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TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS (TSA) OU ANTIBIOGRAMA Aprimorandos de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Publica Andrey Marana Botega Idemar Leite Zanchetta Laura Luisa Gonçalves Lorena Definição • Técnica destinada à determinação da sensibilidade bacteriana in vitro frente a agentes antimicrobianos; • Os resultados dos testes de suscetibilidade são a predição da resposta esperada ao tratamento, não a garantia(Greene, 2015). Testes De Susceptibilidade Microbiana • Método de Microdiluição; • Método de Macrodiluição; • Método de difusão em ágar; • Testes automatizado; • Teste molecular; • E-Test • Teste de disco de difusão (Kirby-Bauer, 1966). Teste de disco de difusão (Kirby - Bauer) • Mais difundida e utilizada na rotina de análises clínicas; • Praticidade de execução; • Baixo custo; • Confiabilidade de seus resultados; • Instruções devem ser seguidas rigorosamente. Teste de disco de difusão (Kirby - Bauer) • Trata-se de um método em que usa-se discos de papeis impregnados com antimicrobianos que são aplicados a superfície do ágar em quem foram inoculados culturas puras do microrganismo em estudo. Fatores determinantes para realização do TSA • Material clínico – cuidado no isolamento de microbiota normal de determinado sítio anatômico, pois não é indicada a realização do TSA neste tipo de amostra; • Realização da técnica; • Escolha dos antimicrobianos; • Resistência intrínseca. Meios de Cultura • Mueller-Hinton - maioria dos microrganismos; • Ágar Sangue - Streptococcus sp., Gonococcus sp. e Haemophilus sp.. Inóculo • Inocular 5 colônias em tubo com BHI-caldo (Brain Heart Infusion). • incubar a 37oC; obter densidade equivalente ao padrão de Mc Farland 0,5 ( 1,5 x 10 8/ml). PROCEDIMENTO TÉCNICO 1- Embeber um swab estéril na suspensão bacteriana. 2- Retirar excesso de caldo na parede do tubo. 3- Semear na superfície do meio uniformemente. 4- Flambar a pinça e esfriar. 5- Com o auxilio da pinça depositar o disco no ágar já com o inóculo. 6-Pressionar levemente contra a superfície do meio. 7-Incubação das placas em temperatura (37ºC) e atmosfera adequada para o crescimento da bactéria. 8-Leitura das Placas • 16- 18 horas de incubação; • Determinar o diâmetro do halo de inibição (mm); • (Resistência, inibição intermediária ou sensibilidade). 9-Interpretação do Resultado • Resistente- não há inibição do microrganismo pelas concentrações de antimicrobiano alcançadas pelas doses habituais e há maior chance de falha terapêutica; • Intermediário- microrganismo pode ser erradicado, dependendo das concentrações antimicrobianas alcançadas no sítio infeccioso; • Sensível- indica que há grande probabilidade de sucesso clínico, quando doses habituais deste antimicrobiano são utilizadas. Antibiótico Potencia e código Resistente Intermediário Sensível Amoxilina/Acido clavulânico AMC 30 ≤13 14 – 17 ≥ 18 Amicacina AMI 30 ≤14 15-16 ≥17 Amoxicilina AMO 30 ≤16 17-19 ≥20 Azitromicina AZI 15 ≤12 - ≥ 13 Cefalexina CFE 30 ≤14 15-17 ≥18 Cefepime CPM 30 ≤18 19-22 ≥25 Cefoxitina CFO 30 ≤14 15 – 17 ≥ 18 Ceftriaxona CRO 30 ≤19 20-22 ≥23 Ciprofloxacina CIP 05 ≤15 16 – 20 ≥ 21 Clindamicina CLI 02 ≤15 16 – 18 ≥ 19 Cloranfenicol CLO30 ≤12 13 – 17 ≥ 18 Doxiciclina DOX 30 ≤12 13 – 15 ≥ 16 Enrofloxacino ENO 5 ≤17 18-21 ≥22 Antibiótico Potencia e código Sensível Intermediário Resistente Florfenicol FLF 30 ≤14 15-18 ≥ Gentamicina GEN 10 ≤12 13 – 14 ≥ 15 Imipenem IPM 10 ≤19 20-22 ≥23 Neomicina NEO 30 ≤12 13-16 ≥ 17 Norfloxacina NOR 10 ≤12 13 – 16 ≥ 17 Penicilina PEN 10 ≤11 12 – 13 ≥ 14 Polimixina POL 300 ≤8 9 – 11 ≥ 12 Sulfadiazina / Trimetoprim SZT 15 ≤10 11 – 15 ≥ 16 Tobramicina TOB 10 ≤12 13 – 14 ≥ 15 Vancomicina VAN 30 ≤14 15 – 16 ≥ 17 Florfenicol FLF 30 ≤14 15-18 ≥ Gentamicina GEN 10 ≤12 13 – 14 ≥ 15 Imipenem IPM 10 ≤19 20-22 ≥23 Neomicina NEO 30 ≤12 13-16 ≥ 17 Antibiótico Potencia e código Sensível Intermediário Resistente Norfloxacina NOR 10 ≤12 13 – 16 ≥ 17 Penicilina PEN 10 ≤11 12 – 13 ≥ 14 Polimixina POL 300 ≤8 9 – 11 ≥ 12 Sulfadiazina / Trimetoprim SZT 15 ≤10 11 – 15 ≥ 16 Tobramicina TOB 10 ≤12 13 – 14 ≥ 15 Vancomicina VAN 30 ≤14 15 – 16 ≥ 17 Obrigado! • DE NADA PELA INFORMAÇÃO.
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