identificação de proteina (1)

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Faculdade Estácio de Sá
Curso: Farmácia- Enfermagem
Disciplina:Bioquímica
Profª. Dra. Sônia Aparecida Viana Câmara
Aula Prática: IDENTIFICAÇÃO DE PROTEÍNA
 – REAÇÃO DO BIURETO
 
1 – Fundamento 
	A reação do biureto ocorre com substâncias que contenham grupos amida e grupos nitrogenados. Sendo assim, essa reação é positiva para todas as proteínas e peptídeos graças às suas ligações peptídicas. Estas moléculas, quando tratadas com uma solução diluída de sulfato de cobre, em meio alcalino, dão coloração púrpura característica, devido à formação do complexo de coordenação entre o átomo de cobre e 4 átomos de nitrogênio.
Biureto - (complexo de coordenação entre peptídeos e cobre II, de cor púrpura)
2. Preparo dos reagentes 
Solução de Hidróxido de sódio a 10% - pesar 10 g de NaOH e dissolver em 100 mL de água deionizada.
REAGENTE DO BIURETO
Solutos: sulfato cúprico (CuSO4), hidróxido de sódio (NaOH) e tartarato de sódio e potássio (KNaC4H4O6·4H2O). 
Solvente: água destilada (H2O).
Procedimento: Dissolver 1,5g de sulfato cúprico em 50mL de água quente. Misturar esta solução com 30mL de solução de NaOH a 10% e 0,6g de tartarato de sódio e potássio. Completar o volume com água destilada para 100mL. Condições de armazenamento: Armazenar em frasco de polietileno e ao abrigo da luz direta.
Solução de clara de ovo
1. Colocar uma clara de ovo no béquer e, com cuidado, agitar com um bastão de
vidro até formar espuma.
2. Adicionar água destilada até 50mL.
3. Filtrar a mistura usando um pedaço de gaze. Colocar o filtrado obtido em frasco e rotular
4. Armazenar em geladeira
Solução de gema de ovo
Colocar uma gema de ovo no béquer e, com cuidado, agitar com um bastão de
vidro até dissolver bem
2. Adicionar água destilada até 50mL.
3. Filtrar a mistura usando um pedaço de gaze. Colocar o filtrado obtido em frasco e rotular
4. Armazenar em geladeira
3. – Procedimento
Numerar 4 tubos de ensaios de 1 a 4 
Proceder conforme tabela abaixo:
	Tubos
	Amostras
	Quant./
amostras
	Reagente de Biureto
	Observação 
	1
	Água (controle)
	2mL
	1mL
	
	2
	Clara de ovo
	2mL
	1mL
	
	3
	Gema de ovo
	2mL
	1mL
	
	4
	Leite pasteurizado
	2mL
	1mL
	
Observar que em alguns tubos haverá formação de uma coloração violeta, característica de reação positiva, enquanto que no tubo contendo apenas água e os reagentes verificar-s uma cor azul escura característica do cobre em meio alcalino (formação de Cu (OH)2, e de óxidos de Cu). 
Relatório:
O relatório deve seguir o roteiro postado no SIA
Deve responder as seguintes questões:
1- Introdução _ O que é reativo de Biureto e para que serve?
2- Procedimento – Descrever a prática realizada
3- Resultados – Descrever os resultados observados
4- Discussão – Responder os questionamentos:
Porque houve mudança de cor nos testes?
Que reação acontece na mudança de cor ?
O que aconteceu com o tubo que contém água ?
5- Conclusão – concluir os resultados encontrados.
6- Referências _ listar as referências bibliográficas que foram pesquisadas para realizar o relatório