Anti imunoglobulina

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Detecção de anticorpo anti-imunoglobulina
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Fator reumatóide (FR)
 Anticorpos contra a porção Fc da IgG.
 Geralmente são IgM, mas podem ser também IgA e IgG.
 Artrite reumatoide: auto-anticorpos anti-IgG frequentes e em níveis elevados.
2
Fator reumatóide (FR)
 Doenças autoimunes: artrite reumatoide, lupus eritematoso sistêmico.
 Infecções: hanseníase, malária, mononucleose, esquistossomose, tuberculose, sífilis.
 Neoplasias 
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Fator reumatóide (FR)
 FR é importante para definir a fase da doença: 
FR não é reativo até os 6 meses após a instalação da doença ativa. 
Quantidades elevadas (altos títulos) indica gravidade.
 A correlação entre FR e artrite reumatóide é inconclusiva, e um diagnóstico positivo sempre necessita de correlação com o estado clínico.
4
 5% dos jovens saudáveis da população mundial apresenta FR positivo.
 40% dos idosos pode apresentar FR positivo.
FR em indivíduos normais
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 5% dos jovens saudáveis da população mundial apresenta FR positivo.
 40% dos idosos pode apresentar FR positivo.
FR em indivíduos normais
 Anti-imunoglobulina para eliminar anticorpos em excesso.
SI está muito ativado e por longo tempo.
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Testes para detecção do FR
 Waaler-Rose
 Teste de látex
Nefelometria
Testes para detecção do FR
 Waaler-Rose:
Hemáceas de ovelha sensibilizadas com IgG de soro de coelho anti-hemáceas de ovelha + soro (amostra teste). 
Aglutinação
Nefelometria
A nefelometria é totalmente automatizada, de fácil realização, rápida e precisa.
Emprega pequenos volumes de amostra e tem alta sensibilidade. 
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Anti-IgG
Amostra
Teste de Látex
Anti-IgG
Amostra
FR- Látex
Látex sensibilizado com IgG
IgG
Teste de Látex
Anti-IgG
Amostra
FR- Látex
Látex sensibilizado com IgG
IgG
Homogenização
Teste de Látex
Anti-IgG
Amostra
FR- Látex
Látex sensibilizado com IgG
IgG
Homogenização
Fc
Fc
Teste de Látex
Anti-IgG
Amostra
FR- Látex
Látex sensibilizado com IgG
IgG
Homogenização
Fc
Fc
Teste de Látex
Anti-IgG
Amostra
FR- Látex
Látex sensibilizado com IgG
IgG
Homogenização
Fc
Fc
Teste de Látex
Anti-IgG
Amostra
FR- Látex
Látex sensibilizado com IgG
IgG
Homogenização
Aglutinação
Teste de Látex
Anti-IgG
Amostra
FR- Látex
Látex sensibilizado com IgG
IgG
Homogenização
Aglutinação
Teste de Látex
Anti-IgG
Amostra
FR- Látex
Látex sensibilizado com IgG
IgG
Homogenização
Aglutinação
Teste de Látex
Reações de precipitação
Envolvem a combinação de antígenos solúveis com anticorpos solúveis para produzir complexos insolúveis visíveis.
Curva de formação de imunocomplexo 
Vantagens e desvantagens
 Vantagens:
 Mais barato.
 Permite saber a fase da doença.
 Mais sensível que o teste de waaler-rose.
 Desvantagens: 
Inespecificidade maior que o teste de waaler-rose.
 Pode ser detectado por conta de outras infecções por exemplo.
 Demora para a leitura, se passar de 2 minutos podem ocorrer aglutinações inespecíficas. 
 Soros lipêmicos, hemolisados ou contaminados podem aglutinar inespecificamente.
 Presença de fibrinogênio (proteína responsável pela coagulação) pode causar interferência.
 
Falso positivo
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 Reagentes em baixa temperatura perdem sensibilidade.
 Efeito prozona: ocorre qdo uma amostra com valor elevado de FR apresenta resultado negativo. 
Até a concentração 1500U/mL não há efeito prozona.
 
Falso negativo
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TESTE DO LÁTEX PARA DETECÇÃO DO FATOR REUMATÓIDE
 
Material: 
 
FR-Látex (suspensão do látex sensibilizado com IgG).
Controle positivo (soro policlonal de animal anti-gamaglobulina humana).
Controle negativo (soro animal estabilizado sem fatores reumatoides).
Soro teste. 
Lâmina de vidro.
Hastes para homogenização.
Fundo escuro para a leitura.
Tubo
 
Roteiro
TESTE DO LÁTEX PARA DETECÇÃO DO FATOR REUMATÓIDE
 
Método:
 
1. Os reagentes devem estar à temperatura ambiente (a sensibilidade do reagente diminui em baixa temperatura).
2. Coletar aproximadamente 3mL de sangue de doares voluntários e colocar num tubo.
3. Centrifugar os tubos a 2000 rpm por 10 minutos.
4. Coletar o soro.
5. Colocar em lâminas de vidros limpas e secas:
 
20uL do controle negativo
20uL controle positivo
20uL Soro a ser testado
 
 
Roteiro
TESTE DO LÁTEX PARA DETECÇÃO DO FATOR REUMATÓIDE
 
Método:
 
6. Agitar o frasco de suspensão do látex e colocar 20uL da suspensão sobre as amostras.
7. Homogeneizar utilizando-se a haste plástica fazendo movimentos circulares por 2 minutos (atenção: uma haste para cada amostra e desprezar a haste utilizada).
8. colocar a lâmina sobre um fundo escuro.
9. Após 2 minutos, observar a aglutinação das partículas de látex sobre o fundo escuro (atenção: a leitura deve ser feita após exatos 2 minutos, após esse tempo podem ocorrer aglutinações inespecíficas).
10. Anotar os resultados.
 
Roteiro