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ESPERMOGRAMA FACULDADE INTEGRAL DIFERENCIAL – DEVRY | FACID CURSO DE FARMÁCIA (BLOCO: VII) DISCIPLINA: CITOLOGIA CLÍNICA PROFº: Me. PAULO PEDRO NASCIMENTO COMPONENTES: DANDARA FERNANDES DÉBORA NEGREIROS EZEQUIELINA LEAL ISNÁRIA OLIVEIRA MAYARA CARVALHO Composição do sêmen Vesículas seminais Fluido levemente alcalino; +50% do sêmen; Ácido cítrico, flavinas, frutose e potássio. Testículos Formação dos espermatozóides. Epidídimo Maturação dos espermatozóides. Canais deferentes Propulsão do esperma para os ductos ejaculatórios. Próstata Fluido ligeiramente ácido; 20% do sêmen; Fosfatase ácida, ácido cítrico e enzimas proteolíticas; Coagulação e liquefação. Glândulas bulbouretrais muco espesso e alcalino; 5% do sêmen; Neutraliza o ácido prostático e a acidez vaginal. 2 Formação dos espermatozóides A espermatogênese, dura 74 dias e envolve diversas fases. Espermatocitogênese: duas etapas, nas quais as espermatogônias sofrem divisão mitótica e maturação em espermatócitos; Meiose: divisão celular que resulta em gametas haploides; Espermiôgenese: transformação de espermátide a espermatozóide. 3 Parâmetros avaliados: Análise do sêmen Indicações: 4 Coleta e manipulação de amostras A amostra deve ser obtida por masturbação após 48 a 72 horas de abstinência sexual; Preservativos não devem ser usados; Os recipientes para a coleta devem ser de vidro ou plástico, limpos e com abertura ampla; O paciente deve ser orientado a evitar perda de material; É preferível que a coleta seja realizada no próprio laboratório em recinto privativo e confortável; A amostra deve ser etiquetada, com todos os dados do paciente, além da data e horário da coleta. 5 Se houver necessidade de transporte a partir de um local distante do laboratório, a amostra deve ser mantida em temperatura próxima a corporal. O paciente deve ser questionado se houve perda de parte do espécime. Aspecto O sêmen é opaco e pode exibir várias cores normais: cinza, branco e amarelo-claro; Característico odor rançoso; Análise do sêmen ↑ turbidez: Presença de leucócitos e infecção no trato reprodutivo cor castanha ou vermelha: Presença de eritrócitos cor amarelo-escuro: Concentração de flavina Medicações Períodos prolongados de abstinência sexual Contaminação com urina 6 Liquefação Amostra de sêmen fresco é coagulado e deve se liquefazer dentro de 30 – 60 minutos após a coleta; Se após 2 horas a amostra não tiver se liquefeito, enzimas proteolíticas (amilase ou bromelina) podem ser adicionadas; Falhas na coagulação ou liquefação devem ser relatadas; Análise do sêmen Deficiência de enzimas prostáticas Ausência bilateral dos ductos deferentes e vesículas seminais 7 Volume Pipeta sorológica ou pequena proveta graduada; Registrado em mL com precisão de uma casa decimal (0,1 mL); Volume normal: 2,0 a 5,0 mL (ejaculação total); Análise do sêmen 8 Viscosidade O sêmen normal é levemente viscoso; Derrama-se gota a gota; Análise do sêmen 9 pH Tiras reagentes utilizadas no exame de urina ou papéis específicos para pH; Alcalino com intervalo de 7,2 a 8,0; Análise do sêmen 10 Concentração Amostra diluída em água destilada, soro fisiológico ou fluido contendo bicarbonato de sódio e formol: Diluição manual 1:20; Contagem em câmara de Neubauer Análise do Sêmen 11 A diluição imobiliza os espermatozoides Quatro quadrados dos cantos ou no quadrado central grande Ambos os lados são carregados e contados e devem concordar em 10% 12 Análise do Sêmen Critérios de Inclusão: - Cabeças que tocam as bordas superiores e esquerda do campo Critérios de Exclusão: Cabeças que tocam as bordas inferiores e direita do campo Caudas Espermátides Leucócitos Concentração 13 Análise do Sêmen N= Número de Esp Contados D= Fator de Diluição A= Área em mm do quadrado Valores de Referência: Normal: superior a 20 milhões por mL Limítrofes: 10 a 20 milhões por mL Utilizando uma diluição de 1:100, o número de espermatozoides foi 25, que foram contados em 9 mm2. Qual a concentração? C x 1000 Concentração 14 Análise do Sêmen Concentração Oligosespermia: contagem de espermatozoides inferiores a 20 milhões; Azoospermia: total ausência de espermatozoides. Distúrbios cromossômicos Obstrução de dutos Drogas Deficiência de gonadotrofina Bloqueio da maturação Síndrome das células de Sertoli Motilidade Deve ser avaliada no prazo de até 1h após a coleta da amostra; A movimentação avaliada pode ser estimada em três categorias: Alta motilidade (progressiva); Baixa motilidade (não progressiva); Imóvel. A motilidade pode ser relatada em percentual de espermatozóides em cada categoria ou apenas o percentual de espermatozóides móveis. Sêmen normal: pelo menos 80% apresentam alguma progressão para frente. Análise do sêmen - 15 Aglutinação Pode ser observada durante a avaliação da motilidade; Observa-se distintamente agrupamentos cabeça a cabeça ou cauda a causa, podendo indicar presença de anticorpos anti-espermatozoides; IgG e IgA foram detectadas no sêmen de homens com fertilidade diminuída; Necessário confirmação com testes imunológicos. Análise do sêmen 16 Análise do sêmen 17 Viabilidade É uma importante causa para a infertilidade masculina; Mortos = sofrem danos na membrana e captam facilmente a eosina: coram-se de vermelho; Viáveis = membrana intacta e não permitem a penetração de eosina: incolores; Viabilidade e motilidade nem sempre estão correlacionadas; A proporção de espermatozoides móveis não deve ser superior à proporção de viáveis; Normal: > 75% dos espermatozóides são viáveis. Conta-se 100 espermatozóides das duas categorias (morto e viável) e relata-se o % viável. Análise do sêmen 18 Morfologia A presença de espermatozoides morfologicamente incapazes de fertilizar, resultam em infertilidade; É avaliada em relação à estrutura da cabeça (penetração no óvulo) e gorjal, peça intermediária e cauda (motilidade); Pelo menos 200 espermatozoides devem ser avaliados e a porcentagem de anormais deve ser relatada. 19 Morfologia Análise do sêmen Dupla cabeça Cabeça amorfa Dupla cauda Testes complementares FRUTOSE NO FLUIDO SEMINAL Teste de resorcinol, que produz cor laranja quando a frutose está presente; Concentração normal: ≥ 13 µmol/ejaculado; 20 Testes complementares 21 FOSFATASE ÁCIDA Avaliação da função secretória da próstata; Concentração normal: ≥200U/ejaculado; Determinação da presença de fosfatase ácida no líquido vaginal, lavados cutâneos ou vestimentas auxilia na validação de agressão sexual; HORMÔNIOS Útil na diferenciação das causas de azoospermia; Testosterona, FSH e LH; Os níveis desses hormônios são normais quando a azoospermia é causada por obstrução de ducto ou interrupção da maturação. MICROBIOLOGIA Presença de mais de 1 milhão de leucócitos/mm de sêmen indica infecção do S. reprodutor. Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum. Testes complementares 22 TESTE DE FUNÇÃO ESPERMÁTICA - PENETRAÇÃO Utiliza-se 2 tubos contendo muco cervical bovino, os quais são dispostos sobre uma lâmina graduada. Observa-se microscopicamente a distância percorrida pelo espermatozoide vanguardeiro nos 2 tubos, e a média é calculada. Espermatozoides normais percorrem, no mínimo, 30mm. ANTICORPOS ANTI-ESPERMATOZOIDES Podem estar presentes em homens e mulheres; Encontrados no soro e esperma; Em homens podem ser formados devido uma ruptura na barreira entre o esperma e o sangue; Testes imunológicos podem ser realizados como confirmação em casos que ocorrem aglutinação; 23 Análise automatizada de sêmen Analisador de esperma SQA-V (Medical Eletronic Systems); Relata a contagem de espermatozóides, morfologia, motilidade e13 parâmetros adicionais; Utiliza 20 µL da amostra. Não requer diluição da amostra; Pode ser feito com amostra fresca ou congelada; Elimina a subjetividade e a variação dentre os técnicos. 24 Teste rápido de fertilidade masculina 25 Referências MUNDT, L. A.; SHANAHAN, K. Exame de urina e de fluidos corporais de Graff. 2 ed. Porto Alegre: Artemed, 2012. STRASINGER, S. K.; LORENZO, M. S. Urinálises e fluidos corporais. 5 ed. São Paulo: Livraria Médica Paulista Editora, 2009. 26 Obrigada! Thank you! 27
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