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Bandeamento Cromossômico Prof. Dr. Bruno Lazzari de Lima C, G, Q e R. O Cariótipo Humano • Cromossomos condensados são analisados na metáfase. – Duas cromátides irmãs, unidas pelo centrômero. • Podem ser identificados não só por seu tamanho, mas também pela localização do centrômero. – Braços curtos (p) e longos (q). O Cariótipo Humano • Na ausência de coloração adequada, não é possível identifica-los individualmente. • Classificação restrita a classificação em sete grupos, designados de A à G. – Tamanho e posição do centrômero. • Embora possam se analisados diretamente no microscópio, é comum que sejam fotografados e arrumados em pares. O Cariótipo Humano • Cariótipo – conjunto cromossômico padrão de um indivíduo. • Cariotipar – Processo de preparação do cariótipo. O Cariótipo Humano • Grupo A – Os maiores: 1 e 3 são metacêntrico, mas 2 é submetacêntrico O Cariótipo Humano • Grupo B – 4 e 5 são grandes e submetacêntrico com os dois braços muito diferentes. O Cariótipo Humano • Grupo C – 6 ao 12 e X, tamanho médio e submetacêntrico. O Cariótipo Humano • Grupo D – 13 ao 15, tamanho médio e acrocêntricos com satélite. O Cariótipo Humano • Grupo E – 16 ao 18, pequenos. 16 é metacêntrico, 17 e 18 submetacêntricos. O Cariótipo Humano • Grupo F – 19 e 20, pequenos e metacêntricos. O Cariótipo Humano • Grupo G – 21, 22 e Y, pequenos e acrocêntricos, com satélites no 21 e 22. Bandeamento Cromossômico • Resultam na incorporação de um corante DNA-específico fazendo com que os cromossomos se corem com uma série de bandas claras e escuras. • Evidenciam alterações de regiões com 1 a 10 Mb. Bandeamento G • Os cromossomos são inicialmente tratados com tripsina, para a desnaturação das proteínas cromossômicas e em seguida são corados com o corante Giemsa. As bandas escuras são bandas G e as claras são G-negativas. • Bandas G contém cromatina mais condensada, se replicam mais tardiamente e tem menor atividade de transcrição. Bandeamento G Bandeamento Q • Os cromossomos são tratados com corantes fluorescentes como quinacrina e DAPI, que ligam-se a DNA rico em A-T, e em seguida examinados por microscopia de fluorescência. Os cromossomos coram-se num padrão específico de bandas brilhantes (bandas Q) que correspondem quase exatamente às bandas G. Bandeamento Q Bandeamento R • Os cromossomos recebem pré-tratamento com calor, em solução salina, antes da coloração Giemsa . O calor desnatura o DNA rico em A-T. Nesse caso, as bandas claras e escuras resultantes (bandas R) são o inverso das produzidas por bandeamento G ou Q. • Nas bandas R há uma maior concentração de genes. Bandeamento R Bandeamento R Bandeamento C • Envolve a coloração da região centromérica de cada cromossomo e outras regiões que contenham heterocromatina.Os cromossomos são submetidos à desnaturação por uma solução de hidróxido de bário antes da coloração de Giemsa. Bandeamento C Mapeamento p21.32 – Braço curto. O número seguinte a letra representa a posição no braço: banda 21, sub-banda 3, sub-sub banda 2. As bandas são visíveis ao microscópio quando o cromossomo está devidamente corado. Cada banda é numerada sendo a número 1 a mais próxima do centrômero. Sub-bandas e sub-sub-bandas são visíveis a resoluções mais altas.
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