deixar esfriar e sedimentar. Separar a parte sobrenadante (sem grumos) por decantação. A solução ganha maior estabilidade se for adicionada de 1g de ácido salicílico (1%). ** Preparo do reagente de lugol: 5 g de iodo (I2) + 10 g de iodeto de potássio (KI). Completar o volume para 100 ml com água destilada. Diluir 1:10 no momento da utilização. 3.2. Procedimento Parte I 1. Prepare a seguinte bateria de tubos, identificando-os: (1) 2 mL de água destilada (2) 2 mL da solução de amido (3) 2 mL da solução de glicose 2. a cada um dos tubos adicionar 4 gotas de lugol; 3. observar a coloração desenvolvida e descrever o resultado. O desenvolvimento de coloração azul intensa indica presença de polissacarídeo. Parte II 1. Ao tubo que contém amido e lugol, adicione 5 gotas de NaOH 1M. Observe e anote o resultado. 2. Adicione, ao mesmo tubo, 5 gotas de HCl 1M. Observe. Roteiro – Produção de açúcar invertido 100 g de açúcar 0,22 g de ácido cítrico 80 ml de água Acrescente o açúcar, a água e o ácido cítrico em uma panela não reativa a ácidos e mexa todos os ingredientes até que tudo fique homogêneo.
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