Aula 5.1 Calculo Curva Padrão

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Toxicologia 
Prof. Me. Vinicius Cardoso 
 
vinicius.cardoso@uni9.pro.br 
Graduação em Farmácia e 
Bioquímica 
 
 Cálculo para concentração de Nitrito em Salsicha 
 
Aula 5.1 
 Determinação Nitrito 
Plano cartesiano 
 
 
Horizontal = eixo “X” 
 Concentração 
(mg/Kg, ppm, mg/L) 
 
Vertical = eixo “Y” 
 Absorbância (Abs) 
 
 Determinação Nitrito 
Conversão unidade de medida 
 
Quando falamos de toxicologia, a presença de aditivos e contaminantes deve ser o mais 
próximo de zero possível. Visto isso, a presença de contaminantes/aditivos, usualmente, é 
determinada segundo as relações: 
 
mg/Kg >>> miligrama por quilograma de peso corpóreo (intoxicação) 
mg/Kg >>> miligrama por quilograma de peso do produto analisado. 
 
mg/L >>> miligrama por litro de solução 
 
PPM >>> Parte Por Milhão  1 parte do analito em 1.000.000 de partes 
PPB >>> Parte Por Bilhão  1 parte do analito em 1.000.000.000 de partes 
 
Relação entre unidades: 
 
1 mg/Kg = 1mg/L = 1 ppm 
 
 Determinação Nitrito 
Elaboração da curva e Calibração no Excel 
 
1. Realizar pelo menos 3 soluções de concentração conhecida (uma reta só se faz com pelo 
menos 3 pontos!): 
 
 1.1.1 Solução 1: Pesar 0,03g de Nitrito e colocar em 1000mL de Água Destilada; 
 
 1.1.2 Solução 2: Pesar 0,06g de Nitrito e colocar em 1000mL de Água Destilada; 
 
 1.1.3 Solução 3: Pesar 0,09g de Nitrito e colocar em 1000mL de Água Destilada; 
 
 1.1.4 Solução 4: Pesar 0,12g de Nitrito e colocar em 1000mL de Água Destilada; 
 
 1.1.5 Solução 5: Pesar 0,15g de Nitrito e colocar em 1000mL de Água Destilada; 
 
1.2 Realizar a leitura da solução BRANCO (neste caso, apenas água destilada). 
 
1.3 Realizar a leitura de cada solução, começando da menos concentrada para a mais 
concentrada. Anotar cada valor na respectiva concentração. 
 
 Determinação Nitrito 
Elaboração da curva e Calibração no Excel 
 
2. Plotar os dados de concentração e Absorbância obtidos. 
 Determinação Nitrito 
Elaboração da curva e Calibração no Excel 
 
3. Criar o gráfico de “Dispersão Somente com Marcadores”. 
 3.1 Selecione os dados na planilha. 
 3.2 Clique na aba INSERIR e, em seguida, DISPERSÃO >> DISPERSÃO SOMENTE 
COM MARCADORES 
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 Determinação Nitrito 
Elaboração da curva e Calibração no Excel 
 
4. O gráfico será formado. Em seguida, é necessário estabelecer a progressão linear (reta) 
que representa a mediatriz entre os pontos. 
 4.1 Com o gráfico selecionado, clique em LAYOUT >> ANÁLISE >> LINHA DE 
TENDÊNCIA >> LINHA DE TENDÊNCIA LINEAR 
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 Determinação Nitrito 
Elaboração da curva e Calibração no Excel 
 
5. A linha mediatriz (progressão linear) é traçada entre os pontos. Selecione a linha, clique 
com o botão direito e selecione a opção FORMATAR LINHA DE TENDÊNCIA... 
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 Determinação Nitrito 
Elaboração da curva e Calibração no Excel 
 
6. Na tela de formatação, selecione as opções: EXIBIR EQUAÇÃO NO GRÁFICO e EXIBIR 
VALOR DE R QUADRADO NO GRÁFICO >> FECHAR 
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 Determinação Nitrito 
Elaboração da curva e Calibração no Excel 
 
A curva padrão está montada e com a equação da reta (progressão linear, equação de 1º 
grau, função de 1º grau...) evidente. 
A partir desta equação é 
possível extrapolar para 
qualquer valor de 
concentração. Se atente 
para a substituição da 
incógnita certa. 
 
>> Se deseja saber valor de 
Concentração a partir da 
Abs, substitua o “Y” pelo 
valor de Abs encontrado; 
 
>> Se deseja saber o valor de 
Abs a partir da concentração 
da amostra, substitua o “x” 
pelo valor de concentração. 
 Determinação Nitrito 
y 
x 
mg/Kg 
R2 = Controle de 
Qualidade da reta – 
quão próximo os 
pontos estão da 
mediatriz. Utilizar 
valores próximos a 1 
(maior que 0,97) 
 Determinação Nitrito 
 Y = Abs lido na amostra 
 x = ? (concentração desconhecida 
Calculando: 
Supondo que a absorbância da amostra tenha sido 0,743, então, substituindo temos: 
 
0,743 = 0,014x + 0,019 -> 
 
 
0,743 – 0,019 = 0,014x -> 0,724 = 0,014x 
 
 
0,724 = x -> x = 51,71mg/Kg 
0,014 
Inverter o sinal 
Inverter o sinal 
 Determinação Nitrito 
1. Recuperar o valor de absorbância (Abs) da 
amostra de Salsicha; 
2. Substituir o valor na equação da reta (equação 
de primeiro grau – y=ax + b) no lugar do “y” ; 
3. Calcular o valor de “x” em mg/L. 
mg/L = ppm = mg/Kg 
Procedimento para o cálculo 
 Determinação Nitrito 
RESULTADO:_____ 
 Nível aceitável (até 200ppm) 
 Nível não-aceitável (superior) 
mg/L = ppm 
mg/Kg = ppm 
Dúvidas? 
Obrigado! 
Prof. Me. Vinicius Cardoso 
 
vinicius.cardoso@uni9.pro.br