Enzimas e Açúcares Redutores

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Concentração de SRP(mg/
mL
)
6
5
4
3
2
1
y
 
=
 
0,1782x
 
-
 
0,0068
1
0,9
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
-0,1 
0
Absorvância1. Construa o gráfico da Curva Padrão de Solução Redutora Padrão e apresente a equação da reta.
2. Por que no tubo 12 não houve desenvolvimento de cor? Explique de acordo com o poder redutor dos açúcares.
R: A sacarose natural é um carboidrato redutor pois não possui carbono anomérico. Esse carbono seria responsável por reduzir o outro composto por oxidação. Por ser um dissacarídeo, a sacarose é formada pela união de uma molécula de glicose e outro de frutose (carboidratos redutores) através da ligação glicosídica. Diante do fato de que não foi adicionado no tubo 12 a enzima responsável pela quebra da ligação, não houve mudança de cor.
3. Usando o gráfico da Curva Padrão de Solução Redutora Padrão (construído na pergunta 1), calcule a quantidade de açúcares redutores (glicose + frutose) formada nos tubos 7 a 11.
R: Equação da Reta: Y = 0,01782x – 0,0068 Tubo 7 
0,045 = 0,1782x - 0,0068 
 x7 = 0,29 
V7 = 0,029
Tubo 8
0,079 = 0,1782x – 0,0068
x8 = 0,48 
V8 = 0,048
Tubo 9 
0,121 = 0,1782x – 0,0068 
x9 = 0,71 
V9 = 0,071
Tubo 10
0,146 = 0,1782x – 0,0068
x10 = 0,85 
 V10 = 0,085
Tubo 11
0,158 = 0,1782x – 0,0068 
 x11 = 0,92 
 V11= 0,092
4. Construa um gráfico de Michaelis-Menten (V x [S]) e um gráfico de Lineweaver-Burk (1/V x 1/[S]) com os resultados obtidos nos tubos 7 a 11, e apresente a equação da reta obtida no gráfico de Lineweaver-Burk. Utilize a tabela abaixo para auxiliar na construção deste gráfico.
1/[S]
3
2
1
0
-5
 
0
-1
-2
10
5
1/[V]
Linear
 
(1/[V])
30
25
20
1/[V]
15
y
 
=
 
12,448x
 
+
 
9,2557
R² = 0,9965
35
Gráfico
 
de
 
Lineweaver-Burk
40
8
6
4
Sacarose (mg/ml)
0
2
mg/min
0,04
0,03
0,02
0,01
0
Fru
/min)
(mg/ml
 
de
 
Glc
 
+
 
0,05
Gráfico Michaelis-
Menten
0,1
0,09
0,08
0,07
0,06
Velocidade
5. A partir do gráfico de Lineweaver-Burk e da equação da reta, determine o valor de Km e Vmáx. Lembre-se que: 
• no ponto em que a reta corta o eixo y (x = 0), o valor de y = 1/Vmáx 
• no ponto em que a reta corta o eixo x (y = 0), o valor de x = - 1/Km 
1/Vmáx = 12,448 x 0 + 9,2557
Vmáx = 1/9,2557 
Vmáx = 0,10 (mg/mL/min)
0 = 12,448x (-1/Km) + 9,2557 
Km = -12,448/-9,2557 
Km = 1,35
 ENZIMAS
Andréia Cordeiro RA:
Carolina de Souza Araujo RA:1017200090 
Emiliane Rodrigues RA:1017200066
Isabela Tedesco RA:1017200099
Isamar de Sousa Kinsui RA: 
João Vitor Gaiotto RA:
Larissa Gonçalves Silva RA:1017200071
Letícia Fernandes Silva RA: 1017200079
Monalysa Oliveira Coutinho RA: 1017200082