RELATORIO BIURETO

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CENTRO UNIVERSITÁRIO UNINOVAFAPI 
CURSO: BIOQUÍMICA PARA ODONTOLOGIA 
PROFESSORA: MSC. JANCINEIDE OLIVEIRA DE CARVALHO 
AVALIAÇÃO QUALITATIVA DAS PROTEÍNAS: PESQUISA DA LIGAÇÃO 
PEPTÍDICA (REAÇÃO DO BIURETO) E REAÇÕES DE PRECIPITAÇÃO DAS 
PROTEÍNAS. 
ISADORA LEAL NUNES 
SARAH FEITOSA DUARTE 
MARIA AYLA ALMEIDA 
MELISSA BEZERRA CARVALHO 
TERESINA, ABRIL/2018 
ÍNDICE 
1. INTRODUÇÃO 3 ....................................................................................................................
2. OBJETIVOS 4 .........................................................................................................................
2.1 Objetivo Geral 4 .....................................................................................................................
2.2 Objetivos Específicos 4 ..........................................................................................................
3. MATERIAIS E MÉTODOS 5 .................................................................................................
4. RESULTADOS 6 .....................................................................................................................
5. DISCUSSÃO 7 ........................................................................................................................
6. CONCLUSÃO 9 ......................................................................................................................
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 10.....................................................................................
1. INTRODUÇÃO 
Proteínas são polímeros formados de diversas partes menores, monômeros, denominadas 
aminoácidos. São as macromoléculas biológicas mais abundantes em nosso organismo, 
ocorrendo em todas as células e em todas as partes das células (LEHNINGER, 2014). 
Todos os 20 tipos de aminoácidos comuns são α-aminoácidos. Isso significa que possuem 
um grupo carboxila e um grupo amino ligados ao mesmo átomo de carbono (o carbono α). Suas 
diferenças residem em suas cadeias laterais (grupos R), que variam em estrutura, tamanho e carga 
elétrica, e que influenciam a solubilidade dos aminoácidos em água. 
Dois aminoácidos se ligam uns aos outros através ligação covalente, uma ligação amida 
substituída, denominada ligação peptídica. Estas ligações se formam através da interação entre 
um grupamento α-amino de um aminoácido com o grupamento α-carboxila de outro aminoácido 
resultando na remoção de elementos de água (desidratação). Assim são formados dipeptídeos, 
que podem expandir sua cadeia em uma estrutura linear, a estrutura primária das proteínas 
(STRYER, 2004.) 
Uma reação geral que é capaz de caracterizar ligações peptídicas é denominada reação de 
biureto. Este é o nome dado à uma estrutura originada a partir da decomposição da ureia, quando 
esta é submetida a uma temperatura de aproximadamente 180ºC (PETKOWICZ, 2007). 
As proteínas podem ser desnaturadas por diversas condições, como temperatura elevada ou 
pHs extremos. Neste ultimo caso ocorre alteração da carga líquida da proteína, causando repulsão 
eletrostática e rompimento de algumas ligações de hidrogênio. levando frequentemente à 
precipitação dessas proteínas (LEHNINGER, 2014). 
Na atividade prática a ser realizada, procurou-se através da reação de biureto confirmar a 
natureza proteica de determinadas substâncias já conhecidas, e confrontar os resultados com um 
teste controle, realizado com água destilada. Foi também realizado precipitação destas proteínas, 
confirmando sua presença nas soluções estudadas. 
2. OBJETIVOS 
2.1 Objetivo Geral 
• Determinação qualitativa da presença de proteínas nas amostras estudadas 
2.2 Objetivos Específicos 
• Pesquisa da ligação peptídica através da reação do biureto 
• Verificar a precipitação das proteínas frente a ácidos e bases fortes 
• Verificar a precipitação das proteínas na presença de metais pesados 
3. MATERIAIS E MÉTODOS 
• Materiais de Laboratório 
• 7 mL de solução de ovoalbumina 2% 
• 1 mL de solução de gelatina 1% 
• 1 mL de H2O destilada 
• 3 mL do reagente de Biureto 
• 1 mL de H2SO4 concentrado 
• 1 mL de NaOH concentrado 
• 5 gotas de solução de HgCl2 5% 
• 5 gotas de solução de (CH3COO)2 Pb 10% 
1. PESQUISA DA LIGAÇÃO PEPTÍDICA (REAÇÃO DO BIURETO) 
Foram preparados 3 tubos de ensaio. TUBO 01 contendo 1 mL de solução de ovoalbumina 
2% + 1 mL de reagente de Biureto, o TUBO 02 contendo 1 mL de solução de gelatina 1% + 1 mL 
do resgente de Biureto e o TUBO 03 contendo 1 mL de H2O destilada + 1 mL do reagente de 
Biureto. Os tubos foram então agitados, e o resultado registrado. 
2. REAÇÕES DE PRECIPITAÇÃO DE PROTEÍNAS 
 2.1. EFEITO DE ÁCIDOS E ÁLCALIS FORTES 
Foram preparados 2 tubos de ensaio. TUBO 04 contendo 1 mL de H2SO4 concentrado e 
TUBO 05 contendo 1 mL de NaOH concentrado. Adicionou-se cuidadosamente, pelas paredes de 
ambos os tubos, 1 ml de solução de ovoalbumina 2%. O resultado foi observado e registrado. 
 2.2. PRECIPITAÇÃO COM SAIS DE METAIS PESADOS 
Foram preparados 2 tubos de ensaio. TUBO 06 contendo 2 mL de solução de ovoalbumina 
2% + 5 gotas de solução de HgCl2 5% e TUBO 07 contendo 2 mL de solução de ovoalbumina 2% 
+ 5 gotas de solução de (CH3COO)2 Pb 10%

4. RESULTADOS 
TABELA 01. AMOSTRAS UTILIZADAS PARA IDENTIFICAÇÃO DE PROTEÍNAS 
FONTE: Dados obtidos LAB. BIQ UNINOVAFAPI. ODONTOLOGIA. 2018. 
TABELA 02. REAÇÃO DE BIURETO 
FONTE: Dados obtidos LAB. BIQ UNINOVAFAPI. ODONTOLOGIA. 2018. 
TABELA 03. PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS E ÁLCALIS 
FONTE: Dados obtidos LAB. BIQ UNINOVAFAPI. ODONTOLOGIA. 2018. 
TABELA 04. PRECIPITAÇÃO POR METAIS PESADOS 
FONTE: Dados obtidos LAB. BIQ UNINOVAFAPI. ODONTOLOGIA. 2018.

AMOSTRA BIURETO COR
TUBO 01 Ovoalbumina 2% POSITIVO LILÁS
TUBO 02 Gelatina 1% POSITIVO LILÁS
TUBO 03 H2O destilada NEGATIVO INCOLOR
AMOSTRA
TUBO 01 Ovoalbumina 2%
TUBO 02 Gelatina 1%
TUBO 03 H2O destilada
TUBO 04 1 mL Ovoalbumina 2% + H2SO4
TUBO 05 1 mL Ovoalbumina 2% + NaOH
TUBO 06 2 mLOvoalbumina 2% + HgCl2 5%
TUBO 07 2 mLOvoalbumina 2% + (CH3COO)2 Pb 10%
AMOSTRA PRECIPITAÇÃO COR TIPO
TUBO 04 1 mL Ovoalbumina 2% + H2SO4 POSITIVO ALARANJADO ÁCIDO
TUBO 05 1 mL Ovoalbumina 2% + NaOH NEGATIVO INCOLOR BASE
AMOSTRA PRECIPITAÇÃO COR
TUBO 06 2 mLOvoalbumina 2% + HgCl2 5% NEGATIVO INCOLOR
TUBO 07 2 mLOvoalbumina 2% + (CH3COO)2 Pb 10% POSITIVO BRANCO INTENSO
5. DISCUSSÃO 
A reação do biureto é utilizada afim de avaliar a presença ou ausência de peptídeos com 
pelo menos 3 ou mais resíduos de aminoácidos numa amostra estudada. As proteínas ou 
peptídeos interagem com o reagente de biureto (uma solução diluída de sulfato de cobre em meio 
alcalino). Nesta reação, o NaOH, presente em solução, causa um desarranjo estrutural em sua 
cadeia tridimensional, possibilitando que os íons cobre presentes em solução, provenientes do 
sulfato de cobre, formem um complexo com os aminoácidos. Esse complexo formado confere 
uma coloração púrpura característica a solução. 
O TUBO 1 contendo solução de ovoalbumina 2%, quando submetido ao experimento ficou 
roxa, demonstrando a presença de peptídeos na solução. Porém, o TUBO 2 que continha gelatina 
1% ficou roxa, porém, com coloração menos intensa. Isso se deve ao fato de que a intensidade da 
cor é proporcional ao número de ligações peptídicas existentes na amostra. O TUBO 3 contendo 
água destilada submetida ao mesmo procedimento apresentou coloração azul clara, ou seja, não 
reagente, apresentando a mesma coloração do reagente Biureto, não indicativo da presença de 
proteínas, mas provavelmente por conta da alcalinização do sulfato de cobre. 
As proteínas também podem ser desnaturadas por pH extremos que alteram a carga líquida 
da proteína,causando repulsão eletrostática e o rompimento de algumas ligações de hidrogênio. 
As estruturas desnaturadas resultantes desses vários tratamentos não são, necessariamente, as 
mesmas. A desnaturação frequentemente leva à precipitação de proteínas, uma consequência da 
formação de agregados proteicos pela exposição de superfícies hidrofóbicas associadas. No 
TUBO 04, foi verificada essa precipitação após adição de 1 mL de H2SO4 concentrado, 
apresentando a coloração alaranjada. Porém, o mesmo não foi verificado no TUBO 05 com 
adição de 1 mL de NaOH concentrado, não apresentando precipitação, e não apresentando a 
coloração, ou seja, incolor. 
No experimento de precipitação por sais de metais pesados, foi verificado o efeito destas 
substâncias sobre a solubilidade da proteína. Os cátions de metais pesados como Hg2+, Cu 2+, 
Fe2+, Pb2+, dentre outros, formam precipitados insolúveis de proteínas (ex: proteinato de 
mercúrio, proteinato de chumbo, no experimento em questão). No TUBO 06, a adição de 5 gotas 
de solução de HgCl2 5% não provocou precipitação de proteínas, e não apresentou coloração , ou 
seja, incolor. Enquanto no TUBO 07, a de solução de (CH3COO)2 Pb 10% levou à formação 
substância de cor branca intensa, com precipitação. 

6. CONCLUSÃO 
Reações como as de coloração e precipitação de proteínas permitem a caracterização de 
substâncias dessas pela análise de suas propriedades químicas e físicas, como a presença de 
ligações peptídicas presentes nas proteínas. A detecção de proteínas nos materiais biológicos 
estudados envolveram reações especificas com determinados reativos, reagente de biureto, ácidos 
fortes, álcalis fortes e sais de metais pesados, demonstrando a presença das mesmas de forma 
satisfatória, através de teste comparativo com grupo controle. 

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
BERG, Jeremy Mark; TYMOCZKO, John L.; STRYER, Lubert. Bioquímica. 5. ed. Rio de 
Janeiro (RJ): Guanabara Koogan, 2004. 
Nelson, David L.; COX, Michael M. Princípios de bioquímica de Lehninger. Porto Alegre: 
Artmed, 2011. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2014. 
PETKOWICZ, C.L.O. Bioquímica: aulas práticas. 7. ed. Curitiba: Ed. UFPR, 2007.