Exercício de Bacteriologia Clínica

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Exercício I de Bacteriologia Clínica
(morfologia bacteriana)
1. Quais as principais diferenças entre uma células procarionte e eucarionte?
Procariontes: são mais simples que as eucarióticas. Nestas, o DNA não está envolto por uma membrana, não há núcleo definido pela carioteca (membrana nuclear) e podemos encontrar ribossomos dispersos no citoplasma. Moléculas circulantes de DNA, os plasmídios, também podem ser encontradas. Externamente à membrana plasmática destas células, há a parede celular. Indivíduos procarióticos são unicelulares, sendo estes: as bactérias, cianofíceas, micoplasmas, rickéttsias e clamídias. Alguns destes indivíduos, como as cianofíceas, apresentam pigmentos responsáveis pela fotossíntese.
Eucariontes: possuem maior tamanho e complexidade, a começar pelo núcleo individualizado, envolvido pela carioteca. Seu citoplasma é interconectado por uma rede de tubos e canais membranosos e é onde, além de ribossomos, também são encontradas mitocôndrias, retículo endoplasmático granuloso e não granuloso, complexo golgiense, lisossomos, peroxissomos, centríolos, dentre outras organelas. Exemplos de indivíduos eucariotas: animais, vegetais, fungos e protozoários.
 2. Esquematize uma células bacteriana com seus principais componentes.
 3. Explique os benefícios das bactérias para o planeta Terra e para os seres humanos. 
Fazem parte do processo de decomposição da matéria orgânica, as bactérias são importantes para o meio por participarem do ciclo do nitrogênio, fazem parte da nossa microbiota, de maneira que não sobreviveríamos sem elas. Além disso, elas são usadas na produção de vacinas, iogurte, cervejas, vinhos, antibióticos e até mesmo de hormônios, como é o caso da insulina. As bactérias atualmente estão sendo usadas também na despoluição de ambientes e no controle biológico de pragas, sendo inseridas para matar insetos sem causar poluição.
4. De que forma uma bactéria se reproduz? 
Assexuada: – Cissiparidade ou bipartição – Esporulação (que forma estruturas chamadas endosporos) 
Sexuada: Recombinação genética: • leva à formação de novos indivíduos com características diferentes, resultante da mistura de material genético; • pode ocorrer de três maneiras: transferência genética por transformação, transferência genética por conjugação, transferência genética por transdução.
5. Explique os mecanismos utilizados pelas bactérias para se modificarem geneticamente. 
Transferência genética por transformação – A bactéria receptora capta do meio pedaços de DNA livres procedentes de outras bactérias já mortas. – Normalmente a célula incorpora em cada transformação uma pequena quantidade de genes.
Transferência genética por conjugação – Há transferência de DNA de uma bactéria para outra através de um pili sexual. – Esse mecanismo de recombinação requer contato próximo entre as bactérias envolvidas. – Após o processo, as células se separam, a bactéria receptora se reproduz assexuadamente, originando células-filhas com material genético recombinado.
Sexuada: transferência genética por transdução – O transmissor dos genes é um vírus bacteriófago. Ele inicia um ciclo lítico durante o qual incorpora pedaços do DNA de seu hospedeiro ao seu próprio DNA e os transfere a uma célula quando a infecta. 
6. Descreva as formas e os arranjos bacterianos. 
7. Como podemos diferenciar uma bactérias gram-positiva de uma gram-negativa? Faça um esquema.
8. Explique a técnica de Coloração de Gram. 
A coloração de Gram permite que se diferencie duas grandes classes de bactérias, a classe gram-positiva que se cora de roxo ou violeta e a gram-negativa que se cora de vermelho.
Fixe as bactérias na chama. 
 Cubra o esfregaço com cristal violeta e deixe por aproximadamente 15 segundos; (irá corar as bactérias gram-positivas e gram-negativas de roxo)
 Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; Cubra a lâmina com lugol diluído (1/20) e deixe agir por aproximadamente 1 minuto; (o lugol irá fixar a coloração nas bactérias)
 Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente;
 Adicione álcool etílico (99,5º GL) sobre a lâmina; descorando-a, até que não desprenda mais corante; (o álcool irá descorar as bactérias gram-negativas)
 Lave em um filete de água corrente;
 Cubra a lâmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30 segundos; (a safranina ou fucsina, irá corar as bactérias gram-negativas de vermelho)
 Lave em um filete de água corrente;
 Deixe secar ao ar livre, ou seque suavemente, com o auxílio de um papel de filtro limpo;
 Visualize no microscópio. Leia em objetiva de imersão (100 X).
9. O que são plasmídeos e qual a importância dessa estrutura para a células bacteriana? 
Os plasmídeos são moléculas extracromossômicas circulares de DNA bacteriano. Essas moléculas destacam-se por sua capacidade de duplicação independente, ou seja, são capazes de se replicar independentemente do DNA cromossomal. Por esse motivo, em uma célula bacteriana, é possível encontrar várias cópias de plasmídeos.
A importância para as bactérias é que normalmente os plasmídeos apresentam funções relacionadas com a sobrevivência de bactérias, garantindo vantagem seletiva. É comum a presença de plasmídeos com genes que garantem resistência a antibióticos. Existem ainda plasmídeos, chamados de plasmídeos de virulência, que aumentam a capacidade da bactéria de causar doença; plasmídeos que protegem contra substâncias que possam causar dano e aqueles que possibilitam a metabolização de vários substratos.
10. O que são antimicrobianos? Qual os principais mecanismos de ação dessas substâncias? Explique os mecanismos que as células bacterianas possuem para inativar essas substâncias.
Antimicrobiano: são substâncias (naturais ou químicas) com ação inibitória contra bactérias.
ANTIMICROBIANOS: MECANISMOS BÁSICOS DE AÇÃO: 
Inibição da síntese da parede celular, Inibição da síntese de proteínas, Inibição da síntese de ácidos nucléicos, Alteração da membrana, Alteração de via metabólica.
As bactérias possuem diversos mecanismos de resistência aos antibióticos. Os principais são: alteração na permeabilidade da membrana, alteração no local de atuação do antibiótico, bombeamento ativo do antibiótico para fora da bactéria e a produção de enzimas que destroem os antibióticos. Esse último mecanismo destaca-se como sendo a estratégia mais frequentemente observada em bactérias.