Imunologia- Técnicas Imunológicas

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TÉCNICAS IMUNOLÓGICAS
IgGIgG
IgM
ELISA
Western Blotting
Anticorpo Monoclonal
Aplicação de
técnica sorológica
•Detecção de antígeno
•Detecção de anticorpo específico
•Quantificação de antígeno/anticorpo
•Localização de antígeno/anticorpo
anticorpo
• Específico ao antígeno
• Antígeno: proteína, 
polisacarídeo, polisacarídeo, 
lipoproteína, 
glicoproteína, ácido 
nucleico, etc. 
Qual é IgG?
IgG vs IgM
Diagnosticos
• Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay 
(ELISA)
• Immunochromatography
• Western Blotting 
ELISA 
DAS-ELISA
Substrato incolor
colorido
Antigen coating-ELISA
Substrato incolor
colorido
ELISA (DAS -- AC)
Detecção do vírus da Dengue
Conjugado Anti-IgG ou IgM humano
Enzima Substrato
Antígeno-Dengue
Soro do paciente
Produzir
Kit diagnóstico da Dengue ??
Discussão:
Detecção do Norovírus
Norovírus
Leitora de ELISA
ELISA automatizado
Imunocromatografia
ImmunochromatographyImunocromatografia
Western blotting
• Combinação de eletroforese de gel de 
poliacrilamida (Alvo-Proteína) e 
marcação de proteína alvomarcação de proteína alvo
• O que é eletroforese de gel de 
poliacrilamida??
Procedimento
Western blotting - proteína
Gel (CBB) Western blotting
Western blotting
• Vantagens comprando com ELISA????
DiscussãoDiscussão
Anticorpo monoclonal?
Anticorpos
• policlonal • monoclonal
Ag Ag
Epitopo ???
Epitopo ou determinante antigênico é a menor porção de antígeno com 
potencial de gerar a resposta imune. É a área da molécula do antígeno 
que se liga aos receptores celulares e aos anticorpos. É o sítio de ligação 
específico que é reconhecido por um anticorpo ou por um receptor de 
superfície de um linfócito T.
Cada antígeno pode conter um ou mais epitopos, sendo iguais ou 
diferentes. A presença de diferentes epitopos na superfície do antígeno 
pode desencadear uma produção de anticorpos com diferentes pode desencadear uma produção de anticorpos com diferentes 
especificidades e a ativação policlonal de linfócitos T. Isso geralmente 
não acontece, porque somente uns poucos epitopos podem ativar a 
resposta imune. Essa supremacia de um determinado epitopo é chamada 
imunodominância, e esse determinante antigênico com maior reativiade 
recebe a denominação de grupo imunodominante.
Como fazer ??
• Policlonal
Descreva aqui
• Monoclonal
Descreva aqui
Procedimento Anticorpo monoclonal
Vantagens de usar anticorpo monoclonal 
comparando com policlonal
Descreva:
Utilidade em tratamento de Câncer 
Utilidade em tratamento de Câncer 
Humanização de anticorpo monoclonal