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PROCESSOS FERMENTATIVOSPROCESSOS FERMENTATIVOS METABOLISMO MICROBIANO � Soma de todas as reações químicas que ocorrem no interior da célula � Catabolismo Anabolismo� Anabolismo � Reações enzimáticas celulares divididas em: � Reações degradativas: Transformam glicose do meio de cultura em compostos orgânicos e fundamentais (metabólitos-chaves para o anabolismo) � Ex: C6H12O6 + O2 � CO2 + H2O, libera 686Kcal/mol Reações de biossintese de precursores • Aminoácidos: precursores de proteínas • Nucleotídeos: precursores de ácidos nucleicos METABOLISMO MICROBIANO � Nestas reações estão incluídas síntese de vitaminas, coenzimas e cofatores (que não são precursores, mas são necessários para o funcionamento adequado das enzimas) Reações de biossintese macromoléculas � Reações responsáveis pela produção de macromoléculas características de cada célula. � Estas reações são reguladas pelo DNA Crescimento Microbiano � Aumento do material celular em termos de massa ou número de célula=> resultado de uma série de reações catalizadas enzimaticamente. � Depende do transporte de nutrientes necessários para a superfície METABOLISMO MICROBIANO � Depende do transporte de nutrientes necessários para a superfície das células (transferência de massa) e de outros parâmetros, tais como manutenção de temperatura e pH. Fases do crescimento � Fase lag: fase de adaptação � Microrganismos velhos ou meio de cultura novo METABOLISMO MICROBIANO � Fase de crescimento exponencial � Microrganismo está na plenitude de sua capacidade e o suprimento de nutrientes é superior às necessidades do mesmo � Ainda não se acumularam substâncias tóxicas O aumento do número de células se faz segundo uma � O aumento do número de células se faz segundo uma progressão geométrica � Para microrganismos que fazem divisão binária: N = No . 2n Em que, N = número de células no final de n divisões ou gerações No = número inicial de células � Pode-se calcular a velocidade específica de crescimento (µµµµ) para cada microrganismo em cada situação � Fase estacionária: número de células novas é igual ao número de células que morrem • Pode se dar devido ao acúmulo de metabólitos tóxicos, esgotamento de nutrientes e O (para aeróbios) METABOLISMO MICROBIANO tóxicos, esgotamento de nutrientes e O2 (para aeróbios) � Fase de declínio: número de células que morrem é maior do que as que surgem. METABOLISMO MICROBIANO Metabólito primário: forma-se durante a primeira fase do desenvolvimento do microrganismo METABOLISMO MICROBIANO microrganismo � Ex: fermentação alcoólica Metabólito secundário: forma-se na fase final de crescimento ou na fase estacionária � Ex: biossurfactante CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS � Análise da evolução dos valores de um ou mais componentes do sistema de cultivo, em função do tempo � Permite aumento de escala� Permite aumento de escala � Análise comparativa entre diferentes condições de cultivo => otimização do processo Sem obtenção de valores intermediários não há estudo cinético � COMPONENTES DO PROCESSO FERMENTATIVO CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS •Microrganismos X•Microrganismos •Produtos do metabolismo •Nutrientes X P S X, P e S => quando representados em função do tempo, permitem traçar as curvas de ajuste CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS Curva de ajuste de um experimento idealizado de fermentação CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS � Velocidade de Crescimento Microbiano: � rx=dX/dt Velocidades instantâneas de transformação � rx=dX/dt � Velocidade de Consumo de Substrato � rs= - dS/dt � Velocidade de Formação de Produto � rp=dP/dt � Velocidade Específica de Crescimento Microbiano: µµµµx = 1/X.dX/dt CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS Velocidades específicas de transformação � µµµµx = 1/X.dX/dt � Velocidade Específica de Consumo de Substrato � µµµµs = 1/X.(-dS/dt) � Velocidade Específica de Formação de Produto � µµµµp =1/X.dP/dt CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS Fator de conversão de Substrato em Biomassa � YX/S = dX/dS => YX/S = (X-X0)/(S0-S) Fator de conversão de Substrato em ProdutoFator de conversão de Substrato em Produto � YP/S = dP/dS => (P-P0) /(S-S0) Fator de conversão de Biomassa em Produto � Yp/x = dP/dX => (P-P0)/ (X0-X) = (massa produto-g)/( biomassa celular (g)) � Produtividade em biomassa:produção média (células ou produto) referente ao tempo total ou final da fermentação � Px = dX/tf => Px= (Xm –X0)/ tf CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS � Produtividade de produto Pp= dP/tf => Pp = (Pm – P0)/tf CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS NaNO3 Concentration - 5,0 g/L 2 4 6 8 P r o t e i n ( g / L ) 2 4 6 8 R h a m n o l i p i d s ( g / L ) Protein (g/L) RL (g/L) BNaNO3 Concentration - 4 g/L 2 4 6 8 P r o t e i n ( g / L ) 2 4 6 8 R h a m n o l i p i d s ( g / L ) Protein (g/L) RL (g/L) A 0 2 0 20 40 60 80 Time (h) P r o t e i n ( g / L ) 0 2 R h a m n o l i p i d s NaNO3 Concentration - 6 g/L 0 2 4 6 8 0 20 40 60 80Time (h) P r o t e i n ( g / L ) 0 1 2 3 4 5 R h a m n o i p i d s ( g / L ) Protein (g/L) RL (g/L) C NaNO3 Concentration - 7 g/L 0 2 4 6 8 0 20 40 60 80 Time (g/L) p r o t e i n ( g / L ) 0 2 4 6 8 R h a m n o l i p i d s ( g / L ) Protein (g/L) RL (g/L) D 0 2 0 24 48 72 Time (h) P r o t e i n ( g / L ) 0 2 R h a m n o l i p i d s � CLASSIFICAÇÃO DOS PROCESSOS FERMENTATIVOS � Formação de produto diretamente relacionada ao crescimento => formação de metabólitos primários (aa, alcool, nucleoideos) CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS � CLASSIFICAÇÃO DOS PROCESSOS FERMENTATIVOS � Formação de produto parcialmente associado ao crescimento=> formação de metabólitos secundarios (antibioticos, micotoxinas, biosurfactantes) NUTRIENTE LIMITANTE � A disponibilidade do nutriente tem influência determinante na taxa específica de crescimento; � Se o nutriente está presente em concentrações que limitam o CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS � Se o nutriente está presente em concentrações que limitam o crescimento das células, denomina-se nutriente limitante do crescimento. � Quando o nutriente limitante é a principal fonte de carbono e de energia, denomina-se substrato limitante do crescimento. � A maior parte das fermentações são dimensionadas de forma a que no final da fermentação temos a fonte de carbono como nutriente limitante. � Podemos ter, contudo, o nitrogênio e/ou o oxigênio como nutrientes limitantes. CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS EQUAÇÃO DE MONOD � Proposta para descrever o efeito do crescimento limitante em função da tx especifica de crescimento � O crescimento da biomassa é dependente da disponibilidade do nutriente. � Quando estamos em condições de limitação do nutriente =>µX reduz-se até cessar completamente o crescimento, em condições de exaustão do nutriente CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS � Equação Matemática de Monod ½µmax µmax µmax (h-1)� µmax taxa específica de crescimento máxima � Ks constante de saturação ou de Monod � S concentração do substrato limitante Ks S (mg/L) CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS Parâmetros de Monod µmax A taxa específica de crescimento máxima é a taxa máxima de A taxa específica de crescimento máxima é a taxa máxima de crescimento obtida para condições não limitantes. KS � A constante de Monod (Ks) é a concentração do nutriente limitante para a qual a taxa de crescimento é metade da taxa de crescimento máxima � Representa a afinidade do microorganismo com o nutriente � Os valores de µmax e Ks dependem do microorganismo, do nutriente limitante,do meio de fermentação e de fatores tais como: temperatura e Ph CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS Linearização de Linewever- Burk = a = b y = ax + b
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