Medidas de Biossegurança em Laboratórios

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Laboratório Clínico: MEDIDAS DE 
BIOSSEGURANÇA EM LABORATÓRIOS 
Prof. PHD. Willian Marinho Dourado Coelho 
Faculdade de Ciências Agrárias de Andradina 
Curso de Medicina Veterinária 
Introdução - biossegurança 
• História 
• Desinfecção, antissepsia e medidas de higiene para evitar 
doenças 
• Índia 1400 a 1200 a.c. 
• Século XVIII (varíola, hanseníase, sífilis, febre tifóide) 
• Viena (1847) - Uso de hipoclorito de sódio nas mãos 
• Lister (1865) – cirurgia asséptica 
 
Introdução - biossegurança 
• Acidentes laboratoriais 
- Meyer & Eddie (1941) – Infecções por Brucella spp. 
- Sulkin & Pike (1949-1976) – Infecções virais, tuberculose, 
tularemia, tifo, estreptococose, encefalite equina 
Venbezuelana e hepatite. 
- Skinhoj (1974) – riscos 5x maior de infecção por hepatite e 
tuberculose 
- Pike (1979) – códigos de prática e normas de conduta 
Introdução - biossegurança 
• Normas de biossegurança 
- Centro para Controle e Prevenção de Doenças – CDC 
Objetivo: socializar, rever os conhecimentos, 
rever os princípios, erros cristalizados, ter senso 
crítico, detectar erros, admití-los e corrigí-los 
 
Introdução - biossegurança 
• LEI Nº 8.974/95 – Lei de Biossegurança 
• Estabelece normas de segurança e 
mecanismos de fiscalização no uso de técnicas 
de engenharia genética na construção, cultivo, 
manipulação, transporte, comercialização, 
consumo, liberação e descarte de organismos 
geneticamente modificados, visando proteger 
a vida e a saúde do homem, dos animais e das 
plantas, bem como o meio ambiente. 
 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS AO LABORATORISTA 
- Vestimentas (evitar roupas de lã, veludo e fibras grossas) 
- Luvas 
- Não remover objetos de uso para fora da área técnica 
- Cobrir ferimentos 
- Não manusear ou armazenar alimentos 
- Não colocar material contaminado em locais de uso comum 
- Não fumar 
- Vacinação 
 
 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS À LIMPEZA 
- Limpezado do ambiente (hipoclorito de sódio 1%) 
- Limpeza de materias (lâminas, ponteiras, vidrarias) 
- Materiais de inox (água oxigenada 10 volumes) – 15 min. 
- Descarte de material biológico 
- Contaminação de bancadas com líquidos 
- Evitar o uso de álcool na descontaminação de superfícies 
- Dispor adequadamente do lixo e resíduos 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS À LIMPEZA 
- Limpeza das mãos com sabão neutro 
- Desinfecção com álcool 70%, glicerinado 3% 
- Aventais e roupas contaminadas 
 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS À MANIPULAÇÃO DE MATERIAIS NO 
LABORATÓRIO 
- Manter frascos devidamente fechados 
- Não tampar ou abrir frascos na altura dos olhos 
- Não reencapar agulhas 
- Descartar vidrarias danificadas 
- Não pipetar reagentes com a boca 
- Centrifugar em sistema fechado 
 
 
 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS À MANIPULAÇÃO DE MATERIAIS NO LABORATÓRIO 
- Não abrir a centrífuga em movimento 
- Considerar qualquer material como potencialmente 
contaminado 
- Materiais não descartáveis hipoclorito 1% (10 min.) antes da 
lavagem e esterilização 
- NUNCA CHEIRAR REAGENTES 
- Todo reagente deve estar identificado/rotulado 
- Não colocar pipetas contaminadas na superfície de balcão 
 
 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS À MANIPULAÇÃO DE MATERIAIS NO 
LABORATÓRIO 
- Não descartar fluidos na pia 
- Evitar produção de aerossol 
- Não colocar recipientes com substâncias líquidas sobre 
equipamentos 
 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS AOS EQUIPAMENTOS 
- Manutenção preventiva 
- Aferição 
- Manutenção de registros 
- Limpeza adequada 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS AOS PRODUTOS QUÍMICOS 
- Produtos inflamáveis 
Seguir as recomendações do fabricante 
Rótulos e símbolos 
Armazenar em armários metálicos fechados 
Produtos voláteis 
Considerar: temperatura, inflamabilidade, explosão, 
evaporação 
Não fumar 
Normas gerais de biossegurança 
• RELACIONADOS AOS PRODUTOS QUÍMICOS 
- Reagentes 
Seguir as recomendações do fabricante 
Corrosivos – armazenamento e transporte 
Inspecionar o estoque 
Não fumar 
Substâncias radioativas 
Substâncias mutagênicas, carcinogênicas 
Níveis de biossegurança (NBS) 
• NÍVEL 1 
- Agentes bem caracterizados 
- Isolamento do laboratório não é necessário 
- Equipamentos especiais ou construção não são requeridos 
 
 
Níveis de biossegurança (NBS) 
• NÍVEL 2 
- Agentes com perigo potencial para as pessoas e ambiente 
- Moderado risco individual e baixo para a comunidade 
- Existe tratamento efetivo, medidas preventivas e o risco de 
disseminação é limitado 
- Acesso ao laboratório é limitado 
- Precauções com materiais cortantes 
- Cabine biológica nível I ou II 
 
Níveis de biossegurança (NBS) 
• NÍVEL 2 
- Proibido entrada de pessoas imunossuprimidas 
- Experimentos envolvendo: 
- Helmintos 
- Protozoários 
- Maioria dos fungos, bactérias e vírus 
- “Precauções Universais” – Práticas com componentes 
humanos 
- # HIV – nível 2 
Níveis de biossegurança (NBS) 
• NÍVEL 3 
- Clínica, diagnóstico, aulas, pesquisa 
- Agentes que ocasionam sérias doenças 
- Alto risco individual e baixo para a comunidade 
- Tratamento e medidas preventivas viáveis 
- Cabines de segurança II e III 
- Utilização de máscaras e respiradores 
- Descontaminação 
- Acesso limitado 
- Proibido entrada de imunossuprimidos 
 
Níveis de biossegurança (NBS) 
• NÍVEL 4 
- Patógenos altamente infecciosos 
- Tratamento e medidas preventivas não são viáveis 
- Alto risco individual e para a comunidade 
- Isolamento do laboratório 
- Acesso limitado 
- Banho químico e descontaminação 
- Cabine de segurança classe III com EPI 
- Descarte mediante autoclave 
 
 
 
Níveis de biossegurança (NBS) 
• NÍVEL 4 
- Patógenos altamente infecciosos 
- Tratamento e medidas preventivas não são viáveis 
- Alto risco individual e para a comunidade 
- Isolamento do laboratório 
- Acesso limitado 
- Banho químico e descontaminação 
- Cabine de segurança classe III com EPI 
- Descarte mediante autoclave 
 
 
 
Animais de laboratório 
• NÍVEL 1 
- Manutenção de animais sadios 
- Inoculados com agentes do 
grupo de risco 1 
- Boas técnicas microbiológicas 
 
 
 
• NÍVEL 2 
- Inoculação com agentes do 
grupo de risco 2 
- Animais somente para uso 
experimental 
- Descontaminação 
- Incineração 
 
 
Animais de laboratório 
• NÍVEL 3 
- Inoculação com agentes do 
grupo de risco 3 
- Salas e gaiolas isoladas 
- Sistema de ventilação e 
exaustão atrás das gaiolas 
 
 
 
• NÍVEL 4 
- Práticas semelhantes à NBS 4 
- Todos os resíduos devem ser 
autoclavados 
 
Animais de laboratório - Invertebrados 
• Reservatórios ou vetores de patógenos 
• De acordo com o grupo de risco do agente 
• Salas com isolamento e fumigação 
• Dispositivos anti-artrópodos 
• Descontaminação do lixo pelo calor 
• Insetos voadores (ATENÇÃO ESPECIAL) 
• Supervisão constante 
Normas de esterilização e desinfecção 
• Limpeza 
• Esterilização 
• Desinfecção 
• Antissepsia 
• Detergentes 
• Assepsia 
• Germicida 
• Bacteriostático 
Normas de esterilização e desinfecção 
• Calor úmido 
- Coagulação de proteínas 
Relação umidade e temperatura para coagulação da 
ovoalbumina 
UMIDADE (%) Temperatura para coagulação 
50 56 
25 74-80 
18 80-90 
6 145 
0160-170 
Normas de esterilização e desinfecção 
• Calor úmido 
- Fervura * 
- Vapor sob pressão (15 libras por polegada2) 
 
 121oC 
- Controle da esterilização – Bacilus stearothermophilus 
 
Normas de esterilização e desinfecção 
• Calor seco 
- Oxidação de proteínas 
- Combinação de temperatura e tempo 
- 121oC por 12 horas 
- 160oC por 2 horas 
- 170oC por 1 hora 
- 170oC por 2 horas (HIV) 
 
 
Normas de esterilização e desinfecção 
• Flambagem 
• Filtração 
• Agentes químicos 
• Radiação: 
a) ionizantes, 
b) raios X, beta, gama 
 
Setor de limpeza e esterilização 
- Desprezar o conteúdo das vidrarias 
- Passar em água corrente tratada 
- Manter em recipientes com hipoclorito (1%) 
- Romover marcações 
- Enxaguar 
- Levar à estufa a 180oC por 2 horas 
Equipamentos de proteção individual 
Equipamentos de proteção individual 
- Níveis mínimos de proteção: 
- Luvas 
- Máscaras, óculos, escudo facial 
- Protetor respiratório 
- Avental 
- Gorro 
- Calçados 
 
Equipamentos de proteção individual 
Recomendaçõs para profilaxia das doenças 
infecciosas 
- Limpeza rigorosa do local atingido 
- Ingestão 
- Comunicar o chefe do laboratório 
- Precauções ao manipular materias perfuro-cortantes 
- Domínio do conhecimento das doenças