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AULAS PRÁTICAS BIOLOGIA CELULAR – FHO UNIARARAS Professoras: Dra. Miriam de Magalhães Oliveira Levada, Dra. Grasiela Dias de Campos Severi Aguiar, Dra. Maíra Felonato Mendes, Dra. Magali Luci Pinto ROTEIRO PRÁTICO DE BIOLOGIA CELULAR � Considerações gerais sobre a utilização do laboratório a) os horários de aula deverão ser obedecidos com rigor; b) é obrigatório o uso de avental, pois além de proteger a roupa, condiciona à limpeza e disciplina. c) o aluno que danificar o material permanente ou de consumo, mesmo casualmente, deverá avisar o professor. d) não jogue lixo nas pias, mas em cestos apropriados. e) não risque as bancadas. O aluno deverá encontrar seu lugar limpo e assim deixá-lo para o colega seguinte. Se observar algo errado comunique ao professor assim que chegar, pois o mesmo terá condições de localizar o grupo desordeiro. Limpe seu lugar quando terminar o trabalho. f) você irá trabalhar em grupos formados sob seu critério. Portanto escolha bem seus companheiros de trabalho. � Como documentar o curso Todo trabalho científico desenvolvido precisa ser documentado. No caso da biologia celular o desenho esquemático é muito importante desde que seja realizado com honestidade, isto é, sem criações, sem a influência do esquema do professor, com atenção e sem pressa. 1. é necessário (obrigatório) a presença do caderno de desenho nas aulas práticas em biologia celular. 2. leia todo o roteiro da experiência que vai fazer, antes de iniciar o trabalho para ficar claro o que vai ser realizado. 3. separe todo o material necessário antes de comçar o trabalho. 4. siga especificamente as indicações de tempo, material, etc. como o roteiro indica. 5. após usar, coloque cada material no local indicado para não misturar componentes. 6. só esquematize o que você de fato vê. Não dê asas a sua imaginação. Isto é um trabalho científico e não uma obra de arte. Caso alguma estrutura que deveria ser exibida não aparecer, anote o sucedido por escrito em seu roteiro, porém procure bem antes de proceder desta forma. A qualidade dos esquemas é importante para sua própria compreensão. 7. anote todos os dados. Na hora eles podem não parecer importantes, mas o serão para as conclusões. 8. os desenhos serão feitos a lápis (coloridos ou não), a mão livre. 9. coloque o nome, número e a turma a tinta. Não se esqueça que os relatórios são individuais. 10. os esquemas devem ser acompanhados de legendas e explicações por escrito e eventualmente gráficos. Tudo que você desenhou tem nome. 11. quando o roteiro solicitar que você faça o mesmo esquema com diferentes aumentos, note que os desennhos não terão tamanhos diferentes, mas detalhes a mais ou a menos. 12. o roteiro foi programado para ser executado durante a aula. Habitue-se a trabalhar com regra e horário, pois caso você não termine, não poderá fazê-lo em casa, uma vez que você não dispõe do material necessário. Não passe a limpo, pois isso é o mesmo que copiar figuras e os esquemas devem partir do natural. 13. do seu desempenho e comportamento depende a sua nota de laboratório. Seja objetivo, consciente e responsável. AULAS PRÁTICAS BIOLOGIA CELULAR – FHO UNIARARAS Professoras: Dra. Miriam de Magalhães Oliveira Levada, Dra. Grasiela Dias de Campos Severi Aguiar, Dra. Maíra Felonato Mendes, Dra. Magali Luci Pinto ROTEIRO PRÁTICO DE BIOLOGIA CELULAR No 1 Tema: observação do Microscópio Óptico Comum (MOC) A microscopia tem a maior importância no estudo das células. Muitas características importantes de interesse nos sistemas biológicos são demasiado pequenas para serem vistas a olho nu só podendo, portanto, ser observadas com o microscópio. Construção do Microscópio Óptico 1. Ocular: conjunto de lentes sobre as quais você coloca o olho. Dá imagem virtual, ampliada e direta. O aumento está gravado na sua extremidade superior. Para cálculo da ampliação total, multiplica-se a ampliação da ocular pela objetiva. Exemplo: ocular = 10x e objetiva = 40x. Ampliação total de 400x. 2. Tubo ou canhão: contém em uma das extremidades a lente e na outra, o revólver que é uma peça giratória a qual se prendem as lentes objetivas. 3. Revólver: local onde são inseridas as objetivas. 4. Objetivas: conjunto de lentes que ampliam a imagem. Estão presas ao revólver, que ao ser girado vai mudando as objetivas. Ela projeta uma imagem real, ampliada e invertida. O aumento da objetiva é gravado na sua lateral. Para uso da objetiva de imersão (100x) utilizar, inicialmente, o menor aumento e focalizar. Colocar então uma gota de óleo de cedro sobre o centro iluminado da lâmina lateralmente e controlando o abaixamento até que a objetiva toque o óleo. Observar pela ocular e girar o micro até que a focalização seja nítida. Terminando o estudo, limpar a lâmina e a lente usando um pano macio molhado em xilol, em seguida uma flanela limpa. 5. Charriot: serve para locomover a lâmina para a direita ou esquerda e para cima ou para baixo. 6. Presilha: serve para segurar a lâmina sobre o charriot. 7. Platina: sobre esta se coloca a lâmina preparada, exatamente sobre uma abertura central que dá passagem aos raios de luz. 8. Diafragma: situa-se junto ao condensador e é o responsável pelo controle da abertura angular do cone de luz para a iluminação da amostra. 9/(10). Condensador (botão do condensador): está por baixo da platina. É o conjunto de lentes cuja função é concentrar a luz. 11. Lâmpada/ fonte de iluminação. 12. Base ou pé: dá ao instrumento boa estabilidade e é usado para o repouso do aparelho na mesa de trabalho. Nele está um botão que dá controle à intensidade luminosa. 13 e 14. Parafuso macro e micrométrico: abaixam e elevam a platina. O macrométrico permite o ajuste grosseiro da imagem. O micro permite uma melhor focalização. 15. Braço: sustenta a parte óptica (lentes) e serve para o transporte do aparelho. COMO UTILIZAR O MICROSCÓPIO ÓPTICO Para obtenção de melhores resultados ao utilizar o microscópio, o aluno deverá seguir rigorosamente os seguintes passos: 1) antes de ligar o microscópio, verificar se o controle de iluminação está no zero e se a objetiva de menor aumento (4x) está em posição. Se não estiver, coloque. 2) ligue o microscópio. Abaixe a platina. Coloque a lâmina na platina com a lamínula voltada para cima. Prenda a lâmina com presilhas e faça coincidir o centro da preparação com o centro do orifício da platina. Gire o parafuso MACROMÉTRICO até encontrar o foco. Ajuste-o utilizando o parafuso MICROMÉTRICO. Ajuste a iluminação adequada. 3) procure na lâmina a área que deverá ser observada em maior aumento. Coloque-a no centro do campo e passe para o seguinte (10x), ajustando o foco utilizando-se apenas do parafuso MICROMÉTRICO. Ajuste a iluminação. 4) para passar para o aumento seguinte (40x) proceda exatamente como no item anterior. 5) ao chamar o professor para confirmação de diagnósticos, mantenha o que você quer confirmar na seta. Verifique que a seta em uma das oculares. 6) ao terminar sua prática desligue o microscópio, tendo cuidado de deixar posicionada a objetiva de menor aumento (4x), e o controle de iluminação em zero. Cubra-o. OBSERVAÇÕES IMPORTANTES: - Nunca esfregar um pano ou lenço de papel sobre as lentes empoeiradas. As partículas de pó podem arranhar as lentes. Assoprar o pó da lente antes de passar o papel. - Segurar o microscópio somente pelo braço, nunca pelo tubo ou platina. Nunca transportá-lo pela sala de aula. - Cada grupo de alunos, formado por livre escolha, será responsável moral e financeiramente por um microscópio e pelo material de apoio cedido pela professora, os quais têm lugar fixo. Não é permitido ao aluno trocar de turma, de grupo e de microscópio. Lembre-se que todomaterial é utilizado por colegas de outros cursos. Recomenda-se, pois, que no início de cada aula o aluno faça a revisão do material a ele confiado. Qualquer falta de material didático deverá ser imediatamente comunicado ao professor.
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